乳糜血漿理化指標(biāo)質(zhì)量分析*

謝冬梅,黃勇華,劉運保,賴艷娥,喻紅玲,張杰嫦,虢 娟,張松英,廖麗梅,龔嘉聰,梁偉文,林雪珍,鄧凱航

清遠(yuǎn)市中心血站,廣東清遠(yuǎn) 511518

隨著人們生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的改變及餐后獻(xiàn)血等原因，血站采集的血液中乳糜血越來越多，中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB 18469《全血及成分血質(zhì)量要求》[1]對乳糜血漿制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，血站也是按此標(biāo)準(zhǔn)來篩選乳糜血。目前我國供血不足的問題日益嚴(yán)峻，為了合理地利用乳糜血漿，研究者對不同乳糜指數(shù)(CI)新鮮冰凍血漿質(zhì)量開展了研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 2019年1—6月取得獻(xiàn)血者知情同意，采集無償獻(xiàn)血者血液，采血后6 h以內(nèi)分離血漿，收集新鮮冰凍血漿160袋，其中無乳糜血漿(CI≤1)20袋，不同CI血漿(CI為2、3、4、5、6、8及CI>8)各20袋，1 h內(nèi)完成速凍，-18 ℃以下保存。

1.2儀器與試劑 CA-600全自動血凝儀由希森美康生物科技有限公司提供；CS-600B全自動生化分析儀由迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司提供；BD BACTEC FX40全自動細(xì)菌培養(yǎng)系統(tǒng)由碧迪醫(yī)療器械(上海)有限公司提供；SEPAMATIC-SL(Ⅲ)全自動血液成分分離機由德國普特公司提供；因子Ⅷ活性測定試劑盒(凝固法)由希森美康生物科技有限公司提供，批號547668B；纖維蛋白原(Fg)由希森美康生物科技有限公司提供，批號R8051；活化部分凝血活酶時間由希森美康生物科技有限公司提供，批號R8035；氯化鈣溶液由希森美康生物科技有限公司提供，批號R8026；緩沖液由希森美康生物科技有限公司提供，批號R8025；清洗液由希森美康生物科技有限公司提供，批號A8094；正常質(zhì)控血漿由希森美康生物科技有限公司提供，批號507753；異常質(zhì)控血漿由希森美康生物科技有限公司提供，批號556708C；血漿總蛋白(TP)試劑由迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司提供，批號20180418；標(biāo)準(zhǔn)需氧瓶由碧迪醫(yī)療器械(上海)有限公司提供，批號8360578，儀器經(jīng)檢定合格。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本處理 取出新鮮冰凍血漿37 ℃水浴復(fù)融，混勻使乳糜層均勻分布，于生物安全柜內(nèi)無菌操作，每袋抽取5 mL新鮮冰凍血漿接種至標(biāo)準(zhǔn)需氧瓶，同時進(jìn)行留樣，每袋留取2份標(biāo)本(每份2 mL)，一份用于血漿CI確定，另一份用于血漿凝血因子Ⅷ(FⅧ)、Fg、TP測定。

1.3.2檢測方法 采用CA-600全自動血凝儀凝固法檢測FⅧ、Fg(CI為4、5標(biāo)本用生理鹽水稀釋2倍、CI為6、8及CI>8標(biāo)本用生理鹽水稀釋4倍進(jìn)行檢測，以排除乳糜微粒的干擾)[2]；采用CS-600B全自動生化分析儀雙縮脲法檢測TP；采用BD BACTEC FX40全自動細(xì)菌培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。具體操作嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。

1.3.3血漿CI和乳糜程度確定 按照文獻(xiàn)[3]要求進(jìn)行操作，以血漿的稀釋倍數(shù)作為血漿CI，將乳糜程度定為無乳糜血漿(CI≤1)、輕度乳糜血漿(15)。

2 結(jié) 果

不同CI新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP、無菌試驗檢測結(jié)果顯示，CI為5的新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP檢測結(jié)果與無乳糜血漿比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=7.201、2.651、4.989，P<0.05)；CI為6的新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP檢測結(jié)果與無乳糜血漿比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=13.224、5.152、3.869，P<0.05)；CI為8的新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP檢測結(jié)果與無乳糜血漿比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=11.672、3.888、7.407，P<0.05)；CI>8的新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP檢測結(jié)果與無乳糜血漿比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=10.872、6.816、5.116，P<0.05)，見表1。

