兒童肺炎支原體感染動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清補(bǔ)體和免疫球蛋白及炎性細(xì)胞因子的臨床意義

鄭卉 張笑嘉（通訊作者）

（青島市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 山東 青島 266033）

肺炎支原體（MP）屬于人類支原體肺炎的重要病原體，同時(shí)也是引發(fā)兒童社區(qū)獲得性肺炎的病原體之一，任何年齡段兒童均可感染肺炎支原體，且最終發(fā)展為支原體肺炎（MPP）的概率超過30%，也可誘發(fā)其他各種肺外并發(fā)癥，對(duì)兒童正常生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生了嚴(yán)重影響[1]。臨床至今尚未完全明確肺炎支原體感染后致病的具體機(jī)制，通常認(rèn)為和免疫功能紊亂、炎癥損傷與上皮吸附作用相關(guān)。最新臨床研究顯示，支原體肺炎發(fā)生、發(fā)展過程中，炎性反應(yīng)與免疫損傷發(fā)揮了關(guān)鍵作用[2]。這也就提示MP 感染患兒病情評(píng)估中，炎癥反應(yīng)水平與免疫功能具有重要意義。鑒于此，本研究以我院102例MPP患兒與98例健康體檢兒童為研究對(duì)象，探究?jī)和疢P 感染動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清補(bǔ)體、免疫球蛋白及炎性細(xì)胞因子的臨床意義，以期能為臨床提供借鑒。

1.資料與方法

1.1 資料

將2015 年8 月—2017 年9 月來我院診治的102 例MPP 患兒歸為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①患兒家長(zhǎng)知情同意；②符合《實(shí)用兒科學(xué)》[3]中MPP 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①中途退出；②免疫功能低下；③合并肺結(jié)核、支氣管哮喘等疾病；④合并其他病原體感染。患兒年齡3 ～37 個(gè)月，平均（19.05±2.15）個(gè)月，男性、女性患兒分別有68 例、34 例。選取同時(shí)期98 名健康體檢兒童為對(duì)照組，年齡2 ～35 個(gè)月，平均（18.98±2.13）個(gè)月，男性、女性兒童分別有62 名、36 名，所有兒童既往均無免疫性疾病史與慢性疾病史，近期無感染、感冒、咳嗽與發(fā)熱史。對(duì)比兩組一般資料（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

標(biāo)本采集方法：MPP 急性期指發(fā)病20h ～8d 內(nèi)，平均病程為（4.85±3.42）d，恢復(fù)期指急性期患兒經(jīng)2 ～8 周治療后，臨床癥狀、胸部X 線表現(xiàn)明顯減輕或者消失，平均病程為（14.52±5.12）d。觀察組急性期患兒于入院當(dāng)天或次日早晨、恢復(fù)期患兒于清晨7:00-9:00、對(duì)照組兒童則于入院當(dāng)天采集3ml 外周靜脈血，按照4000r/min 的速度行5min 離心處理，離心半徑為12.5cm，獲取血清標(biāo)本，保存在-80℃的冰箱中待檢。

測(cè)定方式：采用ELISA 法對(duì)IL-13、IL-10 與IL-8 進(jìn)行測(cè)定，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。采用INA 法對(duì)免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 與血清補(bǔ)體C3、C4 進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)儀器為BS-220 全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比觀察組急性期、恢復(fù)期MPP 患兒、對(duì)照組患兒IL-3、IL-8、IL-10、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體C3、C4 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2.結(jié)果

2.1 兩組炎性細(xì)胞因子水平比較

觀察組急性期、恢復(fù)期IL-13、IL-8 均高于對(duì)照組，IL-10低于對(duì)照組（P＜0.05）；觀察組急性期IL-13、IL-8 水平高于恢復(fù)期，IL-10 低于恢復(fù)期（P＜0.05），見表1。

表1 兩組炎性細(xì)胞因子水平比較（±s，pg/ml）

表1 兩組炎性細(xì)胞因子水平比較（±s，pg/ml）

注：#表示與恢復(fù)期比較，P ＜0.05；*表示與對(duì)照組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) IL-13 IL-8 IL-10對(duì)照組 98 80.12±5.16 25.63±2.15 25.12±5.63觀察組 102急性期 - 215.63±6.28#* 116.63±5.68#* 14.12±3.12#*恢復(fù)期 - 132.56±5.12* 56.58±3.28* 19.58±2.16*

2.2 兩組免疫球蛋白水平比較

觀察組急性期IgA 水平低于對(duì)照組、恢復(fù)期，IgM 水平高于對(duì)照組、恢復(fù)期，IgG 水平低于恢復(fù)期（P＜0.05），但與對(duì)照組對(duì)比無明顯差異（P＞0.05）；觀察組恢復(fù)期IgA 水平低于對(duì)照組，IgG 水平高于對(duì)照組（P＜0.05），IgM 水平與對(duì)照組比較無顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 兩組免疫蛋白水平比較（±s，g/L）

