小兒肺炎支原體血清學實驗實習帶教體會

藍紅云，謝 思，陳少艷，何 敏，何偉業

（廣州中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科，廣東 廣州 510405）

肺炎支原體是大小介于細菌與病毒之間的一種病原微生物。肺炎支原體的致病機制通過它的頂端結構從而粘附在受侵襲細胞的表面，且伸出肺炎支原體的微管刺入細胞內吸取細胞營養、損傷細胞的細胞膜，最終釋放出核酸酶、蛋白酶、過氧化氫等代謝產物引起宿主細胞的溶解、腫脹與壞死。對肺炎支原體檢測技術這部分內容學生在教材有過介紹但涉及不深，發現實習學生對于這部分內容實踐操作起來比較難，對于這部分內容臨床意義掌握不充分，不能很好向臨床解釋相關結果的臨床意義。針對這一現象，本文就小兒肺炎支原體實習帶教中總結了一些體會。

（1）從小兒肺炎支原體肺炎臨床癥狀嚴重性理論學習中帶教。引起小兒肺部炎癥的疾病因子中，肺炎支原體是其中最常見的一種疾病。小兒肺炎支原體肺炎病理變化是以間質性肺炎為主，占小兒非細菌性肺炎的1/3，同時其發病率逐年升高的趨勢；小兒肺炎支原體患者，因為年齡比較小，而且自身免疫條件弱，微生物很容易侵襲，因而引發感染癥狀。而且小兒肺炎支原體的感染特別易引起咳嗽變異性哮喘，兩者疾病發生關系之間非常密切[1]，同時可能引起肺特異性肌痛、皮膚黏膜損傷；小兒肺炎支原體還可引起肺部以外的并發癥狀，甚至嚴重的時候可能引起多系統、多器官功能衰竭的嚴重后果，如消化、皮膚、關節、心肌炎、免疫性溶血性貧血、心包炎、腎炎、神經、腦膜腦炎，甚至很可能導致死亡。因此，小兒支原體肺炎的早期診斷意義重大[2]。

（2）從肺炎支原體的檢測技術實際操作中帶教。肺炎支原體主要以二分裂繁殖，基因組單位小，因而限制了它的代謝能力，因此其繁殖較慢，普通的微生物分離培養大約需7 d，因而缺乏早期臨床診斷價值[3-4]。小兒患者在感染肺炎支氣管肺炎后具有特異性的IgG和IgM會出現，在發生感染1個月時間，它的抗體濃度達到最高峰，緊接著逐漸下降。對抗體指標變化進行監測，從而可對炎癥反應及患者病情程度進行相關反饋，為臨床醫師診斷治療提供依據。根據指標滴度變化，適當可以調整用藥劑量，從而提高患者的治療效果[5]。

肺炎支原體血清學實驗是肺炎支原體血清學被動凝集法檢測IgG和IgM復合型抗體通過采用肺炎支原體細胞膜組成成份致敏人工明膠粒子而成，與被檢測者血清中的肺炎支原體抗體發生被動凝集反應；被動凝集反應結果判斷：粒子環明顯變大、其外周邊緣不均勻且雜亂地凝集在周圍為陽性，本實驗中以≥1∶80為陽性；顆粒呈紐扣狀、呈現出外周邊緣均勻且平滑的圓形為陰性。

（3）從分析肺炎支原體檢測技術的優缺點來帶教。患者被肺炎支原體感染后，經過免疫反應人體內首先產生IgM，隨后產生SIgA和IgG。抗肺炎支原體IgM是機體受肺炎支原體感染時最早出現的特異性抗體。檢測MP-IgM后研究表明發現在兒童首次感染肺炎支原體時其效價滴度不高，因此臨床上成為無明顯臨床表現癥狀的隱匿性感染人群。研究者經過大量的動物試驗后發現，經過免疫后的動物第一次肺炎支原體感染一年之后會再一次發生比較嚴重的肺炎。對肺炎支原體的培養，因此能直接查到肺炎支原體，但是培養方法受到方法要求嚴格以及檢出率很低等方面的限制，因而大大限制了培養方法在臨床中應用，特別在疾病早期診治中的推廣應用。核酸擴增檢測技術的缺點是因為其不依靠支原體是否存活，因而陽性實驗結果不能區別是感染攜帶者、無癥狀感染和急性感染。核酸擴增檢測方法的雖提升了檢測的特異性和敏感性，但是實驗假陰性、假陽性結果較高。肺炎支原體血清學被動凝集法與膠體金法兩種方法在臨床上均具有相當大的作用，尤其是肺炎支原體被動凝集法。臨床常用被動凝集法試驗具有敏感度較高、特異性較強、快速、方法學簡單以及操作起來比較簡便的優點。急性期及恢復期的雙份血清中，肺炎支原體特異性抗體滴度呈4倍或者4倍以上增高或減低均可診斷為肺炎支原體感染。而且顆粒凝集試驗特異性抗體滴度≥1：160可是診斷肺炎支原體近期感染的依據。

實習階段是檢驗臨床醫學從業者走上工作崗位相當重要的環節，本文通過帶教學生學習理論知識以及實際操作，同時跟進學生反饋教學意見的方式，通過這種方式對實習教學進行改革和發展，以便提高了臨床實習的質量，培養出更加優秀檢驗人才，為走上臨床檢驗工作崗位打下良好的理論基礎和實踐基礎。