犬表皮腫瘤病理診斷及分析?

趙夢洋 李 杰 趙德明 周向梅 楊利峰

(中國農業大學動物醫學院國家動物海綿狀腦病實驗室,北京 100193)

皮膚是犬被皮系統的組成之一,覆蓋于體表。不同部位的皮膚組織結構略有不同,但基本結構相似,均由表皮、真皮以及皮下組織三層構成。其中,表皮(epidermis,E)位于皮膚的淺層,由復層扁平上皮組成。表皮由內向外可以分為基底層、棘細胞層、顆粒層、透明層以及角質層共五層。基底層(stratum basale,SB)為最靠近真皮的一層,基底層排列較整齊,細胞呈低柱狀或立方形,細胞核圓形或卵圓形。棘細胞層(stratum spinosum,SS)位于基底層的淺層,是由基底細胞分化而來的。細胞較大,呈多邊形,細胞核圓形或橢圓形,核仁明顯。顆粒層(stratum granulosum,SG)細胞呈梭形或扁平狀,細胞核深染,呈橢圓形或扁圓形,細胞質內含有許多透明角質顆粒,HE染色呈強嗜堿性。透明層(stratum lucidum,SL)是無毛皮膚特有的一層,位于顆粒層外側,由幾層細胞界限不清的扁平細胞構成,細胞核及細胞器已退化分解,細胞質在HE染色時呈均質紅染或均質透明狀。角質層(stratum corneum,SC)位于皮膚的最表層,由已經死亡的多層扁平角化的細胞組成,細胞核、細胞器均已消失,細胞輪廓不清。HE染色呈均質紅染[1]。

表皮腫瘤是犬皮膚腫瘤(CPV)中上皮來源腫瘤中的一種,發生于犬的表皮腫瘤主要包括乳頭狀瘤(papilloma)、鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma)以及基底樣鱗狀細胞癌(basosquamous carcinoma)。其中,乳頭狀瘤根據其大體形態的不同又分為外生性乳頭狀瘤及內翻性乳頭狀瘤。鱗狀細胞癌根據腫瘤細胞分化程度不同分為高分化(1級)、中分化(2、3級)和低分化(4級)[2]。表皮腫瘤是獸醫中較為常見的腫瘤之一,是送往診斷實驗室的最常見的組織病L學標本之一。因為表皮腫瘤的發生易被主人以及獸醫發現,而且通常腫瘤組織較易獲得,所以經常在取樣后進行組織病L學評估,這就對此類疾病的準確診斷提出了更高的要求。本研究結合典型的表皮腫瘤病例,對犬表皮腫瘤的流行特點、組織病L學特征以及診斷要點進行闡述。

1 材料與方法

1.1 病例來源

中國農業大學國家動物海綿狀腦病實驗室診斷的犬表皮腫瘤病例,共計39例。

1.2 組織病理學檢查

腫物切除后先經4%甲醛溶液固定5 d,隨后進行修塊、石蠟包埋、2μm切片、HE染色,中性樹膠封片后進行光學顯微鏡觀察,利用DP2-BSW系統進行數字圖像采集。

1.3 分類

犬的表皮腫瘤分類參照《Tumors in Domestic Animals》[2]。 年齡按照 0～3歲,4～6歲,7～9歲,≥10歲分為4組。發病部位分為頭面部、肩頸部、背部、腹部、四肢、會陰以及體表多處。

2 結果

2.1 犬表皮腫瘤分析

根據對39例表皮腫瘤病例的統計分析,從腫瘤類型來看(圖1),鱗狀細胞癌以及乳頭狀瘤較為常發。最高發的是鱗狀細胞癌,共18例,占比46%,乳頭狀瘤共15例,占比39%。在鱗狀細胞癌中,中分化程度的鱗狀細胞癌較常發。從年齡來看(圖2),不同種類的表皮腫瘤發病率與犬年齡之間的關系不同。乳頭狀瘤常發于0～3歲的幼犬及青年犬,占全部乳頭狀瘤患犬的的72%。而鱗狀細胞癌和基底樣鱗狀細胞癌則更常發于7歲以上的老齡犬,分別占相應種類腫瘤患犬的72%、83%。從性別來看(表1),雌性病例有12例,其中1例已絕育;雄性病例20例,其中5例已絕育;未知性別7例。雄性發病率略高于雌性。從發病部位來看(表2),表皮腫瘤多發生于頭面部,其次是肩頸部、背部、腹部、四肢以及會陰處。