表1 不同CI新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP、無菌試驗檢測結(jié)果分析(n=20)

3 討 論

乳糜微粒是人血漿中最大的脂蛋白顆粒，主要來源于食物脂肪，由小腸黏膜細(xì)胞合成，是機體轉(zhuǎn)運膳食三酰甘油的主要形式，在腸黏膜細(xì)胞內(nèi)把體內(nèi)重新組裝的三酰甘油與載脂蛋白結(jié)合，合成乳糜微粒，乳糜微粒僅于餐后在血液中出現(xiàn)，約維持30 min即被肌肉和脂肪組織中的脂蛋白脂肪酶迅速降解為三酰甘油及乳糜微粒殘體，若因遺傳因素或機體缺乏脂蛋白脂肪酶或某種載脂蛋白，血中乳糜微粒的清除發(fā)生障礙，使血清中三酰甘油顯著升高，這種血清外觀呈乳糜狀，故通常稱乳糜血。

隨著人民生活水平的提高，無償獻(xiàn)血者中乳糜血人群比例很大，而乳糜濃度并不是獻(xiàn)血初篩項目之一，因此本站采集到的不同CI乳糜血也逐年上升。臨床上對乳糜血漿的使用顧慮有兩個方面，一方面是乳糜血漿的質(zhì)量與無乳糜血漿是否有區(qū)別，另一方面是乳糜血漿是否會引起輸血不良反應(yīng)。新鮮冰凍血漿適用于各種凝血因子缺乏引起的出血和需要補充血容量或血漿蛋白的疾病，如嚴(yán)重創(chuàng)傷、手術(shù)出血、大量輸血、血漿交換、體外循環(huán)、彌散性血管內(nèi)凝血、肝硬化、低蛋白血癥、新生兒溶血病、血栓性血小板減少性紫癜等,以往有研究報道輸血不良反應(yīng)的原因分為溶血性輸血反應(yīng)和非溶血性輸血反應(yīng)，其中以非溶血性發(fā)熱反應(yīng)和過敏反應(yīng)為最常見[4-12],但是這些輸血不良反應(yīng)均與乳糜微粒沒有直接關(guān)系。

為了利用好寶貴的血液，有學(xué)者探討低溫倒置離心法去除血漿中的乳糜微粒[13-14]，取得良好的效果。也有學(xué)者調(diào)研了乳糜血發(fā)生率在不同獻(xiàn)血人群的分布，指導(dǎo)血液機構(gòu)在招募獻(xiàn)血者時采取相應(yīng)對策，如征詢獻(xiàn)血者時認(rèn)真、詳細(xì)地詢問獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前飲食情況，做好招募前的宣傳及獻(xiàn)血前注意事項的告知工作，讓獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血前合理控制飲食等[15]。本研究對乳糜血漿本身的質(zhì)量進(jìn)行了研究，F(xiàn)Ⅷ、Fg、TP這3個指標(biāo)是評價血漿功效性的關(guān)鍵指標(biāo)，F(xiàn)Ⅷ、Fg主要用于出凝血疾病的止血；TP主要作用是營養(yǎng)功能、運輸功能、保持血液pH的穩(wěn)定、維持血漿膠體滲透壓、參與機體的免疫功能、參與凝血和抗凝血功能等。本研究結(jié)果顯示，CI為5、6、8及CI>8的新鮮冰凍血漿FⅧ、Fg、TP檢測結(jié)果與無乳糜血漿比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。文獻(xiàn)[1]對新鮮冰凍血漿要求是FⅧ≥0.7 IU/mL,TP≥50 g/L，無菌生長,對新鮮冰凍血漿Fg沒有做出要求。FⅧ、TP、無菌試驗在CI<5的均能達(dá)到文獻(xiàn)[1]要求。

綜上所述，CI<5的新鮮冰凍血漿質(zhì)量是有保證的，臨床上可以正常使用，本站按此標(biāo)準(zhǔn)供應(yīng)的血液，沒有收到任何關(guān)于乳糜血的投訴及因乳糜血引起的輸血不良反應(yīng)的反饋。血站應(yīng)把好乳糜血漿質(zhì)量關(guān)，采取有效方法對血漿CI做出準(zhǔn)確判斷，保證臨床用血的安全性、有效性。