表2 兩組免疫蛋白水平比較（±s，g/L）

注：#表示與恢復(fù)期比較，P ＜0.05；*表示與對(duì)照組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) IgA IgG IgM對(duì)照組 98 1.48±0.25 7.32±1.05 1.03±0.45觀察組 102急性期 - 0.62±0.12#* 7.28±1.42# 1.66±0.52#*恢復(fù)期 - 0.95±0.15* 9.99±2.28* 0.98±0.39

2.3 兩組血清補(bǔ)體水平比較

觀察組急性期C3、C4水平均高于對(duì)照組、恢復(fù)期（P＜0.05）；觀察組恢復(fù)期C3、C4 水平與對(duì)照組比較，均無顯著差異（P＞0.05），見表3。

表3 兩組血清補(bǔ)體水平比較（±s，g/L）

表3 兩組血清補(bǔ)體水平比較（±s，g/L）

注：#表示與恢復(fù)期比較，P ＜0.05；*表示與對(duì)照組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) C3 C4對(duì)照組 98 1.15±0.23 0.35±0.11觀察組 102急性期 - 1.91±0.32#* 0.46±0.19#*恢復(fù)期 - 1.23±0.28 0.38±0.15

3.討論

小兒因各項(xiàng)組織器官功能、免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育成熟，MP 感染后臨床癥狀不典型，極易延誤病情診治，引發(fā)一系列肺外并發(fā)癥，對(duì)患兒生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生嚴(yán)重影響。臨床已有研究顯示，MP感染之后，機(jī)體會(huì)經(jīng)歷免疫逃逸、免疫調(diào)節(jié)與免疫抑制等過程，細(xì)胞因子與機(jī)體自身免疫之間不僅相互誘導(dǎo)，同時(shí)還相互制約，促進(jìn)疾病發(fā)生、發(fā)展[4]。體液免疫中最早出現(xiàn)的抗體為IgM，峰值出現(xiàn)在3 ～4 周，但消失得也較早，疾病恢復(fù)期基本上已經(jīng)恢復(fù)正常。本研究中觀察組患兒急性期IgM 水平較高，但恢復(fù)期已與對(duì)照組無明顯差異。相較于IgM，IgG 出現(xiàn)的時(shí)間相對(duì)較晚，其水平在發(fā)病后2 周才開始升高，峰值出現(xiàn)在5 周左右。本研究中觀察組急性期水平高于恢復(fù)期，且恢復(fù)期與對(duì)照組間無明顯差異。IgA 屬于黏膜局部免疫抗體，一旦缺乏IgA，便會(huì)降低呼吸道抗病毒能力，感染風(fēng)險(xiǎn)性提高。本研究觀察組急性期IgA水平明顯低于對(duì)照組，雖然在恢復(fù)期水平有所升高，但依舊低于正常水平，提示MPP患兒機(jī)體免疫功能低下或者有紊亂情況出現(xiàn)，且組織損傷與炎癥持續(xù)存在的一個(gè)重要原因?yàn)镮gA 合成不足。

小兒MP 感染后，主要通過激活補(bǔ)體系統(tǒng)、分泌免疫球蛋白等來完成免疫應(yīng)答。MP 持續(xù)感染會(huì)激活補(bǔ)體系統(tǒng)，使得中性粒細(xì)胞趨化因子大量生成，大量白細(xì)胞聚集于病變部位，并釋放水解酶，引發(fā)局部損害或增生，最終造成自身免疫損傷[5]。本研究中觀察組急性期C3、C4 水平均高于對(duì)照組、恢復(fù)期，提示MP 感染后激活了補(bǔ)體系統(tǒng)，但進(jìn)入恢復(fù)期后，因不斷形成抗原抗體，故C3、C4 水平趨于正常。IL-8 為趨化性炎性因子，在呼吸道疾病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用；IL-10 為抗炎因子，能有效抑制單核巨噬細(xì)胞活性，其水平降低提示存在持續(xù)炎癥損傷或機(jī)體免疫功能失調(diào)；IL-13 同樣為抗炎因子之一，在機(jī)體抗炎反應(yīng)過程中具有重要作用。本研究中，觀察組急性期IL-13、IL-8 水平高于恢復(fù)期、對(duì)照組，IL-10水平低于恢復(fù)期、對(duì)照組，提示兒童MP 感染后，機(jī)體抗炎/促炎系統(tǒng)處于紊亂狀態(tài)，導(dǎo)致組織損傷與炎癥持續(xù)損傷。

綜上所述，兒童MP 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)炎性細(xì)胞因子、免疫球蛋白與血清補(bǔ)體水平利于指導(dǎo)疾病分期。