念珠菌與口腔疾病的最新研究進展

張躍清

（盈江張躍清口腔診所，云南 德宏傣族景頗族自治州盈江縣）

0 引言

當機體抵抗力低下或出現(xiàn)菌群失調(diào)時，假絲酵母菌會侵犯機體多個部位，引起各種假絲酵母菌病。念珠菌會不會致病，取決于念珠菌的毒力、念珠菌的數(shù)量、念珠菌的入侵途徑與機體的適應性、機體的抵抗力等因素。嬰幼兒因其免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育，為念珠菌感染的好發(fā)人群。成年人口腔念珠菌感染中，最大的影響因素是全身系統(tǒng)性疾病及其他口腔粘膜疾病，如大手術(shù)、腫瘤化療后、干燥綜合征、HIV 感染等。按其主要病變部位可將口腔念珠菌分為：念珠菌性口炎、念珠菌性唇炎與念珠菌性口角炎和慢性粘膜皮膚念珠菌病。念珠菌性口炎又可分為急性假膜型、急性紅斑型、慢性肥厚型和慢性紅斑型。急性假膜型又稱為鵝口瘡、雪口病，是由白色念珠菌感染引起的口腔粘膜急性假膜性損害，屬嬰幼兒常見的口腔炎癥，尤其在新生兒及小于六個月嬰兒最多見。病損區(qū)粘膜會出現(xiàn)充血水腫，會有散在的柔軟小斑點，形狀如凝乳，呈半黏附性略微高起；不久后相互融合形成白色或藍白色斑片，之后并繼續(xù)擴大延伸，嚴重的患者可導致扁桃體、咽部損傷。過數(shù)天后，病損部位的粘膜充血減退，斑片的顏色會由白色轉(zhuǎn)變?yōu)榈S色，最后變?yōu)辄S褐色。斑片與粘膜部分粘在一起，我們稍加用力才可以擦去，強行撕開后會露出紅色粘膜的糜爛面或者會出現(xiàn)輕度出血。既往研究發(fā)現(xiàn)口腔白色念珠菌在家族傳播中的基因會呈現(xiàn)多態(tài)性，這與口腔變形念球菌（mutans Streptococci， MS）傳播的基因多態(tài)性結(jié)果相類似[1]。有學者認為約有10%的口腔白斑患者伴有念珠菌的感染[2]。有學者認為口腔扁平苔蘚（OLP）患者常存在使念珠菌成為條件致病菌的易感因素[3]。有學者認為口腔扁平苔蘚發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化與念珠菌有關(guān)[4]。

1 念珠菌的生物學特征及鑒定

1.1 念珠菌生理學特征

菌體呈圓形或卵圓形，大小2μm×4μm，革蘭染色陽性。繁殖方式為出芽繁殖，孢子可伸長成芽管，不與母細胞脫離而形成假菌絲。白假絲酵母菌在普通瓊脂、血瓊脂和沙保培養(yǎng)基上均生長良好。生長條件為需氧，室溫或37℃下1-3 天，菌落表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母氣味。再玉米Tween-80 培養(yǎng)基上25℃培養(yǎng)可長出厚膜孢子。

1.2 厚孢子、芽管形成實驗

厚孢子形成試驗是白假絲酵母菌的重要鑒定實驗之一。將待測白假絲酵母菌接種至玉米吐溫—80 瓊脂做小培養(yǎng)，置25℃孵育，每天于顯微鏡下觀察，在72 小時內(nèi)可觀察到豐富的假菌絲，假菌絲中隔部伴有成簇的圓形分生孢子，絕大部分菌株在假菌絲頂端有單個、最多不超過2 個厚孢子。

芽管形成實驗是一種價值大且簡單快速推斷性鑒定白假絲酵母菌方法。方法：取少量待測菌接種至0.5-1mL 血清（兔、人或小牛血清），混勻，37℃水浴箱中孵育2-3 小時，每隔一小時用接種環(huán)取一點菌液置于載玻片上，加蓋玻片后鏡檢，觀察有無芽管形成。絕大部分白假絲酵母菌可形成典型的放大鏡柄狀芽管，2-3 小時別的假絲酵母菌一般不會形成芽管。注意孵育時間不超過四小時，否則其他酵母菌也會將出芽而影響鑒定結(jié)果。

1.3 TTC 試驗

將假絲酵母菌接種于含0.005%氯化三苯四氮唑（Triphenyl tetrazolium chloride， TTC）的沙保培養(yǎng)基中，22-25℃經(jīng)24-48 小時培養(yǎng)，白假絲酵母菌不變色或僅淡紅色，熱帶假絲酵母菌深紅色，其他假絲酵母菌或酵母菌為紅色?，F(xiàn)在臨床用的商品化產(chǎn)色培養(yǎng)基如科碼嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基（CHRO—Mager），可快速鑒定白假絲酵母菌和其他假絲酵母菌。

1.4 糖同化或發(fā)酵試驗

假絲酵母菌如果會發(fā)酵某種糖，一定會同化該種糖，所以此實驗只需要做不被發(fā)酵糖的同化試驗。糖發(fā)酵試驗是將待測菌接種于糖發(fā)酵管25℃孵育2-3 天觀察結(jié)果，同化試驗是在基礎培養(yǎng)基中分別加入各種糖及接種待測菌，觀察有沒有酵母菌生長或所用培養(yǎng)基是否變混濁。

1.5 藥敏試驗

白假絲酵母菌對兩性霉素B、三唑類（如氟康唑、伏力康唑、伊曲康唑、泊沙康唑等）、棘白菌素類（如卡泊素凈、米卡芬凈等）、5-氟胞嘧啶等藥物敏感，但對5-氟胞嘧啶特別容易產(chǎn)生耐藥性。

