微生物培養及快速血清學檢驗對小兒肺炎支原體感染的診斷價值

王妍妍

新鄉醫學院第三附屬醫院(河南 新鄉 453003)

小兒肺炎是兒科常見的呼吸系統疾病，尤其是支原體肺炎，春冬兩季為小兒肺炎支原體(MP)感染的高發季節，該病可導致患兒毛細血管炎樣改變或間質性肺炎，臨床主要表現為咳嗽、發熱、胸骨下疼痛等，若不及時治療或治療措施不當可導致神經系統損害等嚴重并發癥，影響患兒生長發育[1-3]。但由于該病早期臨床表現缺乏特異性，臨床診斷存在一定難度，而早期確診有助于患兒得到及時、有效的治療，減輕患兒痛苦。臨床對MP的檢驗方法多種多樣，但不同檢測方法對MP的檢出率不同，且其檢測的靈敏度和特異度也不同[4-6]。本研究主要對比微生物培養和快速血清學檢驗2種檢測方法對小兒MP感染的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2018年1月～2018年12月在我院確診的144例MP感染患兒臨床資料，均符合《兒科常見病診斷與治療》中MP感染診斷標準[7]。其中男68例，女76例；年齡3個月～11歲，平均(3.6±0.7)歲；病程5 d～2個月，平均(11.7±3.3)d。納入標準：符合上述診斷標準，且經微生物培養或聚合酶鏈式反應(PCR)等實驗室檢查確診的MP感染患兒；年齡<14歲；伴有不同程度的發熱、咳嗽等臨床癥狀者；病程至少5 d者；臨床資料齊全不影響結果判定者。排除標準：合并有肺部器質性病變者；先天性心臟病者；合并有內外科其他嚴重疾病者；合并有嚴重精神疾病或智力障礙者等。本研究經我院醫學倫理委員會審核通過。

1.2方法 所有患兒均接受微生物培養和快速血清學檢驗2種檢測方法，所有操作均在無菌條件下嚴格按照說明書操作步驟進行。

微生物培養檢測方法：使用無菌棉拭子探入患兒口腔或咽喉部并反復捻轉后取出，盡量擠出棉拭子中液體于溶化后再次復溫的MP培養基中，棉拭子棄之，將培養基置于(37±0.5)℃培養箱中培養24 h，觀察培養基顏色變化。快速血清學檢驗方法：采集患兒清晨空腹靜脈血2ml，靜置2h，離心10min，分離血清，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中MP特異度免疫球蛋白M抗體(MP-IgM)。

1.3判定標準 微生物培養檢測：若培養基顏色由紅色漸變為黃色，則判定為陽性；若培養基顏色無變化，則視為陰性。快速血清學檢驗：若MP-IgM值>1∶160則判定為陽性，反之為陰性；若檢測結果為陰性，則7 d后再次抽血復查。

1.4觀察指標 (1)比較2種檢測方法對MP的陽性檢出率。(2)比較2種檢測方法對不同年齡段(≤1歲，>1且≤4歲，>4且≤8歲，>8且≤11歲)患兒的MP陽性檢出率。

1.5統計學方法 所有數據均采用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，計數資料以百分比(%)表示，行χ2檢驗，以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.12種檢測方法對MP陽性檢出率比較 144例患兒中微生物培養檢出MP陽性患兒121例，陽性檢出率為84.03%；快速血清學檢驗檢出MP陽性患兒105例，陽性檢出率為72.92%；微生物培養對MP的陽性檢出率高于快速血清學檢驗，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.22種檢測方法對不同年齡段患兒MP陽性檢出率比較 微生物培養和快速血清學檢驗2種檢測方法對>4且≤8歲患兒的MP陽性檢出率均最高，分別為93.55%和90.32%；而對≤1歲幼兒的MP陽性檢出率均最低，分別為70.59%和61.76%，對同種檢測方法來說，不同年齡之間的MP陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)，且2種檢測方法比較，差異亦無統計學意義(P>0.05)。見表1、2。

表1 微生物培養對不同年齡段患兒MP陽性檢出率比較

表2 快速血清學檢驗對不同年齡段患兒MP陽性檢出率比較

3 討論

有研究顯示，小兒MP感染與兒童變異性哮喘的發生有關，嚴重者甚至可危及患兒生命[8-9]。因此，提高小兒MP感染的診斷準確率，減少誤診、漏診率，對促進患兒得到及時、有效的治療具有重要意義。臨床對MP的檢驗方法多種多樣，如微生物培養、快速血清學檢驗、冷凝集試驗、超高倍顯微鏡法及PCR等，冷凝集試驗對MP的敏感性較低[10]；超高倍顯微鏡法對設備的依賴性較高，且易受到人為因素的干擾，漏診率相對較高[11]；PCR檢測對實驗條件和操作人員均有嚴格的要求且費用很高，臨床普及存在一定困難，不可作為常規檢驗手段[12]。

一般在患兒受MP感染后5 d體內會形成IgM、IgG抗體，而IgM抗體形成時間較早，一般在MP感染后3～4周達到高峰，具有較長的時間分布寬度，這也是快速血清學檢驗的基本原理，但MP感染后1年內，患兒體內仍可檢出較高水平的IgM抗體[13]，因此，檢測到MP-IgM抗體并不代表患兒處于急性感染期。微生物培養檢測方法的原理是通過加快MP專用培養基中微生物的生長繁殖，在此生長繁殖過程中MP可分解葡萄糖酸，產生氫離子，導致培養基內pH值降低，可借助培養基顏色的變化來觀察MP的生長情況[14-15]。有研究[16]指出，與快速血清學檢驗相比，微生物培養檢測方法的敏感度及特異度均較高，可以提高MP檢出率，進而提高診斷的準確率。本研究結果中，微生物培養檢測方法對MP的陽性檢出率為84.03%，明顯高于快速血清學檢驗的MP陽性檢出率72.92%，也再次證實了微生物培養檢測方法對MP的檢出率高于快速血清學檢驗，可能與微生物培養檢測采用的是人工合成的液體培養基，其營養成份適合MP生長繁殖，故而有較強的特異度有關。但值得注意的是，快速血清學檢驗診斷MP感染所需時間相對較短，一般僅需4 h即可完成，有助于患兒得到及時有效的治療。此外，本研究對比了2種檢測方法對不同年齡段患兒MP的檢出率，結果發現，2種檢測方法對>4且≤8歲患兒的MP陽性檢出率均最高，而對≤1歲幼兒的MP陽性檢出率均最低，因為年齡較小的患兒機體各項器官功能發育尚不健全，特異度的抗體效價較低，故而降低了抗體的檢出率，MP陽性檢出率也隨之受影響。

綜上，微生物培養和快速血清學檢驗均可用于小兒MP感染的診斷，但微生物培養具有更高的檢測價值。