復方烏鱧口服液對產后抑郁癥模型大鼠行為學的影響

何 娜，魏 云，何清林，聶 晶，田翔宇，羅 維，楊玉奇

（1.湖南農業大學2017級在職碩士研究生，湖南 長沙 410128；2.湖南醫藥工業研究所，湖南 長沙 410013；3.明瑞制藥有限公司，湖南 瀏陽 410331；4湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，湖南 長沙 410013）

復方烏鱧口服液是由鮮烏鱧、黃芪、大棗等組成，主要用于促進創傷、外科手術、分娩后的傷口愈合及傷后頭面虛腫、心悸氣短、神疲自汗等癥。臨床應用發現其對分娩后情緒郁悶癥有一定療效［1-2］。本實驗探討了復方烏鱧口服液抗抑郁的藥效作用及機制，報道如下。

1 材料與方法

藥物：復方烏鱧口服液，規格10mL/支，生藥含量為1.062g/mL，批號160109，由湖南明瑞制藥有限公司提供。鹽酸帕羅西汀片，規格20mg/片，由浙江尖峰藥業有限公司提供，批號150101。地塞米松磷酸鈉注射液，規格1mL∶5mg，濟南利民制藥有限責任公司，批號15120602-1。

動物：受孕SD大鼠，60只，250～280g，SPF級，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，飼養于SPF級實驗室，溫度20℃～26℃，濕度40%～70%。實驗動物質量合格證號為No.43004700015835。

儀器與試劑：DNM-9606酶標分析儀，北京普朗新技術有限公司。5-HT檢測試劑盒，由Cusabio提供，批號C0969790372。

方法：將60只受孕大鼠隨機分為6組，分為對照組，模型組，陽性對照組，復方烏鱧口服液低劑量組、中劑量組、高劑量組，獨籠飼養。除對照組外，其余各組大鼠自受孕第1天起，皮下注射，注射用水1mL/kg；至受孕成功第15天開始，皮下注射地塞米松磷酸鈉0.2mg/kg，直到產崽。產崽后繼續給藥，模型組用蒸餾水，陽性對照組用鹽酸帕羅西汀3.6mg/kg，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組用1.8、3.6、7.2mL/kg，連續給藥15天。產后4天觀察母愛行為（噙崽潛伏期、集窩時間、舔崽時間、噙崽頻率），產后10天進行曠場實驗（活動性及興趣性），產后12天進行懸尾實驗（絕望不動持續時間），產后15天進行強迫游泳實驗（自救持續時間、絕望不動持續時間），產后22天，母鼠腹主動脈取血，采用酶聯免疫法檢測5-HT含量。

檢測指標［3-4］：①關愛行為：于分娩后的第4天，母鼠給藥1h后，將幼鼠分散于鼠籠四角，母鼠置于鼠籠中央，在鼠籠正上方100 cm處懸掛攝像機進行記錄，記錄每只母鼠關愛幼崽行為。噙崽潛伏期，母鼠噙起第1只幼鼠的時間；集窩時間，母鼠將所有幼鼠集中的時間；舔崽時間，母鼠用舌頭舔或頭部在幼鼠頭背和肛門生殖器周圍持續3s以上的總時間；噙崽頻率，母鼠噙起幼鼠的總次數。②曠場實驗：于分娩后的第10天，母鼠給藥1h后，用自制OPEN-FIELD敞箱。四周箱壁為黑色，底面用黑線均勻劃分為相等面積的25塊方格。以動物穿越方格數作為水平活動的得分，以直立次數為垂直活動得分。每只動物僅測定1次，每次3min。每次測試前保持敞箱內干凈。曠場試驗水平運動的得分反映大鼠的活動性，垂直活動的得分則反映大鼠的興趣性。③懸尾實驗：于分娩后的第12天，末次給藥1h后，距大鼠尾尖部約1cm處用膠布貼于懸尾箱支架上，使大鼠成倒掛狀態，其頭部離箱底約10cm，1次懸掛1只大鼠。懸掛時間為6min，記錄大鼠4min內懸尾累積不動時間。④強迫游泳實驗：于分娩后的第15天，末次給藥1h后，在約60cm高的水桶內放人約30cm高度的37℃溫水，距離桶上方100cm處懸掛攝像機進行記錄。大鼠持續游泳力竭后繼續觀察6min，記錄游泳不動時間，即大鼠只在水中做少量輕微擺動保持頭部不下沉的時間。⑤血清5-HT含量測定：各組動物繼續給藥7天后，母鼠腹主動脈取血，采用酶聯免疫法，用ELISA試劑盒檢測5-HT含量。

統計學方法：實驗數據以（±s）表示，用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義，P＜0.01為差異有高度統計學意義。

