傳染性單核細胞增多癥128例實驗室指標的早期診斷價值

張立營，陳樸，彭宇生，王鵬

作者單位：宜賓市第一人民醫院檢驗科，四川 宜賓644000

傳染性單核細胞增多癥（infectious mononucleosis，IM）是兒童時期比較常見的由EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染所致的單核-巨噬細胞系疾病。它可發生于全年，兒童感染時其癥狀不同，且常累及多臟器和多系統，導致多種臨床表現。因此，應盡快進行相關的實驗室檢查，從而綜合分析以明確診斷。

目前診斷IM包括異型淋巴細胞計數、VCAIgM、EBV-DNA載量和嗜異凝集試驗陽性等多種實驗室指標。為了有效對IM進行早期診斷，本研究選擇128例IM病兒和80例健康兒童，分別對其進行異型淋巴細胞、EBV抗CA-IgM（VCA-IgM）和EB病毒-DNA（EBV-DNA）載量檢測。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2018年9月至2019年4月在宜賓市第一人民醫院住院且處于治療前的128例IM病兒和80例健康兒童作為受試者，所有病兒均符合IM診斷標準［1］。研究分為感染組和健康對照組，感染組中包括69例男性病兒，59例女性病兒，年齡（5.6±0.5）歲，范圍為0.4～12.0歲。另選正常體檢的健康兒童80例作為對照組，對照組中包括男性48例，女性32例，年齡（5.4±0.4）歲，范圍為0.9～12歲。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義（P＞0.05）。病兒監護人或其近親屬對所受治療知情同意，本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2方法

1.2.1 異型淋巴細胞檢測 采集研究對象的靜脈血制作成血涂片后進行瑞吉染色，利用光學顯微鏡觀察并計算異型淋巴細胞的百分率。異型淋巴細胞百分率大于10%判定為陽性。

1.2.2 VCA-IgM抗體檢測 對受試者進行靜脈血液取樣，血容量為2 mL，3 000 r/min，5 min，取上清，通過酶聯免疫吸附測定（ELISA）檢測抗體。按試劑盒試劑相關說明書（德國OUMEMG公司）進行操作，判斷標準為病人樣本吸光度與標準品吸光度比值≥1.1為陽性。

1.2.3 EBV-DNA檢測 對研究對象抽取靜脈血2 mL并用EDTA抗凝，立即顛倒混勻備用無須離心，采用上海宏石SLAN-96S/48P熒光定量PCR儀進行EBV-DNA測定，并根據儀器試劑的相關說明使用圣湘生物有限公司的EBV-DNA試劑，EBV-DNA＞4×102/mL為陽性。

1.3統計學方法用SPSS 20.0軟件對數據進行統計分析，計量資料采用表示，采用兩獨立樣本t檢驗；計數資料采用百分率表示，組間比較通過χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EBV感染組和健康對照組異型淋巴細胞、VCA-IgM抗體和EBV-DNA陽性率比較異型淋巴細胞、VCA-IgM抗體和EBV-DNA陽性率兩組對比均差異有統計學意義（P＜0.001），見表1。

表1 EB病毒（EBV）感染組和健康對照組異型淋巴細胞、EBV抗CA-IgM（VCA-IgM）和EB病毒-DNA（EBV-DNA）陽性率的比較/例（%）

2.2異型淋巴細胞計數、VCA-IgM和EBV-DNA三項指標對IM診斷效能價值的比較EBV感染組異型淋巴細胞、VCA-IgM和EBV-DNA對IM診斷靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值結果見表2，EBV-DNA診斷IM的靈敏度和陰性預測值高于異型淋巴細胞和VCA-IgM（P＜0.05）。

表2 異型淋巴細胞、EBV抗CA-IgM（VCA-IgM）和EB病毒-DNA（EBV-DNA）三項指標對傳染性單核細胞增多癥診斷效能的比較/%（n/N）

2.3異型淋巴細胞計數、VCA-IgM和EBV-DNA三項指標聯合檢測異型淋巴細胞計數、VCA-IgM和EBV-DNA以一項或多項陽性為依據的聯合檢測診斷IM的靈敏度為96.88%（124/128）；以三項指標均陰性為依據的聯合檢測診斷IM的特異度為96.25%（77/80），其中對照組EBV-DNA假陽性的病兒與VCA-IgM假陽性病兒之一是同一病兒。

