小兒巨細胞病毒感染的臨床診治進展探討

天津市兒童醫院（300132）周耀 魏博濤 沈陽

小兒巨細胞病毒感染指的是因巨細胞病毒侵襲而引發的感染性疾病，該疾病于發展中國家十分常見，有80%左右的兒童在三歲前患有巨細胞病毒感染，對兒童群體的生長發育及健康安全造成極大不良影響，受到社會廣泛關注[1]。早于上個世紀中期，發達國家就開始關注小兒巨細胞病毒感染這種疾病，并開始了相關研究，我國于上個世紀晚期方開始進行相關研究，總體起步較晚，但近些年，隨著各種先進檢測方法的成熟與廣泛應用，目前我國對小兒巨細胞病毒的研究取得了理想進展，能夠對其進行有效的診斷與治療。

1 小兒巨細胞病毒感染的臨床診斷

1.1 巨細胞包涵體或病毒分離檢測 以往臨床對小兒巨細胞病毒感染進行診斷多采集尿液、腹水、乳汁、唾液、血液、胎盤或臍血等標本，然后進行培養分離，若發現巨細胞病毒，則可確診，但這種檢測方法無論是敏感性還是準確率均較差，且用時極長，往往超過一個月，會延誤患者的病情治療，臨床已不再使用。目前臨床多采用以下兩種方法：一是微量培養法，將受檢標本在載玻片上的成纖維細胞進行接種，于12小時后將病毒抗原與抗早期P72單克隆抗體進行結合，通過熒光免疫法進行結果顯示[2]。二是病毒負荷定量法，其將定量白細胞于載玻片上的培養細胞進行接種，統計存在病毒包涵體細胞的數量，陽性細胞所占比例越少，則表明病毒的負荷越輕，反之則越重。

1.2 抗原血癥檢測 該檢測方法將單克隆抗體結合特異性抗原，利用免疫組化方式對受檢標本中的病毒抗原進行檢測，其檢測的主要內容為PP65抗原、早期抗原與即刻早期抗原，其中PP65屬于磷酸蛋白，其活動性感染的表達主要在血管內皮細胞、單核細胞與中性粒細胞中，若檢查結果中其陽性細胞數量達到一定水平，則可確定為活動性感染，此外，數量越多則表明病毒的負荷越大，能夠據此開展半定量分析，這種檢測方法的可靠性較強[3]。

1.3 血清特異性抗體檢測 通過酶聯免疫吸附試驗能夠將血清內的抗巨細胞病毒-IgM與抗巨細胞病毒IgG檢測出來，其具體判定方法為以下幾種：一是若抗巨細胞病毒IgG結果為陽性，則證實存在巨細胞病毒感染，若受檢者為年齡低于半年的嬰兒，則要將外胎傳抗體排除；若結果由陰性轉變成陽性，則證實其為原發感染；若其雙份血清抗體的滴度增高超過（含）4倍，則證實其為活動性感染；若受檢者存在嚴重免疫功能缺陷，則存在假陰性的可能[3]。二是若抗巨細胞病毒-IgM的結果為陽性，則證實受檢者為巨細胞病毒活動性感染，如果其抗巨細胞病毒IgG的結果同時為陰性，則說明受檢者屬于原發性感染；如果患兒產生IgM的能力較差，則存在假陰性的可能；若患兒體內存在類風濕因子或其IgG的水平過高，則會干擾到檢測結果，存在假陽性的可能。

1.4 巨細胞病毒信使核糖核酸檢測 目前臨床對巨細胞病毒信使核糖核酸檢測的方法較多，如聚合酶鏈反應、原位雜交等，以原位雜交為例，其探針選擇堿基排序已知的巨細胞病毒的某個核糖核酸片斷或特異性脫氧核糖核酸，標記后依照堿基配對原則將其和受檢樣本中的巨細胞病毒核酸（待測）開展特異性結合，然后于原有位置對核酸開展細胞中的定量與定位。

2 小兒巨細胞病毒感染的臨床治療

2.1 抗巨細胞病毒治療 目前臨床的抗巨細胞病毒藥物較少，而能夠對患兒進行治療的藥物則更少，主要為以下兩種。

2.1.1 更昔洛韋 更昔洛韋屬于核苷類抗病毒藥物，與阿糖胞苷相比，其抗病毒效果更強，最高可達到100倍，是抗巨細胞病毒治療的首選藥物，在磷酸化后，其能夠對巨細胞病毒-脫氧核糖核酸多聚酶起到抑制作用，能夠插入病毒脫氧核糖核酸內，可對病毒的轉錄、復制及播散起到阻斷效果。更昔洛韋不適合口服給藥，吸收效果不理想，因此臨床多以靜脈滴注方式給藥，其半衰期較長，可達到3個小時，且可通過尿液排出，安全性高。

2.1.2 膦甲酸鈉 膦甲酸鈉屬于巨細胞病毒脫氧核糖核酸聚合酶抑制劑，能夠對病毒脫氧核糖核酸多聚酶接受位點進行阻斷，進而對病毒復制起到抑制效果，目前該藥物于國外的應用更加廣泛，主要用于更昔洛韋治療無效或耐受更昔洛韋的患者，但該藥物的不良反應發生率較高，患者很容易出現電解質紊亂、腎毒性或血細胞水平降低等情況，因此我國未于兒科中使用該藥物[4]。

