2016—2019年貴州重要豬源病毒性疫病流行病學調查

趙新霞　陳雙慶

摘要：為了解貴州省豬場主要病毒性疫病的流行情況，運用熒光PCR方法對2016年1月至2019年12月收集的1 679 份無害化處理廠的樣品進行豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環病毒2型（PCV2）、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬細小病毒（PPV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）共7種病原樣品檢測，結果表明，CSFV、PRRSV、PCV2、PRV、PPV、TGEV、PEDV的陽性率分別為1.32%、20.65%、20.43%、21.91%、2.25%、4.60%、3.99%;PCV2+PPV、PCV2+PRV、PPV+PRV、TGEV+PEDV病原混合感染率為5.24%、6.44%、8.95%、3.38%;3種病原PCV2+PPV+PRV混合感染率為2.62%;這7種疫病在不同的季節感染率差異均顯著（P<0.05），不同疫病的陽性率在同一季上差異均顯著（P<0.05）。按照不同病種間平均陽性率進行統計分析，除了豬偽狂犬病和流行性腹瀉病的陽性率差異顯著之外（P<0.05），其他病種間的差異不顯著（P>0.05）。從調查結果可以看出，貴州省規模化豬場重要疫病中，以圓環2型的感染最為嚴重，其次是藍耳病和偽狂犬病，并伴有2種以上病原混合感染的現象存在，因此，下一步應加強動物疫病監測和防控工作。

關鍵詞：貴州;流行病學;豬;檢測;病毒

中圖分類號：S858.28?? 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2020）19-0177-04

收稿日期：2020-07-16

基金項目：2019年度六盤水師范學院高層次人才科研啟動基金（編號：LPSSYKYJJ201903）。

作者簡介：趙新霞（1988—），女，河南周口人，博士，主要從事動物遺傳育種與繁殖。E-mail：1327372534@qq.com。

我國是世界上養豬業比較發達的大國，目前我國豬肉供應在全球豬肉供應鏈當中成為重要組成部分[1]。當前，隨著豬病病原的不斷發展和變異、境內境外貿易交流頻繁，我國養豬場的豬源病毒性疾病由單一性和地方小流行，逐漸發展為多樣性和地方流行、大流行，乃至全國性的暴發[2-3]。豬瘟病毒、豬圓環病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬細小病毒、豬口蹄疫病毒、豬偽狂犬病毒等常見的豬源型病毒仍是危害養豬業的主要病原。段群棚等用RT-PCR/PCR方法對2014—2018年采集的349份樣品進行檢測發現，豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒、豬偽狂犬病毒、豬細小病毒、豬乙型腦炎病毒的陽性檢出率在不同的年份和不同的季節之間差異很明顯，且這幾種病原的陽性檢出率依次是6%、5%、35%、13%、32%、15%[4]。孫秋艷等對2014—2016年收集的2 289份發病豬的病料進行檢測發現，如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型等的檢出率在77.9%，其中單純性感染一種病原的檢出率為66.5%，混合感染的檢出率為11.4%。在不同月份，單純性感染的陽性檢出率差異非常明顯，且從2014—2016年單純性感染陽性率逐年遞增[5]。除這些常發病外，新的疫病也在不斷發展和蔓延，尤其是從2010年以來，我國許多豬場發生常見豬源性病毒病地方流行，甚至全國大流行的現象。如2010年我國許多省份相繼出現的豬流行性腹瀉病，發病率和死亡率都非常高，尤其是仔豬，出現嚴重的嘔吐、腹瀉，直至脫水死亡，新生仔豬的發病率和死亡率幾乎是100%[6]。2016年報道的部分地區新發現的豬圓環病毒3型，在我國某些豬場也相繼出現，并傳播至全國各個地區[7]。2018年由俄羅斯傳播至我國的非洲豬瘟病毒，致使我國養豬場經濟損失極為慘重，市場生豬存欄量約為發病前的1/3，豬肉價格上調幅度為原來肉價的3倍以上，給人們的生活帶來很大的經濟負擔。本研究對2019年貴州部分地市采集的樣品進行7種常見病毒性疫病檢測和分析，以期為貴州省豬源性病毒病的綜合防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2016年1月至2019年12月，每月從無害化處理廠采集的病死豬組織樣品，樣品總數為1 232份，組織樣品包括病死豬的肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、肌肉、全血等。將采集的樣品置于-20 ℃冰箱，當月完成檢測并統計數據。

1.2 使用試劑

本研究所使用的試劑為豬瘟病毒核酸熒光RT-PCR 檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒、豬圓環病毒2型核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒、豬細小病毒核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒、豬傳染性胃腸炎病毒核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒、豬流行性腹瀉病毒核酸熒光RT-PCR檢測試劑盒，分別購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司、洛陽萊普生信息科技有限公司、上海之江生物科技股份有限公司、武漢科前生物股份有限公司。

1.3 樣品處理和核酸提取

對于組織樣品：從樣品3個不同的部位共取出0.05 g并放入組織研磨管中，加入1 mL PBS溶液和1個鋼絲球，放入研磨儀進行研磨，之后1 500 r/min 離心3 min，上清作為核酸提取用原料。核酸提取：按照核酸提取試劑盒和全自動核酸提取儀的操作規程進行提取。

