羊痘的診斷與防控

王 娜 ，蘇勝杰 ，戴伶俐 ，宋 越 ，張 帆 ，張月梅 ，趙世華 ，劉 威 ＊

（1.內蒙古自治區農牧業科學院，內蒙古 呼和浩特 010020；2.內蒙古自治區動物疫病預防控制中心，內蒙古呼和浩特 010010）

1 發病機理

羊痘病毒經呼吸道、消化道、皮膚、黏膜侵入羊的血液中，隨后擴散至全身，導致出現高熱癥狀。部分羊會出現丘疹和膿皰，丘疹和膿皰破潰后立刻結痂。以上過程易引發感染，致使羊的肺部和呼吸道阻塞，死亡率明顯上升[3]。

2 病因分析

2.1 管理不當

養殖過程中羊舍密度大、通風差，造成有害氣體聚集。飼料營養不均衡，致使羊只體弱、抵抗力下降。對糞便、垃圾未定期清理，導致滋生大量的細菌和病毒，造成羊痘的傳播和蔓延[4]。

2.2 季節因素

通常不同季節羊痘的發病率各有不同，冬末春初天氣寒冷干燥，羊群抵抗力下降，適宜病毒生存，是該病的高發期。夏季和秋季光照充足，可以殺滅病毒，使發病率顯著降低[4]。

2.3 免疫操作不當

接種疫苗是預防該病的有效措施，但疫苗在儲存和運輸過程中的溫度直接影響免疫效果，不適宜的溫度將會導致疫苗的效力下降甚至失效。養殖人員在免疫期間未按說明嚴格操作，也會降低疫苗免疫效果[4]。

2.4 生物安全性不良

寄生蟲是該病的重要傳染源，如果養殖人員未定期對羊舍進行消毒，使羊體內寄生蟲清理不徹底，在外因與內因的作用下，病毒便可在羊群中大范圍傳播。養殖人員未經培訓，缺乏科學的養殖方法，能夠造成病毒大量繁殖，導致該病的傳播[4]。

3 病原學

3.1 病毒分類

病原主要包括綿羊痘病毒（SPPV）和山羊痘病毒(GTPV),二者均屬于痘病毒科、脊索動物痘病毒亞科、羊痘病毒屬[5]。

3.2 病毒特性

羊痘病毒核酸為線性雙股DNA，基因組全長約為150 kb，有147個開放閱讀框，病毒顆粒形態一般為卵圓形或磚形，大小為167×92 nm。使用Paschen氏等特殊染色法著染病料或切片，易看到原生小體，其表面有短管狀覆蓋物，核心凹陷成盤狀，具有囊膜，可以在細胞的胞漿內復制病毒，并形成包涵體[5-6]。

1.1一般資料2013年6月至2014年6月我院對106例子宮內病變患者開展了分析研究,患者最小22歲,最大56歲,平均39歲,有12例病程1年以上,38例半年至一年,56例半年以內。

3.3 病毒理化特性

羊痘病毒在干燥寒冷的條件下抵抗能力較強，在干燥環境中能存活42～56 d，在低溫陰暗處可存活2年以上，凍干后至少能儲存3個月，在羊毛、痂皮中可存活2個月。但是該病毒對高溫、直射陽光和紫外線敏感，通常在50℃以上條件下迅速死亡。該病毒對常用消毒劑也較為敏感，如2%甲醛、3%石碳酸、2%福爾馬林以及碘酊等[6-7]。

4 流行病學

4.1 傳染源

病羊的分泌物、膿液、結痂后脫落的組織中均含有大量的病毒顆粒，成為痘病的主要傳染源[8]。

4.2 傳播途徑

主要通過呼吸道和消化道傳播，其次是破損的皮膚黏膜。此外被污染的墊料、飼料、喂食用具、飲用水、隱性感染羊、體外寄生蟲也是該病的傳播媒介。節肢動物亦可傳播該病[8]。

