富硒牡蠣粉對大鼠的免疫功能調節機制的研究

朱俊平 李志鵬

摘要：觀察富硒牡蠣粉的免疫調節及抗氧化作用。實驗方法：實驗大鼠60只，隨即分為6組：安靜對照組（I組）、安靜+給藥組（II組）、運動對照組（III組）、低劑量給藥+運動組（IV組）、中劑量給藥+運動組（V組）、高劑量給藥+運動組（VI組）。4個給藥組分別以劑量為1g/Kg/d、1g/Kg/d、2 g/Kg/d、3 g/Kg/d灌服富鋅牡蠣粉，對照組灌服等體積的蒸餾水，共6周。I組不運動，5個運動組大鼠進行6周遞增負荷游泳訓練，最后進行一次性力竭游泳。SPF級BALB/c小鼠隨機分為正常對照組、模型組、富硒牡蠣粉低、中、高劑量組，給藥1次/d，持續42d;檢測腦組織SOD活性、MDA及LPO含量，western blotting分析腦組織胞核Nrf2蛋白表達。結果：與對照組比較，富硒牡蠣粉高劑量組大鼠胸腺及脾臟指數顯著升高，各給藥組淋巴細胞增殖和巨噬細胞吞噬功能均顯著提高;富硒牡蠣粉中、高劑量和陽性對照藥能顯著提高模型小鼠腦組織SOD活性、降低MDA和LPO含量、增加Nrf2蛋白表達，富硒牡蠣粉低劑量能顯著減少小鼠腦組織MDA含量，增加Nrf2蛋白含量。結論：富硒牡蠣粉對免疫功能有良好的調節作用，同時可能通過調節腦組織Nrf2蛋白表達及其相關信號通路發揮抗氧化作用。

關鍵詞：富硒牡蠣粉;免疫力;抗氧化能力;保護機制

牡蠣，肉嫩味鮮，牡蠣肉富含牛磺酸、氨基酸、糖原等多種活性物質[1]，具有解熱抗炎，增強機體免疫力等功能，常用的滋補類中藥廣泛的應用于臨床疾病的治療[1]。李萌經研究發現，牡蠣糖氨聚糖能顯著降低I型單純皰疹病毒感染大鼠的死亡率，延長其存活時間，并明顯提高病毒感染大鼠的胸腺指數和脾臟指數，增強巨噬細胞吞噬能力，具有增強大鼠免疫功能的作用。。本研究擬通過建立大鼠遞增負荷游泳模型、一次力竭游泳運動模型，探討牡蠣提取液對長期訓練大鼠血漿溶菌酶含量、酸性磷酸酶（ACP）、脾臟指數（SI）、胸腺指數（TI）、胸腺組織中黃嘌呤氧化酶（XO）的活性與脾臟組織中髓過氧化物酶（MPO）的活性的影響，旨在為牡蠣作為一種新免疫增強劑運用于運動實踐提供理論依據。一些結果表明，牡蠣提取物非常顯著提高運動免疫功能抑制組大鼠的溶菌酶含量（P<0.01），降低ACP活性（P<0.01），血漿內溶菌酶的含量隨牡蠣提取液的劑量增加而上升，ACP活性隨牡蠣提取液劑量增加而減少。提示牡蠣提取液對抗大鼠的免疫抑制作用，增強大鼠溶菌酶含量、降低ACP活性，胸腺與脾臟XO、MPO的活性升高，自由基生成過多，造成組織的進一步損傷。一些研究成果表明，中藥免疫增強劑可以升高SI、TI，降低XO、MPO的活性。楊棟林[10]的研究表明八角茴香提取液對運動抑制組大鼠胸腺指數無顯著影響，但明顯增加脾臟的重量。鄧國良的研究表明，廣棗提取液可明顯增強大鼠缺氧時間，延長大鼠負重游泳時間，降低大鼠血乳酸水平，增加大鼠SI、TI值。帥學宏等人的研究表明，山豆根多糖通過改變機體內自由基相關酶的活性影響體內自由基的產生和清除能力，使機體免疫器官免受過氧化損傷，抵抗地米松導致的免疫抑制，增強大鼠的免疫功能。關于牡蠣藥理作用研究的文獻熱點。提高免疫功能研究。一些學者通過溶血空斑試驗、大鼠血清抗體凝集效價、血清白細胞介素-2（IL-2）活性測定等實驗研究牡蠣對實驗大鼠B淋巴細胞分泌特異性抗體及T淋巴細胞產生白細胞介素2的免疫調節作用，結果發現給予不同劑量牡蠣藥物的各組大鼠，其血清中抗綿羊紅細胞（SRBC）抗體凝集效價、脾淋巴細胞產生（Con A誘生）的IL-2活性明顯高于正常對照組（P<0.01）。

