新煙堿類殺蟲劑噻蟲胺對家蠶的毒性＊

楊一平，陳偉國，孫海燕，林蔚紅，戴建忠，錢秋杰

（海寧市經濟作物技術服務站，浙江 嘉興 314400）

噻蟲胺（clothianidin）是拜耳公司和日本Takeda（武田）公司共同開發的具有噻唑環的新煙堿類殺蟲劑，具有卓越的內吸和滲透作用，主要作用于煙堿乙酰膽堿受體（nAChR），是nAChR的激動劑，可以選擇性抑制昆蟲神經系統的nAChR，使ACh無法與AChR結合，進而阻斷昆蟲中樞神經系統信號的正常傳導，造成昆蟲麻痹而死亡。噻蟲胺與有機磷、氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類等殺蟲劑無交互抗性，是替代高毒有機磷農藥的又一品種。主要用于水稻、蔬菜、棉花、果樹及其他作物防治蚜蟲、薊馬、飛虱等半翅目、鞘翅目、雙翅目和某些鱗翅目類害蟲［1～3］。根據中國農藥信息網登記公告［4］，至2019年11月，噻蟲胺原藥登記11個，單劑登記52個，復配劑登記36個。僅2018年新增登記72個產品，表明噻蟲胺在國內登記呈迅速上升趨勢［5］。浙江省從2016年起推薦30%吡蚜·噻蟲胺懸浮劑用于防治水稻灰飛虱［6］。本試驗測定了30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的食下、熏蒸、內吸等多種毒性，為該藥在蠶桑地區的安全使用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試農藥

30%噻蟲胺懸浮劑，河北博嘉農業有限公司生產，農藥登記證號PD20170709；77.5%敵敵畏乳油，南通江山農藥化工股份有限公司生產，農藥登記證號PD85105-2。

1.1.2 供試家蠶品種

白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產。

1.1.3 供試桑園及桑樹品種

海寧市蠶桑技術服務站試驗桑園，育71-1，10年生，中干樹型養成，每667 m2桑園栽植1000株。

1.2 試驗方法

1.2.1 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的急性毒性測定

經預備試驗，將30%噻蟲胺懸浮劑按質量分數稀釋成5～7個濃度梯度，取適齡桑葉分別浸入不同濃度的稀釋藥液中1 min，取出后自然晾干，放置于保鮮盒內備用。每個濃度處理小區給入20頭3齡起蠶供試，以清水處理為空白對照，每個處理重復3次，在溫度（26.5±1.0）℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內飼養，24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續飼養至4齡起蠶，每天調查幼蟲中毒死亡率。采用DPS（15.10版）統計軟件對藥液質量濃度對數與幼蟲死亡率概率值進行線性回歸分析［7］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的熏蒸毒性測定

將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成100倍、1000倍和10000倍液（即噻蟲胺3000 mg/L、300 mg/L、30 mg/L），以77.5%敵敵畏乳油10000倍液（即敵敵畏77.5 mg/L）為農藥對照，以清水為空白對照，分別取配制好的各種農藥稀釋液1 mL均勻涂于直徑10 cm的培養皿內，把涂有農藥稀釋液的直徑10 cm的培養皿放入容積為60 L（高60 cm、直徑36 cm）的聚乙烯塑料桶底部，在距桶底40 cm高處放入裝有30頭2齡起蠶直徑10 cm的培養皿（不加蓋）進行熏蒸毒性試驗，并喂以新鮮無毒桑葉，每個處理重復3次。塑料桶用雙層蓋密封后放置于（30±1.0）℃的恒溫室內，熏蒸24 h后取出，調查中毒死亡蠶頭數，更換新鮮無毒桑葉后繼續飼養至4齡第1天結束，每24 h調查中毒死亡蠶頭數并計算中毒死亡率。

1.2.3 30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的內吸傳導毒性和殘毒期測定

（1）將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成1000倍、2000倍和4000倍液（即噻蟲胺300 mg/L、150 mg/L、75 mg/L）3種不同濃度的藥液備用。

（2）3種濃度處理各選定10株桑樹，在枝條頂端最大葉位處做好標記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉；每株供試桑樹中各選取1～2根枝條，上半部分用透明塑料袋暫時密封，將上述3種濃度藥液分別均勻噴灑于供試桑樹的桑葉正反葉面，不同處理間隔2行桑樹作保護行。待葉面的藥液略干后撕開套在枝條上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染。

（3）噴藥后間隔一定時間采摘處理桑葉飼養一批蠶，即3種濃度藥液直接噴灑、塑料袋內未直接噴藥的桑葉，以新鮮無毒桑葉為對照，共7個處理區，每個處理區30頭3齡起蠶，重復3次，每批蠶共21個飼養小區，飼養至4齡起蠶結束，逐日調查記載各處理區中毒死亡蠶頭數，計算中毒死亡率。

1.2.4 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的中毒癥狀觀察

將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成2000倍（150 mg/L），浸漬桑葉后晾干，飼喂3齡起蠶和5齡起蠶，觀察記錄家蠶中毒癥狀。