2 結 果

各組關愛幼崽行為比較見表1。與對照組比較，模型組母鼠噙崽潛伏期明顯增加，集窩時間顯著增加，舔崽時間明顯減少，噙崽頻率顯著降低，差異均有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）；與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組噙崽潛伏期、集窩時間、舔崽時間、噙崽頻率有不同程度的改善作用，差異均有統計學意義（P＜0.05）。

表1 各組關愛幼崽行為比較 （±s ，n=10）

表1 各組關愛幼崽行為比較 （±s ，n=10）

注：與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05。

噙崽頻率（次/30min）對照組 - 14.61±2.91 12.08±3.49 62.08±23.84 17.60±5.40模型組 - 17.91±2.99*18.12±5.24**46.04±11.92*10.50±3.17**低劑量組 1.8 17.04±2.87 15.95±4.61 50.65±13.11 13.40±5.54中劑量組 3.6 14.97±3.19#14.50±4.19 50.88±13.17 16.20±6.25#高劑量組 7.2 14.80±3.26#14.08±4.07#55.35±14.38 16.50±6.10#陽性對照組 3.6mg/kg 14.78±3.04#13.90±4.02#55.39±14.34 16.40±7.00#組別 劑量（mL/kg）噙崽潛伏期（s）集窩時間（min）舔崽時間（s）

各組抗抑郁作用比較見表2。與對照組比較，模型組母鼠活動性顯著減少，興趣性有降低趨勢，懸尾和游泳絕望不動時間明顯增加，差異均有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）；與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組活動性、興趣性、懸尾和游泳絕望不動時間有不同程度的改善作用，差異均有統計學意義（P＜0.05）。

表2 各組抗抑郁作用比較 （±s ，n=10）

表2 各組抗抑郁作用比較 （±s ，n=10）

注：與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05。

游泳絕望不動時間（min）對照組 - 50.60±14.12 17.00±6.99 2.22±0.57 2.47±0.38模型組 - 33.40±16.95**12.70±3.92 2.72±0.62* 2.93±0.42*低劑量組 1.8 44.60±10.67 13.60±4.38 2.45±0.42 2.70±0.43中劑量組 3.6 45.00±11.71 14.30±4.52 2.44±0.33 2.54±0.39#高劑量組 7.2 45.80±11.69#15.20±5.01 2.22±0.75# 2.61±0.37陽性對照組 3.6 mg/kg 45.90±12.42#16.10±8.23 2.19±0.44# 2.49±0.41#組別 劑量（mL/kg）活動性（格/3min）興趣性（次/3min）懸尾絕望不動時間（min）

各組對母鼠血清5-羥色胺含量影響的比較見表3。與對照組比較，模型組母鼠5-HT濃度明顯降低（P＜0.05）。與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組母鼠5-HT濃度有不同程度的改善作用，差異均有統計學意義（P＜0.05）。

表3 各組對母鼠血清5-HT含量影響的比較 （±s ，n=10）

表3 各組對母鼠血清5-HT含量影響的比較 （±s ，n=10）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05。

組別 劑量（mL/kg） 5-HT（ng/mL）對照組 - 6.81±2.50模型組 - 4.49±1.62*低劑量組 1.8 5.09±1.84中劑量組 3.6 5.69±2.06高劑量組 7.2 6.45±2.41#陽性對照組 3.6mg/kg 6.52±2.42#

3 討 論

PPD主要表現為焦慮、激動、悲傷、沮喪、哭泣、失眠和意識錯亂，甚至出現幻覺和自殺傾向。抑郁癥屬中醫“郁證”“癲”等范疇。多因脾腎兩虛，肝氣郁結，血氣凝滯，心失所養，腦失所調，進而發?。?-4］。西醫認為PPD病因與5-HT含量降低有關，治療抑郁癥的藥物以5-HT作用的靶點，主要通過增加單胺類遞質的濃度、增強單胺類神經遞質的功能而起到抗抑郁作用［5-10］。

復方烏鱧口服液由烏鱧、黃芪、大棗等組成，具有補血補氣及促進傷口愈合的作用。方中烏鱧具有促進傷口愈合、抗炎、殺菌等作用，黃芪具有增強免疫功能作用。Saleem A M等［11］研究發現烏鱧魚片水提物具有明顯抗抑郁作用。韓曉蕾等［12］研究證明黃芪能夠降低小鼠抑郁反應，提高抑郁癥小鼠血清5-HT含量。研究表明，復方烏鱧口服液能夠使PPD母鼠抑郁行為減輕，同時能夠使母鼠血清5-HT含量提高，提示復方烏鱧口服液具有一定的抗抑郁作用。