宮頸HR-HPV感染與陰道微生態(tài)的關(guān)系研究*

羅燕艷,羅小婉,欒峰,符麗華,林鈺葉,齊青萍,劉燕婷

中山市博愛醫(yī)院婦科,廣東中山 528403

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅女性的健康。高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV) 感染是引起宮頸癌的原因之一?？刂艸R-HPV感染的危險(xiǎn)因素，就有可能阻斷其持續(xù)感染，從而控制宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展。隨著分子生物學(xué)研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)陰道微生態(tài)是HR-HPV侵入宮頸的第一道防線，其失衡可能是導(dǎo)致HR-HPV持續(xù)感染并引起宮頸病變的危險(xiǎn)因素之一。陰道微生態(tài)失衡會(huì)引起陰道上皮細(xì)胞的損傷和脫落，從而使HR-HPV進(jìn)入宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)的基底上皮細(xì)胞，造成持續(xù)感染，導(dǎo)致宮頸病變的發(fā)生[1]。因此，對(duì)宮頸HR-HPV感染者進(jìn)行陰道微生態(tài)研究具有重要的臨床意義。本研究對(duì)宮頸HR-HPV感染者的陰道微生態(tài)進(jìn)行分析，并進(jìn)一步探討宮頸HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年7月至2020年1月在本院婦科門診就診的128例HR-HPV感染者作為感染組，另選取同期就診的非HR-HPV感染者206例作為對(duì)照組。感染組年齡20～66歲，平均(42.2±9.2)歲；對(duì)照組年齡20～65歲，平均(35.7±8.0)歲。兩組平均年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1陰道微生態(tài)檢測(cè) 兩組均進(jìn)行陰道微生態(tài)檢測(cè)，具體方法如下：用2根無菌棉拭子留取陰道側(cè)壁上 1/3 分泌物送檢，采用江蘇碩世生物科技有限公司生產(chǎn)的陰道炎聯(lián)合檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，操作及判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書。其中1根無菌棉拭子采用濕片鏡檢法，檢測(cè)陰道清潔度及是否存在病原體;另1根無菌棉拭子采用干化學(xué)酶法檢測(cè)過氧化氫酶、唾液酸苷酶、白細(xì)胞酯酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH值。根據(jù)《陰道微生態(tài)評(píng)價(jià)的臨床應(yīng)用專家共識(shí)》[2]，陰道清潔度Ⅰ～Ⅱ度為正常，Ⅲ～Ⅳ度為異常；菌群密集度Ⅱ～Ⅲ級(jí)為正常，Ⅰ、Ⅳ級(jí)或無為異常；菌群多樣性Ⅱ～Ⅲ級(jí)為正常，Ⅰ、Ⅳ級(jí)或無為異常；優(yōu)勢(shì)菌為乳酸桿菌時(shí)為正常，為其他菌群則為異常；陰道 pH 值3.8～4.5為正常，>4.5為異常；過氧化氫酶陰性為正常，陽性為異常；唾液酸苷酶陰性為正常，陽性為異常；白細(xì)胞酯酶陰性為正常，陽性為異常；β-葡萄糖醛酸酶陰性為正常，陽性為異常；乙酰氨基葡萄糖苷酶陰性為正常，陽性為異常。

1.2.2宮頸HR-HPV檢測(cè) 兩組均進(jìn)行宮頸HR-HPV檢測(cè)，具體方法如下：采用HR-HPV專用采集刷于宮頸口按同一時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)3～5圈，然后放入裝有固定液的專用保存管中密封送檢，采用杭州德同生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，操作及判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書。標(biāo)本的相對(duì)光單位(RLU)/ 標(biāo)準(zhǔn)陽性對(duì)照的 RLU≥1.0時(shí)即可診斷為 HR-HPV陽性。

2 結(jié) 果

2.1兩組陰道清潔度及病原體檢出率比較 感染組陰道清潔度Ⅲ～Ⅳ度患者所占比例為59.4%(76/128)，高于對(duì)照組的45.1%(93/206)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。感染組細(xì)菌性陰道病(BV)相關(guān)細(xì)菌感染的檢出率高于對(duì)照組，真菌與滴蟲感染的檢出率低于對(duì)照組，但兩組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組陰道清潔度與病原體檢出率比較[n(%)]

