加味生脈散對飛碟運動員高溫訓練前后外周血中血液生化及HSP72表達的影響

沈 堅 徐 峰 金 斌 章榮權

1浙江體育職業技術學院，浙江 杭州 311231；

2浙江省射擊射箭自行車運動管理中心，浙江 湖州 313100

如何增強高溫耐受能力是運動訓練學面臨的重要課題之一。如果機體長期處于高溫、高濕等環境下，熱適應水平會減弱或喪失，如果不及時采取有效的措施進行預防，將導致機體代謝產熱以及從熱環境中吸收、傳輸熱量的比例增加，水電解質代謝出現紊亂，內環境失衡，從而出現心跳加快，外周阻力增加等一系列以中樞神經系統、心血管系統功能障礙的不良反應與癥狀，稱之為熱疾病，熱疾病是導致美國高中生出現運動性猝死的第三大原因。[1]熱疾病在飛碟運動員夏季訓練中時常發生，常常降低訓練質量，影響競技成績的提高，甚至威脅身心健康，在夏訓中，加強對運動員健康的監護，提高運動員的熱耐受能力，進而預防熱疾病的發生，具有重要的現實意義。熱適應是指機體處在熱環境一段時間后，機體所產生的對熱負荷的適應能力，熱適應水平的高低是機體對熱環境的適應能力的直接反映。當前，高溫環境下機體的熱適應水平評價標準尚不統一，熱休克蛋白對于機體在正?；蚋邷丨h境下的生存是必要的，與細胞保護之間的關系最為密切，熱休克蛋白72（heat shock protein 72，HSP72）與熱應激的關系最為密切，是對熱及運動刺激最敏感的熱應激蛋白，易被誘導產生，在一定程度上反映機體的熱應激程度。[2]有研究[3]認為，熱疾病患者體內，HSP72的表達在降低，而適當上調HSP72的表達可以提高機體的熱適應水平。[4]

1 對象與方法

1. 1 研究對象及主要試劑

選擇浙江省射擊射箭自行車運動管理中心飛碟運動員24名，健康狀況良好，無吸煙、飲酒等嗜好，無家族遺傳病史，年齡16～24歲，平均20.21±1.55歲；訓練年限為3～10年。24人采用隨機數字表方法分為對照組和中藥組，每組12人，兩組隊員年齡、訓練年限等計數資料，經方差齊性檢驗，差異無顯著性意義（P＞0. 05），具有可比性?？诜a液鹽為飛碟運動員夏季訓練所用常規飲品，加味生脈散組成為：人參、麥冬、五味子等，由浙江體育職業技術學院附屬體育醫院提供，淋巴細胞分離液（上海乾途生物科技有限公司提供）。

1. 2 實驗方法

進行高溫訓練 2周，兩組訓練強度相同，每天同時在高溫環境下（30～36℃）訓練，每天連續打五組，一組30發子彈，每組間歇20min。訓練過程中，對照組按需飲用口服補液鹽沖劑（每袋沖劑含氯化鈉2.6克、氯化鉀1.5克、枸櫞酸鈉2.9克、無水葡萄糖13.5克），不服用加味生脈散制劑；中藥組飛碟運動員于訓練過程中飲用加味生脈散制劑1袋（200ml）及口服補液鹽沖劑。

1. 3 實驗室檢查

兩組運動員，于高溫訓練開始前、高溫訓練2周后，安排血液測試，抽血后，分置于兩個含有EDTA鈉的抗凝管中。其中一管送浙江省體育科學研究所實驗室進行血液常規及生化指標檢測，另一管血液在室溫下自然凝固10～20分鐘，再經過20分鐘左右（2000～3000轉/分）的離心，仔細收集上清，寄送上海江萊生物科技有限公司實驗室。血液指標包括：紅細胞、血紅蛋白、白細胞、血小板計數等常規，CK（心肌激酶）、Bun（尿素氮）等反映機體代謝情況的血液生化指標以及Na+（鈉離子）、K+（鉀離子）、Ca2+（鈣離子）、Cl-（氯離子）等反映機體電解質代謝情況的指標。外周血液HSP72表達水平測定：應用雙抗體夾心法進行測定，操作步驟：加樣、加酶、溫育、配液、洗滌、顯色、終止、測定，人熱休克蛋白72（HSP-72）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供。

1.4 統計分析

數據資料均以±s表示，用SPSS 19. 0軟件進行統計分析處理，兩組訓練前后均數比較采用單因素方差分析LSD法。

2 實驗室檢查結果

2. 1 高溫訓練前后兩組血液常規的比較

高溫訓練前后紅細胞、血紅蛋白、白細胞、血小板計數高溫訓練前后，組間無顯著性差異（P＞0. 05），白細胞計數，中藥組與訓練前、對照組之間比較均有顯著差異（P＜ 0.05）。

