血清巨噬細胞移動抑制因子、可溶型細胞間黏附分子-1及甲胎蛋白水平與慢性乙型肝炎患者肝纖維指標的關聯性分析

粟春林

(四川省遂寧市中心醫院消化中心四病區，四川 遂寧 629000)

慢性乙型肝炎作為乙型肝炎病毒感染所致消化系統傳染疾病，可導致患者肝臟纖維化甚至出現肝臟硬化病變，嚴重影響患者正常生活[1]。肝纖維化特指肝臟細胞因為細胞外基質膠原大量聚集，其作為眾多肝臟疾病發生過程，為可逆性病變過程，病變早期進行診斷與治療可以有效緩解甚至逆轉纖維化過程[2]。血清巨噬細胞移動抑制因子(MIF)作為介導免疫應激以及炎癥反應淋巴因子，與患者乙型、丙型肝炎發病以及病程進展關系密切[3]。可溶型細胞間黏附分子-1(sICAM-1)主要由蛋白酶降解膜型ICAM-1而使細胞外成分分解所致，其水平變化與肝細胞病變關系密切[4]。甲胎蛋白(AFP)作為腫瘤特異性標志物，在肝臟腫瘤疾病發生中水平異常上升[5]。目前對于肝炎患者肝纖維化評估主要應用血清肝纖維指標以及肝纖維化程度評估，是否可以應用其他血清指標評估肝炎纖維化程度尚需要進一步研究。為豐富肝纖維化評估方法，明確乙型肝炎發病機制，本研究探討慢性乙型肝炎患者MIF、sICAM-1及AFP水平與肝纖維指標關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年3月至2019年3月我院收治110例慢性乙肝肝炎患者(研究組)及同期健康體檢者104例(對照組)。研究組納入標準：①患者乙肝表面抗原檢查顯示為陽性，且陽性時間超過6個月，肝組織穿刺活檢證實患者病情，期間未接受抗病毒治療；②對照組無慢性乙肝肝炎病情；③研究參與者精神或者意識正常，可以配合研究中各項操作；④研究參與者對研究知情，且獲得醫院倫理會批準。排除標準：①肝臟疾病類型為肝癌、失代償型肝硬化或者肝臟移植者；②已經接受抗病毒治療；③并發心臟、腎臟以及肺部等器官功能異常者；④并發免疫性、代謝性以及感染性疾病。研究組男53例，女57例，年齡24～79歲[(52.64±19.54)歲]；對照組男50例，女54例，年齡22～80歲[(53.92±21.64)歲]。兩組基線資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1血清指標水平測定 患者在入院當日或次日、健康者在體檢當日收集空腹靜脈血，血液離心后獲得上清液，血清MIF、sICAM-1、AFP均應用酶聯免疫吸附法進行測定，血清纖維化指標透明質酸(HA)、層黏蛋白(LN)以及Ⅳ型前膠原(Ⅳ-C)采用化學發光法進行測定。上述指標測定采用對應試劑盒在Hitachi 7600型號全自動生活分析儀上測定。

1.2.2肝纖維化程度評估 患者均進行肝組織活檢，應用經皮肝穿刺法進行活檢穿刺，肝組織樣本采集完成后行病理檢查評估患者肝纖維化程度。肝組織樣本應用中性甲醛固定，采用乙醇進行梯度脫水，二甲苯透明處理后進行石蠟包埋，樣本切片后應用網狀纖維以及蘇木精-伊紅染色，最后在顯微鏡下進行觀察。最后肝臟纖維化程度評估由2位醫師進行評估，意見一致顯示為最終結果有效，意見不一致則與第3位醫師討論達至統一意見。依據患者匯管區纖維化，小葉內纖維間隔以及纖維化情況分為S0～S4期[6]：S0期為未見纖維化；S1期為匯管區纖維化變大，小葉內部以及局限竇周纖維化；S2期為小葉區結構未被破壞，匯管區附近纖維化，纖維間隔形成；S3期為小葉結構異常且纖維間隔形成，尚未出現肝硬化；S4期為早期肝硬化形成。

1.3 觀察指標比較兩組血清三指標及肝纖維化指標水平，不同肝纖維化程度患者血清三指標水平，分析血清三指標水平與肝纖維化指標及程度相關性，血清三指標水平對患者肝纖維化預測價值。

1.4 統計學方法采用SPSS 20.0統計學軟件分析數據。計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析及SNK-q檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；血清三指標水平對肝纖維化預測價值采用ROC曲線。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清三指標及肝纖維化指標水平比較研究組血清MIF、sICAM-1、AFP及HA、LN、Ⅳ-C水平高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清三指標及肝纖維化指標水平比較

2.2 不同肝纖維化程度患者血清三指標水平比較

肝纖維化S1、S2、S3、S4期分別有33、30、27及20例，隨著患者肝纖維化程度加重，血清MIF、sICAM-1及AFP水平上升(P<0.05)，見表2。

表2 不同肝纖維化程度患者血清三指標水平比較

2.3 血清三指標水平與肝纖維化指標及程度相關性分析血清MIF、sICAM-1及AFP水平與HA、LN、Ⅳ-C及肝纖維化程度正相關(P<0.05)，見表3。

表3 血清三指標水平與肝纖維化指標與程度相關性分析

2.4 血清三指標水平對患者肝纖維化預測價值分析ROC曲線顯示血清MIF、sICAM-1、AFP水平處于31.67 μg/L、31.67 μg/L、3.86 ng/ml時，用于預測患者肝纖維化靈敏度分別為78.65%、81.64%、80.19%，特異度分別為81.59%、78.64%、84.52%，AUC分別為0.792、0.806、0.813，見表4與圖1。

