脂聯素和骨鈣素在子宮內膜組織中表達及其臨床意義*

顧佳士，葉慧英，戴海燕，朱建龍，郭麗梅

上海市浦東醫院/復旦大學附屬浦東醫院：1.婦產科；2.病理科,上海 201399

子宮內膜癌是指原發于子宮內膜的一組上皮性惡性腫瘤，是女性生殖道三大惡性腫瘤之一[1]。肥胖和胰島素抵抗是子宮內膜癌發生、發展的高危因素[2]。脂聯素為脂肪因子，與肥胖、高血壓、糖尿病等多種臨床疾病相關，且被證實參與多種婦科腫瘤的發生、發展[3]。另有研究證實，骨鈣素可通過促進脂聯素的分泌從而增強胰島素基因蛋白表達并改善胰島素的敏感性，參與調節能量代謝[4]。本研究通過檢測子宮內膜癌組織中脂聯素和骨鈣素的表達情況，探討其與子宮內膜癌之間的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2019年1月上海市浦東醫院收治的40例子宮內膜癌患者作為內膜癌組，年齡為42～75歲，平均(55.23±5.74)歲。另選取同期在本院確診為子宮內膜不典型增生的30例患者作為增生內膜組，年齡為40～63歲，平均(57.23±3.25)歲；以及選取同期因子宮肌瘤在本院行全子宮切除術且術后診斷為正常子宮增殖期內膜的30例患者作為正常內膜組，年齡為50～69歲，平均(58.43±8.21)歲。所有患者均不合并其他惡性腫瘤、糖尿病、高血壓及代謝性疾病，術前也均未接受放、化療及內分泌方面治療。所有標本均經甲醛固定，石蠟包埋并經過兩名以上病理科醫生復診確認，本研究經過醫院倫理委員會的批準，患者均知情同意。

1.2方法

1.2.1免疫組化染色 將標本蠟塊切片，厚4 μm，脫蠟、水化，抗原熱修復，阻斷內源性過氧化物酶，滴加一抗和二抗，行PV-6000免疫組化染色。脂聯素和骨鈣素兔抗人多克隆抗體及SP試劑盒均購自上海容成生物技術有限公司。

1.2.2免疫組化結果判定 脂聯素和骨鈣素的細胞質或細胞膜被染成黃色即判定為陽性細胞。技術方法采用半定量法。在高倍光鏡(200倍)下隨機選取5個視野，計算每個視野的陽性細胞所占百分比、染色強度并進行評分，如果染色強度評分與陽性細胞所占百分比評分之積≥3分即為免疫反應陽性，<3分即為免疫反應陰性[5]。

1.3統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗，相關性分析采用線性回歸分析。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1各組脂聯素及骨鈣素陽性表達率比較 正常內膜組、增生內膜組和內膜癌組脂聯素和骨鈣素陽性表達率逐漸降低，差異有統計學意義(P<0.05)。內膜癌組與增生內膜組脂聯素和骨鈣素陽性表達率比較，差異有統計學意義(P<0.05)；正常內膜組與增生內膜組脂聯素和骨鈣素陽性表達率比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組的脂聯素及骨鈣素陽性表達率比較[n(%)]

2.2內膜癌組脂聯素和骨鈣素的表達與臨床病理參數之間的關系 內膜癌組脂聯素的表達與腫瘤病理類型、臨床分期、淋巴結轉移及肌層浸潤深度無關(r=0.014、0.002、0.172、0.032，P>0.05)。內膜癌組骨鈣素的表達和腫瘤病理類型相關(r=0.455，P<0.05)，但與腫瘤的臨床分期、淋巴結轉移及肌層浸潤深度無關(r=0.153、0.024、0.051,P>0.05)。見表2。

表2 內膜癌組脂聯素和骨鈣素的表達與臨床病理參數之間的關系(n)

2.3內膜癌組脂聯素與骨鈣素的相關性 內膜癌組脂聯素的表達水平與骨鈣素的表達水平呈正相關(r=0.307,P<0.05)。

3 討 論

脂聯素是由內臟脂肪分泌的一種脂肪細胞因子。人脂聯素的基因全長16 kbp,包含了3個外顯子和2個內含子，定位于3q27染色體[6]。有研究表明，脂聯素除了由脂肪細胞分泌，多種細胞如肝細胞、骨骼細胞、胎盤組織等也分泌少量的脂聯素，低水平的脂聯素與肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗和子宮內膜癌的發生密切相關[7]。MA等[8]研究表明，在調整年齡、體質量指數、血糖水平等相關影響因素后，低水平的血清脂聯素是子宮內膜癌發生的獨立危險因素。有研究發現，脂聯素主要與脂聯素受體結合，從而激活了磷酸腺苷活化蛋白激酶，抑制子宮內膜癌細胞增殖，導致癌變[9-10]。本研究內膜癌組脂聯素陽性表達率明顯低于正常內膜組，差異有統計學意義(P<0.05)，說明脂聯素參與了子宮內膜癌的發生和發展，與文獻[7-8]研究結果一致。脂聯素與子宮內膜癌的分化、分期、淋巴結轉移及肌層浸潤深度的關系目前尚無統一結論。有研究表明，脂聯素與腫瘤的分化程度有關，分化程度越低，脂聯素水平越低[11]，而王文文等[12]研究表明，子宮內膜癌組織中脂聯素的表達與臨床分期和肌層浸潤深度等均無關。本研究未發現子宮內膜癌組織中脂聯素的表達和病理類型、臨床分期、淋巴結轉移和肌層浸潤深度相關。

骨鈣素是成熟成骨細胞合成和分泌的一種特異的非膠原骨基質蛋白。有研究表明，當骨鈣素缺乏時可導致胰島素分泌減少、胰島素敏感性降低、葡萄糖耐量異常及脂聯素的表達降低，進而導致能量代謝的異常[13]。已有多項研究證實，骨鈣素和腫瘤的發生、發展具有一定的相關性。LIU等[14]研究顯示血清骨鈣素水平與肝癌病情嚴重程度呈負相關。有研究顯示，腫瘤組織中骨鈣素的免疫組化測定有助于提高惡性腫瘤的診斷敏感性[15-16]。本研究內膜癌組骨鈣素陽性表達率低于增生內膜組和正常內膜組，差異有統計學意義(P<0.05)，說明骨鈣素和子宮內膜癌的發生有關。本研究顯示，骨鈣素的表達與臨床分期、淋巴結轉移和肌層浸潤深度無關，但與子宮內膜內膜樣腺癌有關，這進一步說明骨鈣素和糖代謝異常、胰島素抵抗導致的Ⅰ型雌激素依賴型子宮內膜癌密切相關。王計艷等[17]研究顯示在2型糖尿病患者血清中骨鈣素和脂聯素的表達呈正相關。另外有研究發現，骨鈣素可以通過下調CD68和單核細胞趨化蛋白1表達，抑制肥胖小鼠脂肪組織巨噬細胞聚集及單核細胞趨化蛋白1分泌,以及通過降低小鼠體質量和體內脂肪水平使胰島素敏感性增強[18]。本研究結果顯示，內膜癌組脂聯素的表達水平與骨鈣素的表達水平呈正相關(r=0.307，P<0.05)，推測骨鈣素可通過脂聯素介導能量代謝的途徑作用于內膜組織，骨鈣素也可以通過直接作用于子宮內膜組織從而導致病變的發生。

總之，脂聯素、骨鈣素的表達在子宮內膜癌的發生和發展過程中起到重要作用，二者聯合檢測可為子宮內膜癌的早期診斷、治療和預后提供新的思路。