圖1 犬表皮各類型的腫瘤發生率Fig.1 Incidence of various types of tumors in canine epidermis

2.2 犬表皮腫瘤病例

2.2.1 乳頭狀瘤

圖2 犬表皮各類型腫瘤的年齡分布Fig.2 Data of age among each type of tumors in canine

表1 犬表皮各類型腫瘤的性別分布Table 1 Data of sex among each type of tumors in canine epidermis

表2 犬表皮各類型腫瘤的發病部位分布Table 2 Data of sites among each type of tumors in canine epidermis

2.2.1.1 外生性乳頭狀瘤(exophytic papilloma):鏡下可見,典型的外生性乳頭狀瘤呈多重手指樣結構(圖3A、B)。組成乳頭狀或者手指樣結構的上皮增生、角質化。增生的表皮從外向內依次為角質細胞層、顆粒層、棘細胞層和基底細胞層。角質層可見紅染的均質的角蛋白。細胞的增生主要發生在顆粒層和棘細胞層,細胞體積大,細胞核淡染,核仁明顯,細胞質豐富,細胞界限不明顯。顆粒層中顆粒細胞聚集巨大的圓形角質透明蛋白顆粒。在棘細胞層和顆粒層可見挖空細胞分布,挖空細胞的細胞質透明,細胞核濃縮。基底層細胞呈柱狀,細胞核圓形或橢圓形,位于中央,染色深,細胞質較少,粉紅染(圖3C、D)。2.2.1.2 內生性乳頭狀瘤(inverted papilloma):鏡下可見,皮膚表皮層增厚和大量均質紅染呈片層狀排列的角化物質,鱗狀上皮細胞呈乳頭狀或指狀向內部凸出;增生的腫瘤細胞呈小梁狀交錯排列,分隔結締組織呈大小不等的小島狀。高倍鏡下增生的表皮結構與外生性乳頭狀瘤相似,也可見大的角質透明顆粒、少量細胞質透明、核固縮的挖空細胞(圖4A、B)。

圖3 外生性乳頭狀瘤(HE染色)Fig.3 Exophytic papilloma(HE staining)

圖4 內生性乳頭狀瘤(HE染色)Fig.4 Inverted papilloma(HE staining)

2.2.2 鱗狀細胞癌(圖5)

2.2.2.1 高分化鱗狀細胞癌(well-differentiated squamous cell carcinoma):腫瘤組織向皮下侵襲性生長,有數量較多的橢圓形、分化程度不同的鱗狀細胞團或細胞索,即“癌巢”。增生的鱗狀上皮表現出從基底細胞到角質細胞的良好分化,中央可見透明的、強嗜酸性的角化珠(癌珠)。腫瘤細胞產生數量不等的角化蛋白,即細胞質中嗜酸性的纖維物質。腫瘤細胞體積較大,橢圓形,泡狀核,有單個位于中心的明顯核仁,細胞質豐富,嗜酸性,細胞邊界清晰,細胞核多形性較小,未見有絲分裂象。

2.2.2.2 中分化鱗狀細胞癌(moderately differentiated squamous cell carcinoma):腫瘤細胞所圍成的島狀結構比高分化鱗狀細胞癌要小,腫瘤細胞侵襲性強于高分化鱗狀細胞癌。腫瘤細胞中嗜酸性細胞質相對較少,大部分為分化程度較低的鱗狀細胞團,中央還未形成透明的、強嗜酸性的癌珠,只有極個別細胞團形成小的嗜酸性角化珠或嗜酸性角化纖維。細胞核表現出較大的多形性和深染性,有絲分裂象較多。

2.2.2.3 低分化鱗狀細胞癌(poorly differentiated squamous cell carcinoma):增生的鱗狀上皮呈片狀生長,未形成典型的“癌巢”結構,可見基底細胞向角質細胞的分化。腫瘤細胞具有很強的侵襲性,通常表現為單個細胞或結締組織基質中的小群細胞,細胞質呈雙染性,細胞核極為多形、深染,可見多量有絲分裂象。

圖5 鱗狀細胞癌(HE染色)注:A、B為高分化鱗狀細胞癌;C、D為中分化鱗狀細胞癌;E、F為低分化鱗狀細胞癌Fig.5 Squamous cell carcinoma(HE staining)Note:AB is well-differentiated squamous cell carcinoma;CD is moderately differentiated squamous cell carcinoma;EF is poorly differentiated squamous cell carcinoma

