母牛早期妊娠診斷技術

岳立 李秀菊 吳風光

（山東省菏澤市食品藥品檢驗檢測研究院 274032）

妊娠診斷的方法很多，20 世紀70 年代開始，就有學者研究出RIA 法，這種方法可以檢測母牛血液或乳汁中的P4 含量，而P4 含量可以直接反應母牛是否懷孕。隨著技術的不斷革新，后來又先后出現了EIA 法、多普勒法、EPF 法等方法可以用于早期妊娠診斷，但都由于價格昂貴、檢測手段受限等原因沒有推廣，臨床上也很難應用。但母牛早期妊娠診斷技術并沒有從此停滯不前，而是繼續向快速、便捷、造價低的方向發展[1]。

1 臨床診斷法

1.1 外部觀察法

適齡母牛配種成功后在下一個發情期不再發情，食欲和飲欲均有明顯提高，被毛光亮，性格變得溫順，不再出現追逐、打架的情況。妊娠5 個月可以看到懷孕母牛的腹圍增大，8 個月可以觀察到胎動。外部觀察法僅在懷孕中后期較為實用，基本不能作為早期妊娠診斷的方法。

1.2 直腸檢查法

直腸檢查法在大型牲畜臨床診斷中起重要作用，這種方法需要操作人員將手及手臂伸入母牛直腸內，通過觸診來確定卵巢、子宮及胎兒的情況。懷孕初期一側卵巢會明顯增大，且能在卵巢上觸診到黃體，子宮角基本無變化，但可以感覺到子宮壁變厚。隨著妊娠時間的延長，觸診可見兩側子宮角有一側變粗、變軟。懷孕3 個月后子宮角間溝被填平，子宮內有液體波動感，有時能觸到胎兒。直腸檢查法是較為經濟的妊娠診斷方法，但對操作人員要求較高，沒有經驗的獸醫較難掌握。

1.3 陰道檢查法

妊娠一個月后的母牛可以應用陰道檢查法進行檢查，可以觀察到陰道和子宮頸的顏色變得蒼白，子宮頸口向一側偏移，陰道黏膜干燥。這種方法雖然有一定的參考價值，但確診準確率較低。

1.4 超聲波檢查法

常用于妊娠診斷的超聲波檢查包括：A 超、B 超和D 超3種，A 超是將探頭插入陰道穹隆，而后進行檢查的一種方法，這種方法在配種后18d 就可以檢測出是否妊娠。B 超則是將探頭抵在皮膚上就可以進行檢查，最早可以對配種后30d 的母牛進行檢測。D 超是通過將血流信號變為聲音信號的一種檢查方式，一般在母牛配種后20d 就可以進行妊娠早期診斷[2]。A 超和D 超都需要操作人員將手伸入母牛體內，雖然D 超的準確性很好，但儀器設備相對昂貴，推廣起來有一定困難。常規B 超對妊娠30d 以內的母牛基本沒有辦法進行妊娠診斷，目前有實施B 超的方法最早可以檢測妊娠26d 的母牛，確診準確率可達88.9%[3]。

2 免疫學診斷法

懷孕母牛體內的早期妊娠因子、孕馬血清促性腺激素、黃體酮、硫酸雌酮等物質的含量會與未妊娠的母牛有顯著差異，且這些因子十分敏感，是母牛早期妊娠診斷的主要指標。早期妊娠因子在母牛開始妊娠后24h 就可以在血清或乳汁中被檢測出來，常用的檢測方法有3 種，分別是硫酸銅法、玫瑰花環抑制試驗及ELISA 法，硫酸銅能凝集早期妊娠因子，所以將待檢測牛的乳汁滴入3%的硫酸銅溶液中，如果待檢測牛的乳汁顏色呈現云霧狀該牛只已懷孕，這種方法的確診準確率為98%。玫瑰花環抑制試驗是將母牛T 淋巴細胞與其他動物的紅細胞混合后會呈現玫瑰花環形，如果玫瑰花環抑制滴度增加則證明待檢測牛為妊娠牛。ELISA 法目前沒有商品化的試劑盒可供使用，所以應用不多。

黃體酮檢測可以依靠RIA 法、ELISA 法、膠體金雙抗夾心法、PLAIT 法等進行檢測，其中PLAIT 法因其造價低、操作簡單等優勢在臨床上經常應用。

3 小結

目前雖然已經建立了較多的母牛早期妊娠診斷方法，但在規模化養殖場上的應用尚存在一定困難，直腸檢查法作為最簡便、經濟的方法，在臨床上應用最為廣泛，但對于妊娠早期診斷仍不能很好地完成，且對妊娠母牛進行直腸檢查容易因操作不當造成流產，帶來較大損失。雖然免疫學診斷法的早期妊娠診斷的準確性很高，但對儀器設備的要求較高，且成本不低。所以，在母牛早期妊娠診斷這一領域仍需要廣大畜牧獸醫工作者共同努力。