2.2兩組陰道微生態(tài)異常檢出率比較 感染組陰道菌群多樣性異常的檢出率為14.8%，優(yōu)勢(shì)菌異常的檢出率為35.2%，過氧化氫酶異常的檢出率為27.3%，pH值異常的檢出率為51.6%，均高于對(duì)照組(P<0.05)。兩組菌群密集度、唾液酸苷酶、白細(xì)胞酯酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶異常的檢出率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 陰道微生態(tài)異常檢出率在兩組間比較[n(%)]

2.3宮頸HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素分析 以宮頸HR-HPV感染作為因變量，陰道清潔度，真菌、BV相關(guān)細(xì)菌、滴蟲感染，菌群密集度、菌群多樣性、優(yōu)勢(shì)菌、過氧化氫酶、唾液酸苷酶、白細(xì)胞酯酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值作為自變量，進(jìn)行二分類Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，陰道清潔度、過氧化氫酶及pH值異常是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

表3 宮頸HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素

3 討 論

女性的陰道微環(huán)境是一個(gè)復(fù)雜的微生態(tài)系統(tǒng)。健康育齡期女性的陰道是一個(gè)以產(chǎn)過氧化氫的乳酸桿菌為優(yōu)勢(shì)菌，同時(shí)有數(shù)種微生物共生，而無真菌、滴蟲等相關(guān)致病菌存在，pH值在3.8～4.5 的微環(huán)境[3]。隨著分子生物學(xué)研究的深入，越來越多的研究表明，陰道微生態(tài)的失衡在HR-HPV持續(xù)感染及宮頸病變的發(fā)生、發(fā)展過程中起到重要作用[4-5]。但對(duì)于引起HR-HPV持續(xù)感染的微生態(tài)相關(guān)指標(biāo)的研究結(jié)論不一，危險(xiǎn)因素分析結(jié)果也存在差異。

3.1陰道清潔度與宮頸HR-HPV感染的關(guān)系 陰道清潔度是通過顯微鏡對(duì)陰道分泌物進(jìn)行濕片和染色涂片檢查，觀察陰道桿菌、雜菌、白細(xì)胞及上皮細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而對(duì)陰道微生態(tài)環(huán)境進(jìn)行判斷。陰道清潔度分為Ⅰ～Ⅳ度，健康女性陰道清潔度為Ⅰ～Ⅱ度，當(dāng)清潔度為Ⅲ～Ⅳ度時(shí)，常常伴隨病原微生物的感染，提示陰道炎癥的存在[6]。張蔚苓等[7]通過對(duì)60例HR-HPV感染者及60例HR-HPV陰性者陰道微生態(tài)的分析發(fā)現(xiàn)，陰道清潔度異常是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素(OR=8.389，95%CI：2.036～34.561，P=0.003)。王美藏等[8]研究發(fā)現(xiàn)，陰道清潔度與人乳頭瘤病毒(HPV)感染呈正相關(guān)(r=0.493,P<0.05)，提高陰道清潔度將有利于降低HPV的感染率，從而降低宮頸病變的發(fā)生率。本研究中，感染組陰道清潔度異常(Ⅲ～Ⅳ度)的發(fā)生率為59.4%，高于對(duì)照組的45.1%；二分類Logistic回歸分析顯示，陰道清潔度異常是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素之一，與上述研究結(jié)論一致。因此，對(duì)于宮頸HR-HPV感染者，在進(jìn)行陰道微生態(tài)分析時(shí)，需要關(guān)注陰道清潔度這一指標(biāo)。

