牡荊苷對急性腦缺血大鼠大腦紋狀皮質nNOS免疫表達的影響

劉 磊 吳一飛

(陜西中醫藥大學基礎醫學院，咸陽 712046)

急性腦缺血是臨床常見的腦血管疾病，可導致相應神經元損害引發神經功能障礙[1]。研究發現，急性腦缺血實驗大鼠腦皮層紋狀區可在受到缺血缺氧性信息刺激后激活神經元一氧化氮合酶(nNOS)的表達，經免疫組化檢測發現nNOS陽性神經元顯著增多，且對維持炎性反應的發展、誘發并加重皮層紋狀區神經元損傷具有至關重要的作用[2]。另有研究報道，急性腦缺血實驗大鼠造模24 h后大腦皮層紋狀體脫失明顯，nNOS陽性神經元顯著增多，其中大腦皮層紋狀體是nNOS的主要來源，可損傷神經細胞，誘發膠質細胞壞死[3]。故在急性腦缺血治療中應積極控制大腦紋狀皮質nNOS陽性神經元的數量和活性。牡荊苷是從牡荊葉和牡荊子中提取的黃酮類化合物，在既往的報道中證實牡荊苷對急性腦缺血大鼠具有抗氧化應激活性和腦保護作用[4，5]。牡荊苷是否能夠調控急性腦缺血大腦紋狀皮質nNOS陽性神經元的數量和表達，以減少神經元細胞凋亡尚鮮有報道。本研究選取50只雄性SD大鼠開展實驗，報道如下。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 50只SD雄性大鼠，SPF級，6～8周，體質量180～220 g，均購自西安交通大學醫學實驗動物中心，實驗動物合格證號：SCXK(陜)-2018001。

1.1.2試劑與儀器 牡荊苷(上海經科化學科技有限公司，純度HPLC≥98%)；2%戊巴比妥鈉(諾華制藥有限公司)；磷酸鹽緩沖液(武漢博士德生物公司)；4%多聚甲醛溶液(北京雷根生物技術有限公司)；2% 2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液、兔抗鼠nNOS、β-actin，辣根過氧化物酶(HRP)標記的山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)(美國Sigma 公司)；……