2 結果與分析

2.1 30%噻蟲胺懸浮劑對3齡家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定30%噻蟲胺懸浮劑對3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的毒力回歸方程為Y=8.0249+3.6235X，相 關 系 數 r=0.9830，LC50為0.1463mg/L，95%置信限為0.1317 mg/L～0.1617 mg/L。參照2014年發布的《化學農藥環境安全評價試驗準則第11部分：家蠶急性毒性試驗》附錄A“農藥對家蠶的毒性等級劃分”［8］，30%噻蟲胺懸浮劑對家的毒性等級為劇毒（LC50≤0.5 mg/L）。30%噻蟲胺懸浮劑防治稻飛虱推薦稀釋濃度為3000倍（100 mg/L）左右，與LC50的毒性比為683.53，對養蠶生產具有極高風險性［9］。

2.2 30%噻蟲胺懸浮劑對2齡家蠶的熏蒸毒性

30%噻蟲胺懸浮劑100倍、1000倍和10000倍3種稀釋藥液熏蒸處理2齡起蠶24 h后，繼續飼養至4齡第1天均無中毒癥狀和死亡蠶，發育進度與空白對照無差異；而對照農藥77.5%敵敵畏乳油10000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶，24 h內供試家蠶全部中毒死亡，表明30%噻蟲胺懸浮劑在試驗濃度下對家蠶無熏蒸毒性。

2.3 30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的殘毒期和內吸傳導毒性

由表1可見，30%噻蟲胺懸浮劑1000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，至噴藥后90 d采葉飼喂3齡起蠶，死亡率仍達100%；30%噻蟲胺懸浮劑2000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后50 d采葉飼喂3齡起蠶的死亡率100%，至噴藥后90 d的桑葉喂蠶死亡率下降到28.89%；30%噻蟲胺懸浮劑4000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后40 d內的桑葉喂蠶死亡率100%，噴藥后90 d的桑葉喂蠶死亡率下降到12.22%。結果表明，30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的殘毒期極長，3種供試濃度處理的桑葉在藥后90 d對3齡起蠶均有致死作用。

采摘枝條上部塑料袋內未直接噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶（表2），30%噻蟲胺懸浮劑1000倍處理區噴藥后50 d死亡率仍高達100%；30%噻蟲胺懸浮劑2000倍處理區噴藥后20 d死亡率100%，藥后40 d死亡率下降到24.44%，藥后50 d無死亡和中毒蠶；30%噻蟲胺懸浮劑4000倍處理區噴藥后1 d的桑葉未見中毒癥狀和死亡蠶，藥后5 d的死亡率20.00%，藥后10 d的死亡率5.56%，藥后20 d無死亡和中毒蠶。試驗結果表明噻蟲胺可以通過桑葉內吸并向上傳導，未噴藥桑葉及噴藥后新生長的桑葉也會帶毒，1000倍高濃度時表現的傳導毒性極強，殘留期很長；4000倍低濃度時，藥后1 d上部未噴藥的桑葉未見毒性表現，藥后5 d死亡率達到最高；說明內吸傳導毒性與施藥濃度相關，濃度越低，桑樹本身的生物稀釋效應越強，表現的毒性越小、毒性殘留時間越短。

2.4 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的中毒癥狀

30%噻蟲胺懸浮劑2000倍（150 mg/L）稀釋藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶，約30 min后停止食桑，胸部膨大明顯，吐液，側倒；約1 h后，腹部縮短縮小，抽搐顫動，尾部上翹呈“S”形；24 h左右死亡后仍保持“S”形。

飼喂5齡蠶約30 min，食桑減緩或停止，頭胸昂起搖擺，吐液；約1 h后，胸部膨大，吐液增多，亂爬翻滾，尾部上翹呈“S”形；約2 h后，胸部青色，吐液停止，側倒，間有扭動抽搐；24 h左右死亡。

3 小結

試驗結果表明：30%噻蟲胺懸浮劑對3齡起蠶的LC50為0.1463 mg/L，毒性等級為劇毒（LC50≤0.5 mg/L）：30%噻蟲胺懸浮劑防治稻飛虱推薦濃度（100 mg/L）與LC50的毒性比為683.53，對養蠶生產具有極高風險性。崔新倩等［10］測定1%噻蟲胺乳油對2齡起蠶的 LC50為 0.0651 mg/L，吳若函等［11］測定 30%吡蚜酮·噻蟲胺懸浮劑（吡蚜酮25%、噻蟲胺5%）對2齡起蠶的LC50為0.0033 mg/L，均表明噻蟲胺對家蠶的毒性極強。

30%噻蟲胺懸浮劑稀釋1000倍、2000倍和4000倍藥液噴灑桑葉，噴藥90 d后采葉飼喂3齡起蠶均有致死作用，表明噻蟲胺在桑葉上的毒性殘留時間極長。30%噻蟲胺懸浮劑稀釋100倍對2齡起蠶未見直接熏蒸毒性，但噻蟲胺可通過桑葉內吸并向上傳導，使枝條上部未噴藥的桑葉帶毒。噻蟲胺對家蠶的毒性反應很快，中毒癥狀主要表現為拒食，胸部膨大，吐液，身體縮短，呈“S”形等，與其他新煙堿類殺蟲劑的癥狀相似。因此，嚴禁在桑園中使用噻蟲胺及其復配制劑，桑園附近大田中必須使用時應注意風向、風力和間隔距離，并選用適宜的噴霧器械，防止藥液飄移到桑園而造成養蠶中毒損失。