3.2陰道病原體感染與宮頸HR-HPV感染的關(guān)系 不同的研究中，陰道病原體感染與宮頸HR-HPV感染的關(guān)系結(jié)論不一致。張雪芳等[9]對(duì)20項(xiàng)病例對(duì)照研究的結(jié)果進(jìn)行Meta分析發(fā)現(xiàn)，中國女性宮頸 HR-HPV 感染與BV、外陰及陰道假絲酵母菌病有關(guān)，但與陰道毛滴蟲病的關(guān)系還有待研究。CASTRO-SOBRINHO等[10]研究發(fā)現(xiàn)，BV和炎性反應(yīng)與HPV陽性宮頸腫瘤患者的病情嚴(yán)重程度相關(guān)(P<0.05)。顏文杰[11]研究發(fā)現(xiàn)，HPV感染與外陰及陰道假絲酵母菌病明顯相關(guān)(P<0.05)，但與BV、陰道毛滴蟲病無明顯相關(guān)性(P>0.05)。本研究中，感染組BV相關(guān)細(xì)菌感染的檢出率高于對(duì)照組，真菌與滴蟲感染的檢出率低于對(duì)照組，但兩組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。二分類Logistic回歸分析也未發(fā)現(xiàn)BV相關(guān)細(xì)菌、真菌與滴蟲感染是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果存在不一致的地方，可能與病例的選擇及實(shí)驗(yàn)室差異有關(guān)。因此，關(guān)于陰道病原體感染是否為宮頸HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素這一點(diǎn)，值得進(jìn)一步研究。

3.3陰道菌群密集度、多樣性與宮頸HR-HPV感染的關(guān)系 陰道微生態(tài)的核心是陰道微生態(tài)菌群，健康女性的陰道微生態(tài)是由一種或幾種乳酸桿菌作為優(yōu)勢(shì)菌群的微生態(tài)平衡系統(tǒng)[12]。此外，健康女性的陰道微生態(tài)中菌群多樣性、密集度及比例等維持著一種動(dòng)態(tài)平衡，HPV 檢測(cè)也通常是陰性的[13]。GAO等[14]通過對(duì)HPV陰性與陽性受試者陰道菌群的多樣性和組成進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，HPV陽性受試者的陰道菌群具有顯著的生物多樣性(P<0.001)。邱興堤等[12]研究表明，上海地區(qū)HR-HPV感染女性具有陰道菌群多樣性和密集度異常發(fā)生率高的特點(diǎn)。張攀[15]研究發(fā)現(xiàn)，HPV 感染組陰道菌群多樣性Ⅱ～Ⅲ級(jí)、密集度Ⅱ～Ⅲ級(jí)人數(shù)所占比例低于健康對(duì)照組。本研究中，感染組陰道菌群多樣性異常的檢出率(14.8%)高于對(duì)照組(6.8%)，與上述學(xué)者的研究結(jié)果類似，提示陰道菌群多樣性異?？赡芘c宮頸HR-HPV感染存在一定的關(guān)系，需要引起臨床的關(guān)注。

3.4陰道乳酸桿菌及pH值與宮頸HR-HPV感染的關(guān)系 陰道乳酸桿菌一直被認(rèn)為是陰道正常菌群中最重要的成員，其在降低陰道 pH值、維持陰道清潔度及微生態(tài)平衡、抵抗生殖道感染中起著關(guān)鍵作用，是女性生殖道的微生物防線。陳國斌等[5]研究發(fā)現(xiàn)，HPV陰性對(duì)照組陰道乳酸桿菌數(shù)量明顯多于宮頸癌前病變組和宮頸 HPV陽性組(P<0.05)。李盛勇等[16]通過Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌缺乏是HPV感染的危險(xiǎn)因素之一。本研究結(jié)果表明，感染組優(yōu)勢(shì)菌、過氧化氫酶及pH值異常的檢出率均高于對(duì)照組(P<0.05)；二分類Logistic回歸分析結(jié)果顯示，過氧化氫酶、pH值異常是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素，提示對(duì)于宮頸HR-HPV感染者，需要關(guān)注陰道乳酸桿菌、過氧化氫酶及pH值異常引起的陰道微生態(tài)失調(diào)，并及時(shí)給予糾正。

綜上所述，宮頸HR-HPV感染者的陰道微生態(tài)失衡，主要表現(xiàn)在清潔度、菌群多樣性、優(yōu)勢(shì)菌、過氧化氫酶及pH值異常這幾個(gè)方面，且清潔度、過氧化氫酶及pH值異常是HR-HPV感染的危險(xiǎn)因素，需要引起高度重視。這也提醒臨床工作者可以考慮通過積極重建陰道微生態(tài)平衡來預(yù)防和控制HR-HPV感染，以早期預(yù)防宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展。