1.4 7種病毒性疫病的檢測

這7種病原均采用熒光PCR方法進行檢測，檢測過程中嚴格按照檢測試劑盒內部說明書進行每種疫病的程序設置和結果的判定。出現可疑樣品時，需要重新檢測。

2 結果分析

2.1 組織樣本的采集情況

2016年1月至2019年12月，采集豬組織樣品和其他樣品共計1 679份，其中常見疫病的樣品采集情況如表1和表2所示。

2.2 病原學檢測結果

本研究對采集的1 679份病死豬組織樣品，用熒光PCR檢測方法進行檢測，結果（表3）表明，CSFV、PCV2、PPV、PRV、PRRSV、TGEV、PEDV共7種常見疫病的陽性率分別為1.32%、20.65%、20.43%、21.91%、2.25%、4.60%、3.99%。同一種動物疫病在不同年份其陽性率之間差異不顯著（P>0.05），不同病種之間的感染率具有差異性，如豬瘟與圓環2型、豬細小病毒和豬偽狂犬病毒之間的感染率差異顯著（P<0.05），與豬繁殖與呼吸綜合征（藍耳病）、流行性腹瀉和傳染性胃腸炎之間沒有顯著性差異（P>0.05）。

對不同區域樣本之間陽性感染率進行分析發現，不同區域不同病種對感染率的影響均具有統計學意義（表4）。如豬瘟感染陽性率為1.32%，豬圓環病毒2型陽性率為20.65%，兩者之間差異顯著（P<0.05）。但與豬藍耳病、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉的陽性感染率差異不顯著（P>0.05）。黔東地區與黔中、黔西地區之間總體陽性率之間差異均顯著（P<0.05）。

2.3 7種疫病在時間上的分布

將1 679份組織樣品檢測結果按照不同的季節進行統計分析，從統計結果（表5）可以看出，這7種疫病在不同的季節差異均不顯著（P>0.05）。

2.5 混合感染情況

在所檢測的1 679份樣品中，出現2種疫病混合感染的感染率為20.63%，其中PCV2+PPV混合感染率為5.24%;PCV2+PRV混合感染率為6.44%;PPV+PRV混合感染率最高，達到8.95%。3種疫病混合感染的陽性率為2.62%（表6）。

3 討論與結論

近年來，隨著我國養豬業的蓬勃發展，一些規模化和集約化的現代養豬企業在不斷興起和發展，但對我國養豬業有嚴重影響的因素有很多，其中包括養豬業常常面臨的動物疫病，且患病豬感染單一病原的現象和多重病原的現象在不斷增加，尤其是感染多種病原的情況下，容易造成豬死亡[8]。在多種病原混合感染的病例中，有細菌與細菌混合感染引起的，也有病毒與病毒混合感染引起的，也有細菌與病毒混合感染引起的。白凈等在2006年對河南省10個豬場重要動物疫病進行為期1年的檢測和流行病學動態分析，結果發現，所調查的豬場雖然進行了部分豬重要動物疫病的免疫，但免疫效果比較差。豬瘟抗體陽性率只達到60%或者65%，且在監測的10個豬場當中，有4個豬場的豬瘟病毒核酸陽性。在7個未進行豬藍耳病免疫的豬場當中，豬藍耳病的抗體陽性率達到57.1%。在8個未免疫豬偽狂犬病的豬場當中，豬偽狂犬病的抗體陽性率達到84.4%[9]。曲哲會等用PCR和RT-PCR 方法對豫南地區規模化養豬場采集的病料進行豬瘟、豬圓環病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征和豬偽狂犬病進行調查發現，在調查的豬場當中，圓環病毒2型的感染率最高，達到70.5%，偽狂犬病的陽性率最低，為32.4%;此外，這些被調查的豬場4種病混合感染的情況非常嚴重，其中，有74.6%的豬場存在2種或者2種以上病毒病的混合感染[10]。王懷禹等用血清學和病原學的檢測方法對南充地區規模化豬場的1 857份血清樣品和152份臨床病料進行豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病和豬圓環病毒2型監測，發現這幾種病的抗體免疫合格率均在70%以上，病原陽性感染率分別是9.21%、17.11%、18.42%、22.37%。病原總單獨感染率為38.16%，病原總混合感染率為13.82%[11]。在本研究中對1 679 份樣品進行病原學研究，發現豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環病毒2型（PCV2）、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬細小病毒（PPV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）的陽性感染率分別為1.32%、20.65%、20.43%、21.92%、2.25%、4.60%、3.99%。2種病原PCV2+PPV、PCV2+PRV、PPV+PRV、TGEV+PEDV的混合感染率分別是5.24%、6.44%、8.95%、3.38%;3種病原PCV2+PPV+PRV混合感染率為2.62%。在2種病原混合感染的病例中，以豬細小病毒和豬偽狂犬病毒的混合感染率最高，以傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病毒的混合感染率最低。此外，在被調查的這7種主要的豬病當中，不同病種、不同區域之間均存在顯著差異。從調查結果可以看出，貴州省規模化豬場重要疫病中，以圓環病毒2型的感染最為嚴重，其次是藍耳病和偽狂犬病，并伴有2種以上病原混合感染的現象存在，因此，下一步應加強動物疫病監測和防控工作。

參考文獻：

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[11]王懷禹，陳 俊，何子雙，等. 南充地區規模化豬場4種病毒性傳染病的流行病學調查與分析[J]. 黑龍江畜牧獸醫，2020（2）：62-66.