HBV-DNA熒光定量PCR檢測的臨床意義分析

王修梅，蘭興翠，朱浩

（貴州省黔西南布依族苗族自治州人民醫(yī)院，貴州 黔西南 562400）

乙型肝炎病毒（HBV-DNA）定量檢測有利于對于肝臟內(nèi)乙肝病毒復制程度進行反映，也可體現(xiàn)抗病毒藥物治療的臨床效果。熒光定量PCR檢測逐漸成為乙肝病毒復制進行檢測的常見措施，可最大程度體現(xiàn)慢性乙肝患者病理學分級效能以及肝組織病理情況[1]。本文主要闡述了2017年7月-2018年7月期間收治的25例乙型肝炎病毒（HBVDNA）患者，分析熒光定量PCR檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 基礎資料 回顧性分析2017年7月-2018年7月期間收治的25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者的基礎信息，女性樣本13例，男性樣本12例，最大年齡36歲，最小年齡12歲，中位年齡（22.32±2.32）歲。

1.2 方法 實驗儀器主要涵蓋實驗儀器與參比儀器，參比儀器即為Cobas z 480熒光定量PCR檢測儀器，該儀器獲得的臨床檢驗結果即為參比值，實驗儀器即為DA7600熒光定量PCR檢測儀器，依據(jù)儀器使用說明書對兩種儀器進行操作，確保存在有效且可靠的實驗數(shù)據(jù)。選取達安公司研發(fā)且提供的HBT核酸定量檢測試劑盒進行處理，采集患者5 mL清晨空腹狀態(tài)下靜脈血液進行檢查，溶血標本以及含脂肪標本最高濃度即為1.0×108U/mL，最低濃度即為5.0×102U/mL，遵守試劑相關說明書對HBV-DNA核酸進行提取開展定量檢測，同時在且分別在Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器以及ABI7500熒光定量PCR檢測儀器實施雙孔平行檢測，依據(jù)循序?qū)?5例乙型肝炎病毒（HBVDNA）患者實施測量，完成第一次檢查之后間隔2 h實施定第二次檢查，取兩次平均值。

1.3 觀察指標 相對偏倚即為實驗值和參比值之差比上參比值×100%，基于ISO15189規(guī)范中要求臨床基因擴增檢驗內(nèi)檢測系統(tǒng)和要求時系統(tǒng)誤差之比的絕對值低于7.5%。

1.4 統(tǒng)計學方法 本次通過SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對本院參與診治的25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，X值即為參比儀器檢測結果，Y值即為實驗儀器檢驗結果，予以回歸方程分析，Y=rX+b，開展t檢驗，P＜0.05，統(tǒng)計學有顯著差異。

2 結果

2.1 分析對25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者實施兩種儀器檢測的情況 分析兩種儀器兩次平均檢測結果相關性，均＞0.976，表示儀器、儀器濃度范圍比較適合，不同濃度存在不同的回歸方程，表示兩臺儀器熒光定量PCR檢測均符合線性要求符合。檢測濃度為5.0×102-1×104U/mL，顯性方程即為0.997X-0.0055，r2=0.995；檢測濃度為1×105-1×106U/mL，顯性方程即為0.993X-0.0063，r2=0.991；檢測濃度為1×107-1×108U/mL，顯性方程即為0.995X-0.0084，r2=0.991。

2.2 分析兩臺儀器檢測25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者的相對偏倚 本文涉及的ABI7500熒光定量PCR檢測儀器和Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器檢測結果偏倚百分比即為3.21，均小于7.5%，表示兩儀器存在一致性的較好定量檢測結果，存在處于臨床能接受范圍內(nèi)的系統(tǒng)誤差。

3 討論

如不能對乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者進行正規(guī)治療，十分容易產(chǎn)生肝硬化、肝炎，嚴重的可能發(fā)生肝癌[2]，針對乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者需要定量檢查HBVDNA，有利于準確診斷和評估病情，對于提升治療效果十分有利。臨床上HBV-DNA檢查方法主要即為熒光定量PCR檢測[3-4]，隨著近年來醫(yī)學技術的不斷進步，熒光定量PCR檢測技術逐漸完善，出現(xiàn)多種多樣的儀器設備[5]。

綜合以上結論，HBV-DNA中Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器和ABI7500熒光定量PCR檢測儀器的一致性較好，適合進行聯(lián)合使用。