成年病毒性肺炎患者T淋巴細胞亞群的水平變化及臨床意義

張間霞，莊健海，呂微風，鄧秋萍，葉桂樣

廣東省佛山市中醫院檢驗科，廣東佛山 528000

病毒性肺炎是指患者發生上呼吸道病毒感染后，隨病情發展感染向下蔓延，導致肺部發生的感染。引起病毒性肺炎的常見病毒有腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人流感病毒(Flu)等。病毒性肺炎可發生在任何季節，其中冬春季節發病率較高，患者通常表現為頭痛、發熱、肌肉疼痛等，部分患者可伴有呼吸道癥狀，嚴重者可發展為呼吸衰竭，甚至死亡[1-3]。研究顯示，免疫功能紊亂是病毒性肺炎患者病情加重的一個重要原因[4-5]。目前，關于小兒病毒性肺炎的研究較多，但關于成人病毒性肺炎的研究較少，且研究結果存在較大爭議[6-7]，故本研究對成年病毒性肺炎患者T淋巴細胞亞群的水平變化及臨床意義進行了相關探討，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2017年3月至2019年4月收治的62例病毒性肺炎患者為觀察組，另選取同期本院65例健康體檢者為對照組。納入標準：年齡均>18歲；觀察組符合病毒性肺炎的相關診斷標準；研究對象均具有良好的溝通能力，愿意配合完成本研究。排除標準：合并其他嚴重臟器病變；合并腫瘤；其他類型肺部炎性疾病，如肺結核、支氣管炎等；合并其他部位感染性疾??；妊娠或哺乳期女性。觀察組男36例，女26例；年齡21～56歲，平均(43.21±12.68)歲；病程2～5 d，平均(3.72±1.97)d。對照組男38例，女27歲；年齡22～55歲，平均(43.76±12.71)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 采集觀察組患者肺泡灌洗液，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測病毒感染類型；采集兩組靜脈血，采用流式細胞術(FCM)檢測T淋巴細胞亞群分布情況,同時采用ELISA檢測炎癥因子水平。具體步驟如下。

1.2.1病毒IgM抗體檢測 肺泡灌洗液采集：在局部麻醉下采用纖維支氣管鏡進入患者右肺中葉或左肺支氣管，從纖維支氣管鏡活檢孔注入37 ℃無菌生理鹽水，每次注入40 mL左右,總量不高于250 mL，將負壓設置為-13.3～13.9 kpa，吸出注入的生理鹽水，收集在無菌容器內，放入冰盒，及時送檢。ELISA檢測：采用ELISA檢測患者肺泡灌洗液中病毒IgM抗體。Flu、副流感病毒(PIV)、ADV、RSV及巨細胞病毒(CMV)檢測試劑盒均購自上海橋杜生物科技有限公司，操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.2.2炎癥因子水平檢測 采集兩組空腹靜脈血于常規真空采血管中，將血清分離后采用ELISA檢測白細胞介素-6(IL-6)、C反應蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平，試劑盒均購自北京晶美生物技術有限公司。

1.2.3T淋巴細胞亞群檢測 采用流式細胞術檢測兩組T淋巴細胞亞群，采集兩組靜脈血3 mL于抗凝真空采血管中，然后分別取出50 μL 加入含20 μL相應熒光標記抗體(CD3+、CD4+、CD8+)的流式細胞檢測專業試管中，混合均勻，在室溫下避光孵育15 min，然后加入溶血素450 μL，在室溫下避光孵育15 min。采用美國BD公司生產的FACS Calibur流式細胞儀進行檢測。

2 結 果

2.1觀察組病毒感染類型 觀察組62例患者中，單一病毒感染45例，占72.58%，混合感染17例，占27.42%；單一病毒感染中Flu的感染率最高，為22.58%，混合感染中Flu+PIV的感染率最高，為9.68%。見表1。

表1 觀察組病毒感染類型

2.2兩組T淋巴細胞亞群水平比較 觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明顯低于對照組，CD8+水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組T淋巴細胞亞群水平比較

2.3兩組炎癥因子水平比較 觀察組IL-6、CRP、TNF-α水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組炎癥因子水平比較

3 討 論

病毒性肺炎是一種呼吸道感染性疾病，患者發病與機體的免疫力具有密切關系。病毒性肺炎主要發生在嬰幼兒，但隨著空氣質量的惡化及病毒的變異，成人病毒性肺炎的發生率不斷增高[8-11]。T淋巴細胞亞群在機體內可識別外界抗原，產生細胞因子，在細胞免疫中發揮重要作用，對疾病診斷、病情評估具有重要意義[12-13]。CD3+是機體成熟T淋巴細胞的標志物，反映細胞免疫的功能，其水平降低表示患者T淋巴細胞活化功能被抑制；CD4+是機體輔助性T淋巴細胞，可以釋放多種細胞因子，從而促進細胞的免疫功能，其水平降低說明患者免疫功能受到抑制。CD8+是機體抑制性T淋巴細胞，其水平上升表示患者存在感染，正常免疫功能受到抑制[14-15]。研究顯示，CD4+與CD8+功能相互制約的同時相互協作，參與調節機體免疫狀態，從而使機體不僅能夠清除特異性抗原，又能避免受到損傷[2,16]。

本研究對成年病毒性肺炎患者的病毒感染類型、體內T淋巴細胞亞群分布情況，以及細胞炎癥因子水平進行了分析，結果顯示，成年病毒性肺炎患者以單一病毒感染為主，占病毒性肺炎的72.58%，該數值與其他文獻報道略有差異[7,13]，但都顯示病毒性肺炎以單一病毒感染為主，為臨床診斷提供了一定依據。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明顯低于對照組，CD8+水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，提示觀察組免疫功能受到了一定抑制，患者免疫功能紊亂，這可能是引起機體發生感染的原因，也可能是導致患者病情加重的原因。觀察組IL-6、CRP、TNF-α水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，提示機體在病毒感染后發生了炎性反應，炎癥因子水平檢測在一定程度上可以幫助臨床評估患者炎癥損傷程度。本研究為成年病毒性肺炎患者的診斷、治療提供了一定依據，但是受病例數、研究時間的限制，還有一些不足需要改進，在接下來的研究中將會繼續擴大樣本量，從T淋巴細胞亞群水平變化與患者病情嚴重程度，以及其可能的發生機制出發，為成年病毒性肺炎患者的診斷與治療提供更多的可靠依據。

綜上所述，成年病毒性肺炎患者以單一病毒感染為主，患者T淋巴細胞亞群功能紊亂，機體炎性反應水平升高。