某三甲醫院新生兒敗血癥患兒病原菌分布及耐藥性分析*

李雪琴,王曉玲,王 勤,王江濤△,谷惠茹,趙愛玲,郝小會

鄭州大學附屬兒童醫院/河南省兒童醫院/鄭州兒童醫院:1.小嬰兒科;2.醫院感染管理科,河南鄭州 450018

敗血癥是指血液或腦脊液等無菌腔隙培養出致病菌(包括細菌和真菌)引起的全身炎癥反應綜合征；新生兒敗血癥仍然是威脅新生兒生命的重大新生兒疾病。新生兒早發型敗血癥一般發病時間≤3日齡，新生兒晚發型敗血癥一般>3日齡[1]。本文對三甲醫院鄭州大學附屬兒童醫院新生兒診療中心收治的新生兒敗血癥患兒的血培養標本中分離出的575株陽性病原菌進行回顧性分析，了解本院新生兒敗血癥病原菌分布及耐藥情況，旨在指導臨床醫師用藥及加強醫院感染監控。多重耐藥菌(MDRO)主要是指對臨床使用的三類或三類以上抗菌藥物同時呈現耐藥的菌株[2]。本院新生兒診療中心按病情輕重及是否為早產兒分為3個病區，早產兒重癥監護病區(PIICU)收治各期早產包括大量長期機械通氣的新生兒；新生兒重癥監護病區(NICU)收治危重癥的足月新生兒包括機械通氣患兒；新生兒內科病區收治病情相對平穩的足月新生兒,無氣管插管機械通氣的患兒。本文對不同病區新生兒敗血癥病原菌分布及耐藥情況進行比較分析。

1 材料與方法

1.1標本來源 575株靜脈全血培養陽性病原菌來自2015年1月1日至2019年6月30日在本院新生兒診療中心住院的531例新生兒敗血癥患兒，其中44例患兒血培養檢測出2種病原體。同一患兒在同一住院期間分離的相同菌株不計入細菌總數。所有菌株均按常規方法進行細菌分離、培養及鑒定。病例納入標準：531例新生兒敗血癥患兒均符合新生兒敗血癥診斷標準，即具有臨床表現同時符合下列任一條：(1)血培養或無菌體腔內培養出致病菌；(2)如果血培養標本培養出條件致病菌，則需參考同一時間不同部位的另一份血培養結果[3]。

1.2方法 血培養：本次住院使用抗菌藥物之前抽取患兒兩個部位靜脈全血各3 mL分別加入BD BACTEC Peds Plus/F 需氧培養瓶，置于BD BACTEC FX血培養儀進行中培養，若為陽性則依照《全國臨床檢查操作規程》[4]采用德國bruker質譜儀進行細菌鑒定，藥敏試驗采用法國梅里埃公司生產的VITEK2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏分析系統和美國BD全自動細菌鑒定及藥敏分析系統，藥敏試驗采用最小抑菌濃度法,若培養5 d仍為陰性則報告陰性。

1.3結果判定 藥敏判定結果按照美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)推薦的當年最新版《抗微生物敏感性試驗的執行標準》要求進行。

1.4統計學處理 采用統計軟件SPSS22.0進行數據分析。計數資料采用率或百分比(%)進行統計描述,組間比較采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1血培養病原菌整體分布 2015年1月1日至2019年6月30日本院新生兒診療中心包括新生兒內科病區、NICU、PIICU 3個病區血培養共檢出陽性病原菌575株，PIICU 共檢出病原菌141株，NICU 共檢出病原菌246株，新生兒內科病區共檢出病原菌188株。新生兒早發型敗血癥84株，新生兒晚發型敗血癥491株。男女比例為1.6∶1.0。其中革蘭陽性(G+)菌21種、革蘭陰性(G-)菌21種、真菌6種。575株病原菌中以G+菌為主[55.1%(317/575)]，其次為G-菌[37.6%(216/575)]、真菌[7.3%(42/575)]；MDRO構成比為58.6%(337/575)。

2.2各病區血培養病原菌分布 本診療中心血培養排名前5位病原菌分別為表皮葡萄球菌149株(25.9%)，肺炎克雷伯菌103株(17.9%)，大腸埃希菌56株(9.7%)，溶血葡萄球菌36株(6.3%)，人葡萄球菌34株(5.9%)。PIICU血培養排名前3位的病原菌分別為肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、白假絲酵母菌，構成比分別為38.3%、14.9%、9.2%；NICU血培養排名前3位的病原菌分別為表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌，構成比分別為30.5%、12.6%、10.6%；新生兒內科病區血培養前3位的病原菌分別為表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，構成比分別為28.2%、14.4%、9.6%。

