臨床微生物快速檢驗技術研究進展

天津第四中心醫院（300140）趙群莉

近年來感染性疾病有逐年上升的發病趨勢，感染性疾病對于人體的身體機能影響較大，引發感染性疾病的微生物較多。當前臨床上對于微生物化驗快速檢驗技術的研究較多，以下為有關檢驗方法。

1 自動化培養鑒定技術

傳統的微生物檢驗技術中需要制作染色體圖片，進行一系列的培養和生化鑒定，檢驗操作過程非常繁雜且需要花費大量的時間，無法滿足臨床上治療患者需求。為解決這一難題，開發了各種自動化的培養以及鑒定系統，用于完善微生物檢驗方法。可利用微生物鑒定專家系統進行微生物快速檢驗，利用不同微生物的酶系統不同的特點，其分解的物質不同。可通過間接檢測微生物代謝產物的方法，檢測微生物。利用菌類特殊的生化反應，根據其工作原理制作微生物鑒定專家系統，檢測到細菌所使用的底物后，根據反應液中色原性、pH值以及酶降解反應進行判斷。將需要檢測的細菌制作成懸浮液注入相應的鑒定卡中，將其插入培養箱中進行培養，通過定時掃描比較陽性閾值，最后采取計算機系統分析培養數據，自動形成鑒定報告。血培養儀器是在傳統的血液細菌培養方法之上增加雙向增菌培養瓶，能夠省略細菌轉種過程而直接形成菌落，可自動感應細菌生成的二氧化碳物質，檢測的靈敏性得到有效提升，可達到快速診斷的檢驗效果。分枝桿菌培養是在90年代初使用的熒光標記系統上配合熒光檢測和二氧化碳氣體檢測，根據氣體壓力變化，快速分析細菌的生物學特征，采取數據處理的方式制作檢驗報告[1]。

2 免疫學檢測技術

免疫學檢驗技術已經較為成熟，其中酶免疫分析法是采用高效酶催化劑與抗原抗體免疫反應結合，當酶催化底物發生有關化學反應后，溶液顏色變化，可清晰顯示抗原抗體，常用于檢測肺炎球菌和大腸埃希菌。熒光免疫分析在抗原抗體反應檢驗中的特異性非常高，使用熒光素進行標記，借助熒光顯微鏡進行快速觀察，其特異性非常高，但是受限于操作流程繁雜、標本保存時間短問題，該項技術仍然需要進行完善。

3 分子生物學檢測技術

對于培養難度高或者不能進行培養的微生物，可采取分子生物學檢驗技術，臨床檢驗中常使用的分子生物學檢驗技術有聚合酶鏈反應技術和核酸雜交技術，聚合酶鏈技術模擬天然的DNA復制過程，將待檢測基因在數小時之內擴增百萬倍，可實現快速檢測。核酸雜交技術利用核酸復性、變性特性，根據堿基對互補原則，固相或液相中形成異質雙鏈，使用DNA探針進行檢測，該項技術不受病菌的影響，可快速檢驗出待測細菌[2]。

4 生物傳感器檢驗技術

生物傳感器檢驗技術的操作步驟較為簡單且檢驗準確性高，可廣泛用于實驗室檢驗中。DNA生物傳感器屬于臨床中應用最廣的病毒微生物檢驗傳感器，與核酸檢驗技術相比，檢驗準確性更高，在臨床中推廣的難度更小，臨床應用的發展空間較大。

5 生物芯片檢驗技術

生物芯片檢驗技術是將蛋白質、多肽以及基因片段等生物大分子，固定在支持物上，形成生物大分子點陣，當生物大分子與芯片中的探針分子發生相互作用后，獲取檢測樣品的序列信號以及分子數量，根據檢測探針分子雜交信號的強度，可實現高通量快速檢測。生物芯片的探針種類有DNA、蛋白質以及細胞等類型，以DNA芯片為例，可快速有效獲取檢驗物質的遺傳信息，用于檢測變異的細菌、耐藥機制、基因序列抗感染藥物的研究中，基因芯片分析技術分析速度快，對檢測樣品的污染程度非常小，可進行多樣品處理，檢測的樣本用量非常少，一次使用一張芯片，即可對混合感染標本進行檢驗，能夠在極短的時間內獲取大量的檢驗信息。病原微生物發生變異、種類復雜會對患者藥物敏感性產生影響，應用基因檢測技術可快速查清患者病情，可為臨床醫生制定治療方案提供有效的醫學診斷信息，能夠減輕患者的治療痛苦。

6 質譜檢測技術

質譜是一種與光譜并列的譜學方法，通常意義是指廣泛應用于各個領域中通過制備、分離、檢測氣象離子來鑒定化合物的一種專門技術。應用于微生物檢測，具有快速準確的特點。

7 結束語

感染性疾病傳播速度加劇，對于人體的身體健康損害較大，醫學界為解決這一問題，需要采取快速準確的微生物檢驗技術。當前計算機技術發展非常快，微生物檢驗技術可結合計算機技術，向自動化、高速化方向發展。多學科的融合能夠促使微生物檢驗技術不斷發展，可為臨床微生物檢驗提供較高的診療價值。