“脂肪的檢測和觀察”實驗改進

摘要：本文對“脂肪的檢測和觀察”實驗中的實驗材料和染液處理進行了改進。用花生子葉表皮細胞做實驗材料，省去切片的步驟，避免多層細胞的干擾，大大提高了實驗的成功率。用豬肉組織切片做實驗材料，透光率好，脂肪顆大，染色效果好。蘇丹Ⅲ染液通過靜置處理，只用上清液進行染色，既不影響染色效果，又能去除不溶物對染色的影響。

關鍵詞：脂肪 檢測和觀察 ?實驗改進 切片

“脂肪的檢測和觀察”是人教版高中生物必修1第2章第1節“檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質”實驗中的重要部分，是高一學生理解物質鑒定原理，掌握操作高倍顯微鏡的一個基礎性實驗，也是學生進入高中階段生物學科的經典實驗。若此實驗做不成功，在一定程度上會影響學生今后學習生物的興趣。

1 教材實驗方法及存在問題

關于脂肪的檢測，人教版舊教材提供了2種方法。方法一：向待測組織樣液中直接滴加蘇丹Ⅲ，觀察樣液的顏色。方法二：制作花生子葉臨時切片，用顯微鏡觀察子葉細胞著色情況。由于方法一的設計缺乏嚴謹性和科學性，在2019年人教版新教材中已經刪掉，只剩方法二。方法二設計合理可行，但切片是此實驗成功的關鍵，若切片太厚，其透光性差，視野暗，在顯微鏡下無法觀察到脂肪顆粒。由于花生種子較硬，大多數學生沒有掌握切片技巧，切片不均勻或不夠薄，導致實驗失敗率很高，嚴重影響實驗的進行和學生做實驗的積極性。

用于檢測脂肪的蘇丹Ⅲ染液常用的配制方法：取0.1g蘇丹Ⅲ粉末，置于20ml95%酒精中，充分攪拌使其溶解。在實際使用中發現蘇丹Ⅲ無法完全溶解于酒精中，會有一些粉末渣吸附在脂肪細胞上，用50%的酒精也無法洗掉，會嚴重干擾脂肪顆粒的觀察效果。

2 改進方法及效果

2.1生物材料的改進

2.1.1 用花生子葉表皮細胞代替花生子葉切片

具體操作：將提前1天浸泡過的花生種子，去掉種皮，子葉掰開，用手摳點帶肉的子葉再進行撕取，即可得到子葉表皮細胞，如圖1所示。將得到的表皮細胞直接放置于載玻片上直接滴加蘇丹Ⅲ染液染色，然后按照教材步驟進行后續操作，在100倍（圖2）物鏡下觀察，與花生子葉切片的100倍圖進行對照（圖3）。由于表皮細胞是單層細胞，避免了多層細胞的干擾，全班同學都能清晰地觀察到表皮細胞中的脂肪顆粒被染成橘黃色。此實驗過程省去了切片的步驟，取樣簡單，大大提高了實驗的成功率。

2.1.2 用豬肉脂肪組織切片代替花生子葉切片

具體操作：將豬肉脂肪組織放在冰箱的冷凍層過夜，拿出來后，馬上切片，很容易切出薄片。薄片放于載玻片上直接滴加蘇丹Ⅲ染液，后續操作與課本相同，在100倍（圖4）物鏡下觀察，與花生子葉切片對照（圖3），發現豬肉脂肪切片透光率比花生切片好，脂肪細胞和脂肪顆粒都比花生的大，染色效果比花生子葉細胞好。

2.2 蘇丹Ⅲ染液的改進

取0.1g蘇丹Ⅲ粉末置于20ml95%酒精中，充分攪拌溶解，然后讓其靜置分層，沉淀物是沒溶解的蘇丹Ⅲ粉末渣，倒出上清液備用。分別用蘇丹Ⅲ上清液與原液對花生表皮細胞染色，對比效果（圖2和圖5），發現上清液染料沒有粉末渣的影響，觀察效果清晰很多，蘇丹Ⅲ上清液為理想染液。

3 幾點反思

3.1要積極反思課堂中學生出現的問題

作為教學一線教師，有很多機會遇到學生的各種狀況。比如本實驗中切片的技巧對于有經驗的教師來說并不難，因此在學生上此實驗課之前，筆者都沒想過切片會是個“問題”。但是課堂上看到學生拿刀片的方式和切片的動作，才知道學生普遍動手能力較差，在家可能連切菜的機會都很少，因此要他們拿一粒小小的花生切出薄片，反倒成了難題。遇到學生的這種實際問題，筆者就想利用現有材料花生種子，能否不需要切片，就能觀察到有脂肪顆粒的細胞呢？鑒于對花生子葉結構的了解，知道花生子葉是由表皮細胞和貯藏細胞構成，再聯想到課本教材中用菠菜葉觀察葉綠體的實驗，取菠菜葉稍帶葉肉下表皮的方法，就是用撕取法。因此筆者嘗試用撕取法取花生子葉的表皮細胞，結果發現浸泡過的花生種子很容易撕下表皮細胞，且在顯微鏡下可觀察到細胞中含有大量的脂肪顆粒。既完美的利用了教材中的材料，又避免了切片的過程。

3.2 要勇于大膽嘗試新材料

選用豬肉脂肪組織作為實驗材料，筆者是受必修1第二章第三節教材內容的啟發，里面有一幅放大2200倍的動物脂肪細胞圖，其脂肪顆粒被蘇丹Ⅲ染色后又大又清晰。就想到用動物脂肪組織來代替花生子葉。由于豬肉脂肪較軟，直接切薄片不現實，又聯想到我們平常涮火鍋時羊肉薄片都是先冷凍再切片，就嘗試把豬肉組織先冷凍再切片，冷凍后的脂肪組織很容易切出薄片，進行染色后觀察，發現豬肉脂肪顆粒比花生脂肪顆粒大，在顯微鏡下觀察效果明顯。

3.3 要敢于質疑教材內容

教材中用50%的酒精溶液，洗去脂肪細胞上的浮色。但是在實際操作中發現，蘇丹Ⅲ很難完全溶解在酒精中，如果直接使用，會使一些沒有溶解的蘇丹Ⅲ吸附在細胞表面，用50%的酒精根本洗不掉，嚴重影響了觀察效果。因此筆者將染液靜置后，使上清液和沉淀物分開，染色時只用上清液，既不影響染色效果，又能去除不溶物對染色的影響。

生物教學中教材作為教學的藍本，但是教師可以根據自己學生實際遇到的情況，對教材實驗進行改進和創新，能夠起到優化實驗的目的，有助于增強學生學習生物的積極性，提高學生的參與意識，培養學生科學探究、創新精神和思維能力。

參考文獻

1.韋玲.“脂肪的檢測和觀察”實驗改進.生物學通報[J]，2019，54（7）：47-48

2.李福玉.“檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質”實驗問題及改進策略 生物學教學[J].2019，54（10）：40-41

3.陳海萍.“檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質”生物學教學[J].2020，41（7）：29-30

作者簡介：郭慧敏，1978年1月，女，漢，籍貫湖南，碩士研究生，中學生物教師