1.6 最新研究

①抗原檢測，通過酶聯(lián)免疫吸附、免疫印跡等檢測有無白假絲酵母菌的抗原。②抗體檢測，用酶聯(lián)免疫夾心法、免疫酶斑點試驗診斷患者血清中是否有相應抗體，也可做膠乳凝集試驗和對流免疫電泳試驗等檢測血清中抗白假絲酵母菌抗體。③G 試驗 也稱螯試驗，可測定1，3—β—D 葡聚糖，后者是多種真菌細胞壁的共同成分，若在血液或無菌體液中測出1，3—β—D 葡聚糖，是深部真菌感染的標志。④核酸檢測，用分子探針檢測經(jīng)PCR 法擴增的白假絲酵母菌DNA 分子，具有較好的敏感性和特異性。⑤動物試驗，取白假絲酵母菌懸液（約10 的十次方/mL）1mL 從家兔耳沿靜脈注入或取0.2ML 菌懸液從小白鼠尾靜脈注射，觀察5-7 天看實驗動物是否發(fā)病或死亡。解剖時如果發(fā)現(xiàn)臟器有多種小膿腫，即為白假絲酵母菌感染，因為其他假絲酵母菌對動物無致病性。

2 糖尿病與白色念珠菌口炎的關(guān)系

有學者認為口腔白色念珠菌病產(chǎn)生，使得患者的生命健康和生活質(zhì)量產(chǎn)生極大影響， 因此加強對糖尿病合并白色念珠菌口炎患者診斷和治療的積極研究尤為重要[1]。那對于有糖尿病的患者來說，檢查是否有念珠菌的感染及其重要。那念珠菌的感染很廣泛，如何才能做到精確的診斷出念球菌感染的部位或器官？這對于廣大臨床醫(yī)生來說也是一個不小的挑戰(zhàn)，念珠菌感染癥狀不一定相同，那當念球菌處于潛伏期感染的患者應如何檢測呢？這就需要檢測這擁有一雙明亮的眼睛，醫(yī)療機構(gòu)有一套健全的檢測流程。需要廣大人民群眾適當?shù)淖鲶w育鍛煉，丟棄不合理的行為習慣，增強自身抵抗力，適量飲酒，戒煙，預防慢性病的發(fā)生。

3 益生菌與口腔疾病的關(guān)系

乳桿菌屬（嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳 桿菌、羅伊氏乳桿菌、丙酸桿菌等）和雙歧桿菌屬是最早被學者發(fā)現(xiàn)的口腔益生菌。口腔感染性疾病主要包括齲病、牙髓根尖周病、牙周病以及顱頜面部其他軟組織和間隙感染，有學者認為口腔念珠菌病等口腔疾病中發(fā)揮著重要作用[2]。益生菌對牙周病的影響機制目前尚無定論。有學者報道副干酪乳桿菌能分泌一種細菌素可以顯著抑制牙齦卟啉單胞菌的生長[3]。有學者研究發(fā)現(xiàn)乳酸桿菌和白色念珠菌一起培養(yǎng)后能有效抑制白色念珠菌的生長[4]，那研究者是否能通過一定的手段，在患念珠菌感染的患者中食入或引入乳酸桿菌，能否達到治愈念珠菌感染患者的目的呢？這還有待于做深入的研究。

4 納米細菌與口腔疾病關(guān)系

何為納米細菌呢？顧名思義納米細菌首先是一種細菌，其次它的個體微小，是一種有著獨特鈣化能力的微粒。近年來納米細菌被發(fā)現(xiàn)與許多口腔疾病的發(fā)生密切相關(guān)。到底納米細菌與口腔疾病有啥不可告人的秘密呢，接下來我們一起來看看。經(jīng)學者研究，在人的唾液、齒面、牙結(jié)石、牙菌斑和牙髓石中均存在著大量納米細菌。因為納米細菌在生長過程中，所產(chǎn)生的羥磷灰石結(jié)晶同樣存在于涎腺結(jié)石中，所以也有許多學者認為納米細菌與涎腺結(jié)石的產(chǎn)生有關(guān)。那納米細菌是如何產(chǎn)生的呢？它對生長環(huán)境有沒有特殊的要求，要如何才能抑制納米細菌的生長呢，這有待對納米細菌進行深入的研究和探索。

5 念珠菌的爭議

假絲酵母菌?。ㄓ址Q念珠菌病）是由各種致病性假絲酵母菌引起的局部或全身性感染，好發(fā)于機體免疫低下的患者，為最常見的深部真菌病。假絲酵母菌病患者、帶菌者以及被假絲酵母菌污染的食物、水、醫(yī)院等環(huán)境是本病的傳染源，由定植于體內(nèi)的假絲酵母菌在一定條件下大量增殖并侵襲周圍組織引起自身感染較為多見，也可通過直接接觸等傳播。念珠菌屬于正常菌群，白假絲酵母菌與口腔的其他疾病的發(fā)生都有關(guān)系，對于酵母菌屬的其他真菌對疾病的發(fā)生有無影響，影響作用有多大還有待于研究。念球菌感染極大地影響了患者的生活質(zhì)量，尋求安全有效的治療手段也成為臨床醫(yī)生最大的挑戰(zhàn)。

6 展望

綜上所述，念珠菌與多種疾病的發(fā)生都有關(guān)聯(lián)，糖尿病合并感染白色念珠菌，極大影響患者的健康和生活質(zhì)量。乳酸桿菌和白色念珠菌一起培養(yǎng)能抑制白色念珠菌的生長，深入的研究為臨床醫(yī)生診斷相應的念珠菌感染提供方向，提供治療相應念球菌感染的措施，造福于廣大念球菌感染患者。