沉默長鏈非編碼RNA DGCR5對肺腺癌細胞增殖、侵襲、遷移及Wnt/β-catenin信號通路的影響

郭水根 舒慧珍

(復旦大學附屬浦東醫院呼吸內科，上海 201399)

肺腺癌是常見的惡性腫瘤之一，其發病率和死亡率有升高趨勢，研究肺腺癌的發病機制對其診斷和治療具有重要價值[1]。肺腺癌的發生發展是多基因、多階段、多因素共同作用的結果。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是長度大于200 nt的RNA，不編碼蛋白質，可在不同水平對染色質修飾、轉錄和轉錄后水平的基因表達發揮調控作用。研究發現多種lncRNA在肺腺癌的發生發展中發揮重要作用[2]。近年研究發現，lncRNA DGCR5在惡性腫瘤的發生發展中具有重要作用，在肝細胞癌、胰腺導管癌等惡性腫瘤中表達降低[3，4]；在肺腺癌中，DGCR5表達升高，對肺腺癌的診斷和預后評價具有重要價值，但其對肺腺癌增殖、侵襲及遷移的作用機制尚不明確[5]。惡性腫瘤細胞的上皮間質轉化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)在細胞侵襲和遷移中具有重要作用，可增加惡性腫瘤細胞的侵襲及遷移能力[6]。Wnt/β-連環蛋白(β-catenin) 信號通路在EMT中發揮重要調控作用[7]。因此本文通過沉默DGCR5觀察其對肺腺癌細胞增殖、侵襲、遷移及Wnt/β-catenin信號通路的影響，探討DGCR5在肺腺癌中的可能作用機制，現報道如下。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞株 人肺腺癌H1650和A549細胞株購自中國科學院上海生命科學研究院細胞庫。

1.1.2主要試劑 siRNA-DGCR5和陰性對照siRN A購自上海吉瑪公司；qRT-PCR試劑盒、Lipofec-tamineTM轉染試劑盒、DMEM培養基、TRIzol試劑、CCK8試劑盒等購自美國Promega公司；Transwell小室購自美國Corning公司；兔抗人E-cadherin多克隆抗體、兔抗人Vimentin多克隆抗體、兔抗人β-catenin多克隆抗體、兔抗人p-gsk-3β多克隆抗體購自美國Sigma公司。

1.2方法

1.2.1細胞分組……