Xpert MTB/RIF在肺結(jié)核病及耐藥結(jié)核菌檢測中的應用價值分析

駱妙卡

結(jié)核病是臨床常見的傳染性疾病，我國作為結(jié)核病發(fā)病最為嚴重的國家之一，每年新發(fā)結(jié)核病患者超過130萬，占到全球每年新發(fā)病例的15%左右[1]。由此可見，結(jié)核病的防治形勢不容樂觀，須進一步加強防治工作。目前，對于肺結(jié)核病的診治和檢測方法較多，常見的有痰液培養(yǎng)、藥敏試驗等技術(shù)，盡管具有較為廣泛的開展率，但存在一定的不足，痰涂片陽性率較低，結(jié)核桿菌培養(yǎng)條件要求高，藥敏試驗周期長，容易造成誤診[2]。隨著分子生物學的快速發(fā)展以及對結(jié)核桿菌基因組的分析，新型的檢測方法Xpert MTB/RIF得到了廣泛的關(guān)注，在痰涂片及常規(guī)檢測手段上進行改進，可在短時間內(nèi)完成對結(jié)核桿菌及其耐藥性的檢測，得到了許多國家認可，對結(jié)核病的診斷做出了重要貢獻，但我國對其研究較少[3]。為此我院選取120例初診疑似肺結(jié)核病患者展開分析，對比不同方法對結(jié)核病的診斷情況，結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1～6月我院收治的120例疑似肺結(jié)核病患者，其中男57例(47.5%)，女63例(52.5%)；年齡21～78(54.16±3.59)歲。其中年齡≥60歲31例(25.83%)，40～59歲59例(49.17%)，<40歲23例(19.17%)。痰液性狀：干酪樣痰35例、黏液痰62例、血痰23例。

1.2方法

1.2.1檢測所用儀器設(shè)備和試劑 Xpert MTB/RIF檢測系統(tǒng)及試劑；酸性培養(yǎng)基；藥敏培養(yǎng)基。在檢測過程中，嚴格按照《結(jié)核病診斷細菌學檢驗規(guī)程》[4]相關(guān)要求操作。

1.2.2檢測操作 ①采用堿處理固體培養(yǎng)法進行分離培養(yǎng)藥敏試驗，若結(jié)果為陽性，則進行比例法藥敏試驗；②Xpert MTB/RIF檢測：根據(jù)1∶2的比例原則，將1 ml的標本溶于處理液中，輕微振動并將混合液搖勻，靜置15 min；③利用菌吸管吸取混合液，吸取量為2 ml，然后轉(zhuǎn)移至一次性反應盒中，放入檢測系統(tǒng)中進行檢測，并于2 h后利用檢測軟件讀取數(shù)據(jù)。

1.3觀察指標及評價標準 以傳統(tǒng)比例法藥敏試驗為金標準，分析不同方法檢測痰標本中結(jié)核桿菌及耐藥菌的陽性率以及抗酸染色法和Xpert MTB/RIF3的靈敏度、特異性。陽性：金標準確診有該疾病，試驗檢出的陽性例數(shù)；陰性：金標準確診無該疾病，試驗檢出的陰性例數(shù)。

1.4統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學分析，定性數(shù)據(jù)采用χ2檢驗，以P≤0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1固體培養(yǎng)法與Xpert MTB/RIF法檢測結(jié)核桿菌的陽性率比較 見表1。120例患者中，Xpert MTB/RIF檢測結(jié)核桿菌的陽性率為70.00%，高于固體培養(yǎng)法的55.00%(χ2=5.76，P<0.05)。

表1 固體培養(yǎng)法與Xpert MTB/RIF法檢測結(jié)核桿菌的陽性率比較 [例(%)]

2.2固體培養(yǎng)法與抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的陽性率比較 見表2。120例患者中，抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的陽性率為40.83%，低于固體培養(yǎng)法的55.0%(χ2=4.83，P<0.05)。

表2 固體培養(yǎng)法與抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的陽性率比較 [例(%)]

2.3Xpert MTB/RIF與抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的靈敏度、特異度比較 Xpert MTB/RIF檢測結(jié)核桿菌的靈敏度為70.83%(85/120)，特異度為88.33%(106/120)；抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的靈敏度為48.33%(58/120)，特異度為53.33%(64/120)；Xpert MTB/RIF檢測結(jié)核桿菌的靈敏度高于抗酸染色法(χ2=12.61，P<0.01)，特異度亦高于抗酸染色法(χ2=35.58，P<0.01)。