PIICU血培養病原菌分布依次為G-菌(48.2%)、G+菌(32.6%)、真菌(19.1%)；NICU血培養病原菌分布依次為 G+菌(60.6%)、G-菌(33.7%)、真菌(5.7%)；新生兒內科病區血培養病原菌分布依次為G+菌(64.9%)、G-菌(34.6%)、真菌(0.5%)；各病區中G+菌構成比新生兒內科最高、G-菌構成比PIICU最高、真菌構成比PIICU最高。各病區不同病原菌構成比比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.3各病區血培養MDRO重點菌、真菌分布及耐藥情況比較 本診療中心血培養共檢出MDRO 337株，耐藥率58.6%。本診療中心血培養排名前5位的MDRO重點菌分別為耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)113株(33.5%)、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)75株(22.3%)、產超廣譜-內酰胺酶(ESBLs)菌株67株(19.9%)、碳青霉烯類耐藥腸桿菌(CRE)58株(17.2%)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)11株(3.3%)。各病區血培養排名前5位的MDRO重點菌及真菌分布見表1，其中各病區血培養真菌42株，共6種，以白假絲酵母菌[45.2%(19/42)]為主，其次為白色念珠菌[21.4%(9/42)]。真菌藥敏結果為兩性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑均未發現耐藥菌株。

表1 各病區血培養排名前5位的MDRO重點菌及真菌分布[n(%)]

各病區血培養排名前5位的MDRO不同菌株及耐藥率結果分別為表皮葡萄球菌113株，耐藥率75.8%、肺炎克雷伯菌91株，耐藥率88.4%、大腸埃希菌30株，耐藥率53.6%、溶血葡萄球菌29株，耐藥率80.6%、人葡萄球菌28株，耐藥率82.4%。3個病區血培養G+菌、G-菌對常用抗菌藥物的耐藥情況見表2。

表2 3個病區血培養G+菌、G-菌對常用抗菌藥物的耐藥情況[%(n/n)]

3 討 論

本研究 PIICU、NICU、新生兒內科病區共收集到血培養陽性病原菌共575株，本診療中心血培養排名前5位病原菌分別為表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌，與文獻[1,5]研究結果基本相符。考慮與本院新生兒晚發型敗血癥占比較高有關。

575株血培養陽性病原菌中以G+菌為主，與文獻[6-7]報道結果相符，本研究G+菌構成比55.1%(317/575)、G-構成比37.6%(216/575)、真菌構成比7.3%(42/575),與文獻[8]病原菌構成比有所不同。

PIICU血培養排名前3位病原菌分別為肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、白假絲酵母菌；NICU血培養排名前3位病原菌分別為表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌；新生兒內科病區血培養排名前3位病原菌分別為表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，與文獻[9-11]報道結果不完全相符。本院PIICU血培養病原菌以G-菌為主，但NICU及新生兒內科病區以G+菌為主。考慮與患兒是否早產、是否為危重癥患兒、是否行機械通氣及住院時間長短有關。

本研究新生兒診療中心血培養排名前5位的MDRO病原菌分別為表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌。PIICU以肺炎克雷伯菌主，NICU及新生兒內科以表皮葡萄球菌為主，與文獻[12-13]報道結果相似。本診療中心血培養排名前5位的MDRO重點菌分別為MRSE、MRCNS、ESBLs、CRE、MRSA。研究顯示，PIICU血培養真菌及CRE構成比明顯高于其他兩個病區，考慮與早產兒抵抗力低，大量患兒長期機械通氣，長期應用多種抗菌藥物有關[14-15]。

GAO等[16]報道我國華南地區新生兒敗血癥的病原菌構成比排名前4位分別為G-菌、G+菌、真菌及B族無乳鏈球菌，與本院研究結果不一致，考慮本院為非綜合性醫院，醫院內無產科，患兒主要由醫聯體單位轉診為主，新生兒早發型敗血癥患兒數量遠遠少于新生兒晚發型敗血癥患兒有關。

本院PIICU血培養真菌構成比明顯高于其他兩個病區，與成大欣等[12]報道結果相符，考慮與早產兒住院周期長，侵入性操作多，以及抗菌藥物使用時間長有關，應引起醫務人員的關注。本中心血培養檢出的病原菌大多數是條件致病菌，考慮原因為近年來大量廣譜抗菌藥物的廣泛使用，使患者體內正常菌群失調，不斷誘發二重感染，加劇了細菌耐藥性的傳播，甚至出現了許多MDRO及泛耐藥菌株。有研究顯示益生菌在控制遲發性敗血癥方面有益處[17]。醫務人員詳細了解本院病原菌的分布特征，對指導臨床合理用藥起著重要作用。

綜上所述，鄭州大學附屬兒童醫院新生兒診療中心血培養病原菌總體以G+菌為主，各病區的構成比有所不同，對常用抗菌藥物耐藥率較高。加強對血培養病原菌及MDRO監測，對指導新生兒敗血癥臨床合理用藥，降低病死率，提高治愈率具有重要意義。