2.2.3 基底樣鱗狀細胞癌:鏡下可見,腫物組織表皮完整,腫物主要位于真皮層內,與表皮層相連,被結締組織小梁分割成形狀不規則的多個小島樣結構。小島內中央為染色較淺的鱗狀細胞團塊。小島中央區域細胞體積較大,橢圓形,泡狀核,有單個位于中心的明顯核仁,細胞質豐富,嗜酸性,細胞邊界清晰;周圍分布數量眾多的基底樣細胞,腫瘤細胞細胞核呈圓形,嗜堿性強,細胞核質比大,細胞質較少,細胞界限不明顯,可見有絲分裂象(圖6)。

圖6 基底樣鱗狀細胞癌(HE染色)Fig.6 Basosquamous carcinoma(HE staining)

3 討論

根據本次分析結果可得,犬最常發的表皮腫瘤為鱗狀細胞癌,占全部表皮腫瘤病例的46%,多為中分化程度的鱗狀細胞癌。其次為占比39%的乳頭狀瘤,以外生性乳頭狀瘤為主。基底樣鱗狀細胞癌較少發生。不同種類的表皮腫瘤發病率與年齡之間的關系不同,乳頭狀瘤易發于幼齡犬,鱗狀細胞癌與基底樣鱗狀細胞癌易發于老齡犬。表皮腫瘤多發于犬的頭面部。這些與之前的文獻報道[2]相似。雄性發病率略高于雌性,而之前的文獻報道顯示表皮腫瘤并無明顯的性別傾向,這應該與樣本量不足有關。

乳頭狀瘤是一種良性的表皮(鱗狀上皮)增生性腫瘤,由乳頭狀瘤病毒(PV)感染引起[3-4]。乳頭狀瘤在犬易發,主要影響幼年動物,無性別偏好,病變的發生可能是單中心或多中心的,頭部最常見。在犬中,皮膚乳頭狀瘤與CPV-2、CPV-6和CPV-7有關[5]。目前發現了三種不同的與乳頭瘤病毒有關的組織病L學變異亞型,分別為乳頭狀亞型、漏斗亞型以及色素丘疹亞型。內翻性乳頭狀瘤是乳頭狀瘤中的一種特殊情況,無年齡品種性別傾向[6]。應注意病毒性乳頭狀瘤與鱗狀乳頭狀瘤的鑒別診斷,后者只是一種“類腫瘤疾病”,是非腫瘤性乳頭狀腫塊。在進行組織病L學診斷時,后者并無巨大的角質透明顆粒、挖空細胞、包涵小體等細胞病變的發生[2,7]。

鱗狀細胞癌是包括禽類在內的所有家畜中最常見的惡性皮膚腫瘤之一。犬的鱗狀細胞癌可能發生在犬的任何一個年齡段,發病率隨著年齡的增長而增加,發病高峰期在6～13歲。無性別傾向。常發于犬的頭部、腹部、前后肢以及會陰部。主要表現為表皮增生、角化過度或角化不全、棘皮癥等。在高分化的腫瘤中,會形成透明的強嗜酸性癌珠;在低分化腫瘤中,只有少數細胞有細胞質內嗜酸性角蛋白。單個腫瘤細胞有大的卵球形核,通常是泡狀核,有一個中央的突出的核仁,豐富的細胞質從淡嗜酸性到明亮嗜酸性不等,細胞邊界清晰。在低分化的鱗狀細胞癌中能觀察到有絲分裂象的出現。腫瘤鱗狀上皮島中常有中性粒細胞浸潤,在腫瘤上皮周圍的結締組織基質中存在漿細胞和淋巴細胞[2]。

基底樣鱗狀細胞癌是形態組織學特性介于基底細胞癌和鱗狀細胞癌之間的惡性程度低的一類腫瘤,主要由基底細胞和鱗狀分化灶組成。基底樣鱗狀細胞癌很罕見,一般只在犬中有發生。發病高峰在6～12歲,無性別傾向,主要發生在犬的頭面部、頸部以及四肢。腫瘤的發生是從皮內到皮下,常伴有表皮潰瘍和脫毛。腫物主要位于真皮層內,與表皮層相連,被結締組織小梁分割成形狀不規則的多個小島樣結構。小島外周的基底樣細胞常有黑色素沉積。該腫瘤不發生轉移,所以手術切除是最有效的治療方案。

需要注意的是,在先前的分類中,犬的基底細胞癌也分屬于表皮腫瘤,但是最新的分類已將其歸類為毛母細胞瘤[8],所以本文不再贅述。

綜上所述,本文通過對收集到的39例犬表皮腫瘤病例的腫瘤類型、發病年齡、性別、發病部位等信息進行統計分析,總結了犬表皮腫瘤的流行特點以及組織病L學特征,為今后該部位腫瘤的診斷和鑒別診斷提供參考。