3 討 論

結(jié)核病作為一種傳染性疾病，其耐藥情況較為嚴重，受到了全社會的廣泛關(guān)注[5]。目前認為，涂片鏡檢法、傳統(tǒng)藥檢等是檢測結(jié)核菌的有效方式，但所需時間較長，特異度較低，影響藥敏報告的時效性。傳統(tǒng)固體培養(yǎng)法和比例法體外藥敏試驗需要時間為4～8周，因此在臨床診療過程中常延誤結(jié)核病的早期診斷和治療而導致預后不佳[6]。為此，探求合理的診斷方式對患者的治療至關(guān)重要。

隨著臨床醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的不斷發(fā)展，針對結(jié)核病的檢測技術(shù)日趨豐富，檢測水平有了明顯提高。其中Xpert MTB/RIF檢測技術(shù)是一種半巢式實時熒光定量PCR體外診斷技術(shù)，針對rpoB基因81 bp利福平耐藥核心區(qū)間設(shè)計引物、探針，對其是否發(fā)生突變進行檢測，同時對是否為肺結(jié)核病，或者是否對利福平耐藥進行檢測[7]。從世界各國對肺結(jié)核病及耐藥結(jié)核菌檢測技術(shù)的應用來看，Xpert MTB/RIF檢測技術(shù)是當前首選的檢測技術(shù)，其效果受到了社會的高度認可，在全自動檢測系統(tǒng)中完成檢驗，最終可以取得較準確的診斷結(jié)果。

本研究嘗試將Xpert MTB/RIF檢測技術(shù)應用于肺結(jié)核病及耐藥菌的檢測中，取得了理想的效果。研究結(jié)果顯示，在120例患者中，Xpert MTB/RIF的檢測陽性率(70.00%)高于固體培養(yǎng)法(55.00%)，說明對于疑似肺結(jié)核病患者Xpert MTB/RIF檢測應用價值高于固體培養(yǎng)法，與陸小玲[8]的研究結(jié)果一致。究其原因，固體培養(yǎng)法在應用酸、堿進行前處理時，會損傷標本中40%～70%結(jié)核菌活性，一定程度上影響結(jié)果的判別，同時部分患者痰液不是從肺深部咳出，含菌量少，其在玻片上黏附力差，在后續(xù)染色過程中會造成部分成分的大量丟失，導致檢出率降低。Xpert MTB/RIF檢測系統(tǒng)采用了實時熒光定量核酸擴增技術(shù)，操作簡單，全自動運行，降低污染，實施快速檢測，陽性率高。本研究結(jié)果顯示，固體培養(yǎng)法與抗酸染色法進行比較，抗酸染色法的陽性率(40.83%)低于固體培養(yǎng)法(55.0%)，說明對于疑似肺結(jié)核病患者固體培養(yǎng)法的陽性檢測值高于抗酸染色法，與周洪經(jīng)等[9]研究結(jié)果一致。究其原因，抗酸染色法操作簡單、快速，但靈敏度較低，容易出現(xiàn)漏檢，從而影響診斷結(jié)果，其中不排除檢測人員技術(shù)水平，是否按照操作要求執(zhí)行的問題，固體培養(yǎng)法是傳統(tǒng)的結(jié)核桿菌檢驗方法，可準確判斷出患者是否有結(jié)核桿菌耐藥菌的感染。

本文采用Xpert MTB/RIF、抗酸染色法、固體培養(yǎng)法三種方法進行檢測，研究結(jié)果顯示，Xpert MTB/RIF比抗酸染色法靈敏度高(70.83%)、特異性強(88.33%)，與孫蕊等[10]研究結(jié)果相符。究其原因，固體培養(yǎng)法耗時較長，無法滿足結(jié)核病快速診斷的要求，抗酸染色方法簡便快捷，但陽性率較低，結(jié)核病痰標本結(jié)核菌數(shù)目需>5000條/ml才能得到陽性結(jié)果，靈敏度較低，特異性較差，Xpert MTB/RIF檢測結(jié)核桿菌敏感、方法簡單、操作便捷快速、安全，準確度高，對基層單位結(jié)核患者的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及治療具有重要的意義，因而此技術(shù)在實驗室結(jié)核病診斷中具有可行性。

綜上所述，采用Xpert MTB/RIF檢測肺結(jié)核病及耐藥結(jié)核菌，檢測的靈敏度、特異性較高，在各級結(jié)核病防治機構(gòu)均有廣泛的應用前景。