一材料

1.動物清潔雄性Wistar大鼠140只，42d齡，平均體重（197.1±13.8）g，首都醫科大學醫學部實驗動物科學部提供，在整個實驗測試過程中，保持實驗室內相對濕度48%～72%，正常光照。大鼠的實驗喂養按照基本飼料+純凈水模式嚴格投放食物。

2.實驗室試劑盒均由上海朝瑞生物科技有限公司。

二實驗方法

1.實驗樣品的處理。

2.研究富硒牡蠣多糖對大鼠免疫力保護機制。根據隨機原理，將140只大鼠隨機分為5個實驗組，分別為正常組，對照組，低劑量組，藥物干預組，以及牛大力提取物的高低劑量組，分別標號。

3.實驗測定。

三結果與分析

（一）檢測結果表明，模型組小鼠胸腺指數、脾臟指數均明顯低于對照組（P<0.01或P<0.05），富硒牡蠣高劑量組小鼠胸腺指數、脾臟指數明顯高于模型組（P<0.05）;各組間T細胞增殖能力無顯著變化;模型組小鼠B細胞增殖能力顯著低于對照組（P<0.05），富硒牡蠣高劑量組B細胞增殖能力明顯高于模型組（P<0.05）。表明給藥后胸腺指數、脾臟指數升高，B細胞增殖能力增加，體液免疫能力提高。模型組小鼠CD4+T淋巴細胞明顯較少，CD4+/CD8+值顯著降低（P<0.05）;富硒牡蠣高劑量組CD4+/CD8+值明顯高于模型組（P<0.01），但未達到正常值。表明給藥后明顯改善了T細胞亞群的免疫失衡狀態。

（二）檢測結果表明，模型組小鼠先沉于水下，體力明顯弱于對照組小鼠（P<0.05）;富硒牡蠣高劑量組和低劑量組小鼠體力明顯高于模型組小鼠（P<0.05）;且高劑量組明顯高于低劑量組（P<0.05）。模型組小鼠下丘腦DA含量明顯低于對照組（P<0.05），5-HT含量明顯高于對照組（P<0.01），富硒牡蠣高劑量組DA含量較模型組明顯提高（P<0.05），5-HT含量較模型組顯著降低（P<0.01）。模型組小鼠海馬區NR2AmRNA的表達水平明顯低于對照組（P<0.01），富硒牡蠣高劑量組NR2AmRNA表達水平明顯高于模型組（P<0.05），表明給藥后抑制了興奮性氨基酸類神經遞質傳導的異常。

四結論與討論

富硒牡蠣粉對免疫功能有良好的調節作用，同時可能通過調節腦組織Nrf2蛋白表達及其相關信號通路發揮抗氧化作用。

五參考文獻

[1]趙永才，付近梅，高炳宏.不同強度運動訓練對心肌凋亡途徑微小RNA及其靶蛋白的影響[J].中國應用生理學雜志，2018，34（1）：93-96.

[2]李萌等.運動性心房損傷和纖維化發生過程中基質金屬蛋白酶及其抑制劑表達變化[J].中國運動醫學雜志，2018，37（1）：36-41.

[3]劉峰.姜黃素對力竭運動大鼠心肌抗氧化、糖代謝及細胞凋亡的影響[J].揚州大學學報（農業與生命科學版），2017，38（2）：40-46.

[4]王茜，辛磊，陳笑歡，等.甲烷水對一次性力竭運動所致大鼠心肌損傷的保護作用[J].北京體育大學學報，2017，40（7）：43-48.

[5]錢鈺，殷維瑤，李華.過度疲勞狀態下運動性猝死模型大鼠甲狀腺及心臟功能變化[J].中國組織工程研究，2016，20（19）：56-63.

[6]趙冠華，佟長青，李偉，等.硫酸酯化牡蠣多糖對3種腫瘤細胞抑制及凋亡的影響[J].食品工業科技，2017，38（13）：302-306.

[7]趙冠華，曲敏，胡斯杰，等.硫酸酯化牡蠣多糖對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的影響[J].大連海洋大學學報，2018，33（-）：72-76.

通訊作者簡介：李志鵬，方向：運動人體科學，體育教育，廣西民族師范學院，532200

基金：2021廣西高校中青年教師基礎能力提升項目：富鋅牡蠣粉對運動大鼠免疫及運動抗疲勞能力研究（2021KY0425）