3 討論

IM是兒童時期EBV感染最常見的發病類型，感染多集中于12歲以下兒童，占發病人數的58.62%，感染時其癥狀差別較大，是小兒時期發熱的病因之一。臨床表現主要以發熱、咽峽炎、肝脾淋巴結腫大、外周血中淋巴細胞增加并出現異形淋巴細胞等為特征。它可以影響全身多個系統，引發多種疾病或存在隱性感染［1-2］。

目前對于IM的診斷有多種實驗室指標，其中包括異型淋巴細胞計數、VCA-IgM和EBV-DNA載量檢測等。當病人感染EBV時，其主要入侵B淋巴細胞，導致T細胞出現免疫反應，最終導致在血中可以觀察到異型淋巴細胞。在健康人群中，異型淋巴細胞非常罕見，但異型淋巴細胞在病毒感染病人中更為常見。異型淋巴細胞比例增加到10%的時候，具有臨床診斷價值［3-4］。本研究結果顯示，感染組病兒異型淋巴細胞（大于10%）陽性率為61.72%，略低于徐福勝等［5］報道的86%陽性率，高于林勝元［6］的報道，這可能與受試病兒免疫狀況和檢測時期不同等因素有關。

VCA-IgM在EBV感染早期產生，數周后消失，是急性感染的可靠標志。但由于EBV初次感染病兒的年齡較低，其免疫系統發育還未完善，病毒進入機體后，無法對EBV產生充分的免疫反應，尤其是在感染的早期，一些病兒體內產生的抗體甚至低于檢測下限，因此不能通過ELISA將其檢測出來，VCA-IgM陽性率低也可能與部分病兒缺乏典型臨床表現，忽視檢測VCA-IgM或檢測時間不當有關［7-9］。VCA-IgM抗體主要反映感染后人感染的免疫狀態，不檢測病毒本身，但EBV可能是潛伏感染。因此，抗體難以準確地反映EBV感染，容易導致漏診。本研究結果顯示，感染組病兒VCA-IgM抗體陽性比例為70.31%，與朱傳新等［10］報道的陽性比例大致相同，略低于王曉亮、劉曉鶯［11］報道的陽性率，這可能與病人所處疾病的不同時期有關。

EBV-DNA檢測是一種靈敏度和特異度都很高的檢測方法，在抗體檢查結果不明確時，有助于早期診斷。但在病程兩周以后，大多數IM病人血清中幾乎檢測不到病毒核酸［12］。胡榮盛等［13］發現，在EBV活動期，兒童外周血中EBV-DNA水平升高，在健康EBV攜帶者中，EBV-DNA幾乎檢測不到，并且僅存在少量外周血淋巴細胞。外周血EBV-DNA測試被認為在評估EBV感染狀態中是重要的［13］。本研究結果顯示，感染組病兒EBV-DNA陽性率為95.31%，略高于湯俊峰等［14］報道的82%陽性率，這也可能與受試病兒檢測時期不同等因素有關。

研究數據顯示，IM感染組病人異型淋巴細胞、VCA-IgM和EBV-DNA陽性率顯著高于健康對照組（P＜0.05）。EBV-DNA診斷IM的靈敏度和陰性預測值均顯著高于異型淋巴細胞和VCA-IgM（P＜0.05），然而，后二者比較差異無統計學意義（P＞0.05），三者診斷IM的特異度和陽性預測值差異無統計學意義（P＞0.05）。EBV-DNA對IM的診斷效能明顯高于其他兩項檢測指標，但異型淋巴細胞（大于10%）診斷IM的特異度達到100%。以上述一項或多項指標陽性為依據的聯合檢測診斷IM的靈敏度為96.88%；以三項指標均陰性為依據的聯合檢測診斷IM的特異度為96.25%。因此，異型淋巴細胞、VCA-IgM和EBV-DNA陽性率三者聯合檢測能大大提高對兒童IM的明確診斷。