4.3 易感動物

不同品種、不同年齡、不同性別的羊均能感染該病。一般情況下，SPPV主要感染綿羊，細毛羊最易感，其次是羔羊、成年羊，妊娠母羊感染后易引發流產。易感羊群的發病率高達75%，且病死率為10%～58%。GTPV主要感染山羊，也有感染綿羊的報道。野兔、馴鹿也易感[5-6]。

4.4 流行特征

該病在眾多國家流行，尤以北非、印度次大陸、西南亞為甚，在養羊地區多呈地方性流行[9-11]。該病一年四季均可發生，但在冬末春初多發。其特點是首先發生于個別免疫力低下的羊只，隨后逐漸蔓延至全群[6]。

4.5 潛伏期

綿羊痘的潛伏期為4～8 d,山羊痘的潛伏期為5～14 d。

5 臨床癥狀

羊痘包括綿羊痘和山羊痘。綿羊痘只感染綿羊，具有典型的臨床癥狀；山羊痘多感染山羊，臨床癥狀類似于綿羊痘，但癥狀較輕。

5.1 綿羊痘的臨床癥狀

病羊體溫急劇上升，可達到41～42℃。呼吸急促，精神沉郁，食欲不振，眼結膜潮紅，鼻腔流出漿性、黏性或膿性分泌物。以上病癥持續1～2 d后，全身少毛或無毛處都可能長出痘疹，如眼、唇、鼻、尾根、乳房等部位。痘疹最初為紅斑，之后突出于皮膚表面形成丘疹且不斷變大，呈灰白色或淡紅色結節狀，逐漸變為水皰，其內容物變成膿性。膿皰破裂后，如不發生繼發感染，則干燥后形成痂塊，自然脫落并出現紅色的斑塊，之后逐漸變淡直至痊愈。此外，部分病羊可能會發生融合痘、出血痘、石痘、壞疽痘等[12]。

5.2 山羊痘的臨床癥狀

病羊體溫急劇上升，可達40～42℃。食欲不振，嚴重者拒食，精神萎靡，屈身拱背、身體發抖，部分伏臥，鼻孔閉塞，呼吸急促，伴有咳嗽，驅趕時發出慘叫聲。四肢內側、尾根、口、鼻、乳房、肛門等部位常感染羊痘病毒，頭部、腹部偶爾出現感染。感染初期會出現大小不一的痘疹，為圓形的紅色結節，2 d后變為淡紅色丘疹，后期形成水皰、膿包及痂皮，通常3～4周痂皮自然脫落。臨床案例表明，山羊痘也可以使其他部位（消化道、呼吸道、骨關節）出現炎癥，嚴重者還會導致膿毒敗血癥。幼羊常發生感染，經剖檢后可見氣管、肺、腎等部位有典型性痘疹[12-13]。

6 剖解病變

6.1 綿羊痘的剖解病變

病羊頭部腫脹，并有大小不一的結節，在皮膚外表有大量的形狀各異的痘疹，其中尾腹面最多，通常為紐扣大小的白色圓形的痘疹。肺和氣管有出血性病變，肺腫大。心臟腫大，心耳有小出血點。小腸黏膜充血，部分出血，腸系膜淋巴結腫大。瘤胃壁和腎臟存在大小不一的乳白色斑點，內含少量白色溶液[14]。

6.2 山羊痘的剖解病變

病羊的呼吸道有出血性炎癥，鼻、口、咽、氣管等器官的黏膜上有大量的痘瘡。前胃、第四胃黏膜上可見堅硬的圓形結節。肝臟表面也存在灰色結節，結節周圍出血。肺部存在大理石樣結節，并有卡他性肺炎區。腎臟內外可見白色點狀結節。肝臟與膽囊的交界處有紅色斑塊。心臟包膜變厚，并有大量積液。病變組織與正常組織之間存在明顯的界線[15]。