表4 血清三指標水平對患者肝纖維化預測價值分析

圖1 血清三指標水平對患者肝纖維化預測價值的ROC曲線

3 討論

乙肝肝炎患者長時間處于感染狀態，病毒感染會導致炎癥反應激活，造成肝臟組織部分蛋白酶活性增加，進一步誘使肝臟組織中膠原蛋白被膠原蛋白酶降解，造成肝組織細胞以及細胞質之間通道被破壞，最終導致肝纖維化與肝硬化[7]。HA、LN、Ⅳ-C為反映機體肝纖維化重要指標，均存在于肝臟組織基質，在肝臟組織纖維化過程中會逐漸被釋放進入血液，所以肝炎患者血清HA、LN、Ⅳ-C水平顯著上升。本研究中研究組血清MIF、sICAM-1、AFP水平顯著高于對照組。MIF作為免疫調節因子，可以在機體免疫作用中發揮誘導淋巴細胞以及巨噬細胞活化，減少巨噬細胞移動，促進巨噬細胞聚集以及粘附，最終誘導機體炎癥作用。Tang等[8]研究認為MIF作為一種參與遲發性超敏反應和多種巨噬細胞功能淋巴因子，具有有效吞噬、擴散和殺瘤活性，其表達在胃炎、炎癥性腸病、肝炎和胰腺炎患者血清和局部病變中均顯著增加，而阻斷MIF生物活性可抑制胃炎、結腸炎、肝炎和胰腺炎疾病中炎癥。另有研究發現肝移植患者術后較易出現再灌注以及缺血損傷，其組織損傷與患者MIF釋放水平上升關系密切。Marin等[9]研究中酒精性肝炎患者MIF主要在肝細胞表達，而肝組織MIF濃度與患者病情嚴重程度以及死亡率正相關。sICAM-1作為膜型ICAM-1裂解產生而成，其在肝細胞癌中表達水平異常上升，其水平上升與患者肝臟腫瘤復發以及轉移關系密切。Osibogun等[10]研究中發現肝炎病毒感染患者內皮細胞標志物sICAM-1和sVCAM-1明顯高于健康者，與本研究中相關結論一致。國外研究者發現乙肝與丙肝共感染患者sICAM-1高于乙肝病毒感染以及健康對照組，患者接受治療后sICAM-1水平明顯下降，顯示其水平與患者病毒感染載量關系密切。AFP作為胚胎卵黃囊或者肝細胞分泌球蛋白，是評估肝癌病情特異性指標，而在乙型肝炎中其水平變化則反映了肝細胞損傷以及功能修復情況。楊凱等[11]研究顯示隨著乙型肝炎患者炎癥程度加重，AFP水平逐漸上升，但是AFP水平與病毒載量無顯著相關性，分析認為乙肝病毒感染并不會直接導致機體炎癥發生，而是通過激活免疫作用間接使肝臟組織炎癥反應劇烈。

乙型肝炎患者肝纖維情況可以應用血清肝纖維指標評估。本研究中隨著患者肝纖維化程度加重，患者血清MIF、sICAM-1以及AFP水平逐漸上升，顯示纖維化程度與血清MIF、sICAM-1以及AFP水平正相關。Wirtz等[12]研究中發現MIF與丙型肝炎所致纖維化程度關系密切，這種關系主要由MIF啟動子區域rs755622和rs5844572多態性介導，與雜合子攜帶者或野生型相比，rs755622中C等位基因的純合子攜帶者纖維化程度低，C/C基因型和微衛星重復次數高患者肝功能損傷、肝細胞癌變風險較高。MIF經由上調活性氧介導纖維細胞糖酵解作用進而誘導膠原生成，加速肺部纖維化進程。王烈等[13]認為乙肝肝硬化患者肝硬化程度越高，sICAM-1越高，sICAM-1則可以促進T細胞受體作用，加快抗原呈遞細胞與淋巴細胞之間結合作用，可以協同激活細胞免疫作用，患者肝硬化程度越高內部炎癥作用越激烈，體內細胞免疫作用激烈，sICAM-1越高。Moqueet等[14]研究中sICAM-1指標可以有效預測大鼠3年肝纖維化風險，顯示炎性指標在肝纖維化評估中優異價值。余明杰等研究結果顯示明顯肝炎、急性肝炎、肝硬化以及肝癌患者肝纖維化程度加重，AFP水平依次上升，可用于鑒別各種肝臟疾病。郭飛波等[15]研究顯示肝硬化伴肝癌患者血清AFP水平異常，且其水平與患者肝纖維化程度以及肝纖維化指標關系密切，可用于肝硬化伴肝癌診斷。血清指標用于疾病診斷、病情嚴重程度評估以及預后預測中具有快速以及無創優勢，且其臨床應用價值優異。本研究中ROC曲線顯示血清MIF、sICAM-1、AFP用于預測乙型肝炎肝纖維化AUC分別為0.792、0.806、0.813，顯示三指標其應用于預測乙型肝炎肝纖維化價值優異。

綜上，乙型肝炎患者血清MIF、sICAM-1、AFP異常上升，三者水平與肝纖維化指標、肝纖維化程度正相關，其用于預測患者肝纖維化價值優異。