表1 高溫訓練前后兩組血常規比較（±s，n= 12）

2. 2高溫訓練前后兩組血液生化指標的比較

表2 高溫訓練前后兩組血液生化比較（±s，n= 12）

高溫訓練前后，血液CK、Bun、Na+、K+、Ca2+、Cl-生化指標檢驗的測量值組間差異無顯著性（P＞0.05）。

2.3 高溫訓練前后兩組外周血HSP72表達的比較

表3 兩組訓練前后HSP 72表達的比較（±s，n= 12）

高溫訓練之前，兩組的HSP72的表達經比較無顯著差異（P＞ 0.05）。高溫訓練之后，經比較，兩組的HSP72表達均顯著高于訓練之前（P＜ 0.05），中藥組的HSP72表達顯著高于對照組（P＜ 0.05），具體見表3。

3 討論

隨著全球溫室效應和厄爾尼諾現象的加劇，全球氣溫普遍上升，呈現出高溫的特點。當前，許多重要的國際、國內賽事，如夏季奧運會、國際足聯世界杯和環法自行車賽等一般都在北半球的夏季月份舉行，通常也是在高溫環境中進行的，[1]2017年天津全運會飛碟項目也于當年8月舉辦。飛碟是一項技術動作復雜和精確程度很高的室外運動項目，要求運動員需要具備較強的心理素質和抗干擾能力，同時擁有較高水準的穩定性、一致性、靈活協調能力以及持續性。浙江省飛碟隊隸屬于浙江省射擊射箭自行車運動管理中心，位于浙江省湖州市長興縣境內，長興縣位居浙北低山丘陵向太湖西岸平原過渡的地區，屬于亞熱帶海洋性氣候，全年光照充足、降雨充沛、雨熱同季，夏季時間長，溫度高，濕度大，尤其是每年的7、8兩月，最高溫度甚至高達39℃以上。在這樣的高溫、高濕環境下訓練，需要運動員擁有較高的熱適應水平，而熱痙攣、熱暈厥等熱疾病在飛碟運動員夏季訓練中尤為常見，運動員發生輕型熱疾病可以影響正常訓練計劃，重癥熱疾病則可能終止訓練，甚至有生命危險，因此為了避免熱疾病的發生，充分了解和認識熱疾病的發病原因及采取積極的預防措施顯得尤為重要，加強對運動員健康的監護、預防熱疾病具有十分重要的現實意義。生脈散首載于金代張元素《醫學啟源》中，由人參、麥冬、五味子三味藥組成，具有“益氣生津，斂陰止汗”的功效，多用于治療溫熱、暑熱，耗氣傷陰證及久咳傷肺，氣陰兩虛證。飛碟運動員在高溫高濕環境下易發生注意力不集中，這正是影響飛碟運動員成績的一個重要影響因素，生脈散中人參可以益氣安神益智，服用生脈散可以幫助運動員提高注意力，從而提高命中率。通過研究發現，訓練前，兩組間的血常規及生化指標無顯著性差異。訓練后，兩組間的CK、Bun、Ca2+、Na+、Cl-、K+無差異（P＞ 0.05）；中藥組白細胞計數增高，與自身訓練前及對照組比較差異顯著（P＜ 0.05），這可能與高溫應激有關[5]，也提示服用加味生脈散制劑后，機體對高溫的應激性有增強的趨勢。高溫訓練后，中藥組飛碟運動員和對照組飛碟運動員體內HSP72的表達均較訓練前上升，其中中藥組上升幅度大（P＜ 0.05），提示服用加味生脈散可顯著提高高溫訓練后運動員體內的HSP72表達。HSP72是具有自衛性[7]的一種應激蛋白，它的表達的適當上調可以增強肌體的熱適應水平。盡管加味生脈散影響HSP72表達的作用機制尚需進一步探討，但上個世紀九十年代就有研究者發現生脈散能降低老年動物在高溫環境中的死亡率，[7]還有學者[8]實驗證實加味生脈散不僅能明顯延長小鼠在高溫狀態下的生存時間而且能增強高溫狀態下耐疲勞能力，這提示加味生脈散可能有預防或延緩熱疾病發生的作用?，F代藥理研究[9]也表明生脈散具有抗氧化、改善心肌功能、抗心律失常、提高機體的高溫耐受能力的作用。本次研究過程中，中藥組飛碟運動員未發生運動性中暑，而對照組中有5名運動員出現運動性中暑的癥狀，這一結果也表明加味生脈散對預防或延緩運動性中暑的發生有一定作用。因此，服用加味生脈散可為增強飛碟運動員熱適應水平、預防熱疾病、提高高溫下的運動能力提供參考。