7 診斷

7.1 常規診斷

根據羊痘病的臨床癥狀、流行病學及剖解病變可做出初步診斷，對非典型病例還需進行實驗室診斷[16]。

7.2 實驗室診斷

7.2.1 樣本采集。采集病料樣品的最佳時間為病羊出現臨床癥狀后的1周之內。采集病羊皮膚和黏膜上的水皰或丘疹用于病原的分離培養。發熱期血液、肺部病變組織及淋巴結可作為病料，但用于組織學檢測的樣品應包括病變周圍組織。采集后需立即置于10倍體積的10%的甲醛溶液中。

7.2.2 病毒分離培養。將水皰或丘疹接種于原代或者次代羔羊腎細胞和睪丸細胞，每天觀察培養瓶是否出現細胞病變，持續14 d。培養3～5 d后仍未出現病變，需盲傳3～5代，如產生病變或胞漿內存在包涵體，表明水皰或丘疹中存在羊痘病毒[5]。

7.2.3 血清學檢測。酶聯免疫吸附（ELISA）、病毒中和、瓊脂凝膠免疫擴散、重組核蛋白間接 ELISA、競爭性ELISA和對流免疫電泳是血清學診斷的常用方法。在實際檢測中，ELISA方法因簡便快捷，故最為常用[16]。

7.2.4 分子生物學檢測。通過PCR檢測皮膚組織和細胞培養物中的病毒基因，根據產物的特征，進行分子生物學檢測診斷。張志成[17]等根據羊痘病毒的全基因序列，設計合成特異性引物，建立了PCR檢測方法，并研制了羊痘病毒PCR診斷試劑盒，該試劑盒特異性好、靈敏度高，可以用于臨床診斷。王鋆[18]利用綿羊痘病毒P32基因建立了PCR檢測方法。楊俊等人利用SPPV和GTPV基因建立了實時熒光RPA檢測方法，該法特異性好、靈敏度高，能為羊痘的早期診斷提供依據。

8 預防措施

8.1 加強飼養及環境衛生管理

養殖場宜建在多水多樹的地方，盡量遠離傳染源。養殖場還應制定衛生消毒制度，定期使用不同的消毒液對養殖場進行消毒。及時清理垃圾及糞便，并按時通風換氣。堅持自繁自育，防止外來病原侵入。綿羊和山羊應分舍飼養，避免交叉感染。如果養殖場出現羊痘病，應嚴格消毒，避免造成飼料、墊料、飲用水的二次污染[19]。

應選擇優質的草料和干凈的飲用水，最好用豆科牧草和禾本科牧草混合飼喂，并添加適量的微量元素及維生素，確保羊只每日攝入充足的營養物質[19]。

8.2 規范引種檢疫工作

如需引種，應將所有引入羊只隔離飼養30 d，在確定無陽性者后方可混入大群飼養。一旦發現病羊，應立即撲殺，并進行無害化處理[13，20]。

8.3 加強疫苗接種工作

接種疫苗是防治羊痘行之有效的方法。首先，養殖場應制定免疫計劃，即每年春秋季節給所有羊只定期接種羊痘疫苗，羔羊斷奶后應進行加免，配種前15 d亦需再次接種疫苗。其次，應按照說明嚴格操作，保證方法、劑量、注射部位精準[5，21]。

8.4 疫情處置

羊痘是國家Ⅰ類動物疫病，該病沒有特效藥物，發病后不需治療。確診后應立即向當地政府上報病情，由當地政府和動物防疫部門封鎖隔離養殖場，并將確診的病羊撲殺，進行無害化處理。在對被病羊污染的墊料、飼料等污染物進行徹底清理后，必須進行無害化處理。隔離封鎖期間，禁止隨意買賣或移動羊只，對進出疫區的車輛和人員需進行檢疫和消毒。最后一只羊死亡或被撲殺后，間隔21 d未出現新的病例，方可在嚴格消毒和檢疫后解除封鎖[22-24]。