2.1.3 用藥方法 以更昔洛韋為例介紹具體用藥方法，該藥物的給藥方式為靜脈滴注給藥，初始給予患兒誘導治療，每12小時給藥一次，給藥劑量為每千克5～7.5毫克，確保滴注時間超過1小時，連續給藥兩周。然后采用維持治療，有兩種給藥方式：一是靜脈滴注給藥，每天給藥一次，每次給藥劑量為每千克10毫克，確保滴注時間超過1小時，每周給藥三天，治療兩到三個月。二是靜脈滴注給藥，每天給藥一次，每次給藥劑量為每千克5毫克，確保滴注時間超過1小時，每周給藥七天，治療兩到三個月。

2.1.4 注意事項 短期高劑量誘導治療聯合長期低劑量維持治療能夠提高治療效果，此外在治療期間需要注意以下幾方面：一是在進行治療前，需要進行肝腎功能及血常規檢查，以此區別不良反應是藥物副作用還是感染造成的；二是在誘導治療過程中，每三天進行一次血常規檢查，每周進行一次肝腎功能檢查，并在治療結束時對其血巨細胞病毒-IgM、IgG與尿、血巨細胞病毒脫氧核糖核酸進行檢查，以此評價治療效果；三是在維持治療過程中，每周進行一次血常規檢查，每半個月到一個月進行一次肝腎功能檢查，治療結束時的檢查與誘導治療相同，同樣是對治療效果進行評價；四是要定期檢查患者的外周血小板與中性粒細胞水平，若前者低于每立方毫米25000或后者低于每立方毫米500，則要及時停止用藥并進行觀察與處理。

2.2 免疫治療

2.2.1 單克隆抗體 巨細胞病毒的復制于細胞中完成，這導致了單克隆抗體進入到細胞中并結合病毒的難度很大，因此該治療方案目前仍在實驗環節。目前臨床對單克隆抗體的研究集中于生物導彈療法，該方法能夠將特異性抗原和抗巨細胞病毒藥物結合，能夠保證藥物僅作用于遞呈巨細胞病毒抗原細胞與巨細胞病毒感染細胞，同時不會損害正常細胞，這種治療方法能夠提高抗巨細胞病毒藥物的治療效果與安全性。

2.2.2 轉移因子 無論是非特異性還是特異性轉移因子，均能夠使患兒的機體細胞免疫能力大幅度提高，可使其T淋巴細胞與NK細胞的滅殺病毒能力增強。有研究結果[5]表示，特異性轉移因子能夠使巨細胞病毒的嬰幼兒傳播及宮內感染幾率降低。還有研究[6]顯示，轉移因子（非特異性與特異性）能夠使NK細胞活性增強，同時能夠使一些巨細胞病毒感染孕婦的血清巨細胞病毒IgA或IgM轉陰。上述結果均證實了轉移因子治療巨細胞病毒感染的有效性。

2.2.3 巨細胞病毒信使核糖核酸反義寡核苷酸片斷 結合巨細胞病毒信使核糖核酸的核苷酸序列，以人工的方式完成反義寡核苷酸片斷合成，并將其結合巨細胞病毒信使核糖核酸，能夠對巨細胞病毒的復制起到阻斷效果。相關研究[7]證實了上述觀點，表明了巨細胞病毒信使核糖核酸反義寡核苷酸片斷治療巨細胞病毒感染具有很大前景，值得深入研究。

2.3 中醫藥治療 中醫藥在病毒治療方面有著悠久的歷史與豐富經驗，且在我國更容易被接受，尤其是在臨床尚未研發出抗巨細胞病毒特效藥物的今天，中醫藥治療的安全性及有效性得到了認可，具有推廣價值。相關學者[8]認為巨細胞感染屬于瘀、毒范疇，二者夾雜，其以現代藥理研究結果為基礎，結合中醫理論，認為該疾病的治療應以化瘀解毒、利濕清熱為原則，其認為該疾病的治療分成兩個階段，第一階段使用利膽退黃方，基礎藥方為：茵陳、金錢草、生麥芽、澤蘭與通草等；第二階段則使用益肝降酶方，基礎藥方為：紫草、生薏米、土茯苓、青黛、紫黃地丁、貫眾與敗醬草等，兩個階段共治療2個月到半年，效果理想，且用藥治療期間沒有出現不良反應，安全性高。

3 小兒巨細胞病毒感染的預防

對小兒巨細胞病毒感染的預防工作應于妊娠期開始開展，但當前缺少相關藥物與疫苗，且已研發的疫苗在有效性與安全性上存在不足，同時于妊娠期服用抗病毒藥物會產生毒性，影響胎兒的生長發育，甚至會造成畸形。基于上述情況，目前臨床可應用的預防措施較少，主要為以下三個方面：一是加強個人衛生與環境衛生，排泄物及相關物品要及時隔離并消毒。二是在兒童及孕婦進行輸血時，為了防止所輸血液感染，應對供血者進行巨細胞病毒檢查。三是若診斷為先天性巨細胞病毒感染，孕齡低則應該及時終止妊娠，孕齡較大而無法終止者，則需要對其進行嚴密監護，為防止發生接觸性感染，分娩方式要采用剖宮產。

總而言之，目前臨床對小兒巨細胞病毒感染的診斷多依賴于實驗室檢查，而其抗體陽性的檢查結果僅能夠證實受檢者曾感染過巨細胞病毒，要想進一步明確其存在病毒脫氧核糖核酸活動性感染，就應該通過直接分離進行病毒培養或檢測信使核糖核酸、巨細胞病毒抗原。而目前臨床對小兒巨細胞病毒感染尚沒有特效藥物，也沒有安全且高效的疫苗，無論是中藥還是西藥均有治療小兒巨細胞病毒感染的方法，但研究樣本較少且缺少相關報道，需相關學者進行深入研究。