N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP在鼻咽癌放療后骨轉移中診斷及預后中的價值

王林 紀東★ 許仝一

鼻咽癌為臨床常見惡性腫瘤，其中95%以上為低分化鱗狀細胞癌，具有較高的惡性程度，易發生骨、肝、肺轉移，其中骨轉移發生率達7.1%～63.9%［1-2］。放射性核素骨顯像可通過骨鹽代謝及骨骼血供情況評估惡性腫瘤患者是否發生骨轉移，但對于隱匿病灶檢出率有限［3］。骨髓細胞代謝產物對腫瘤細胞有趨化作用，從而導致腫瘤發生骨轉移，促使成骨細胞形成骨基質，破骨細胞降解骨基質，造成骨代謝紊亂，同時引起相應骨轉換標志物表達水平異常變化［4］。因此，科學篩選骨轉換標志物作為監測指標，對鼻咽癌放療后骨轉移診斷、病情控制及預后評估具有重要意義。N 端骨鈣素（N-Osrteoc）、β-膠原特殊系列（β-Crosslaps）、總Ⅰ型膠原氨基端延長肽（TPINP）均為常用骨轉換標志物，但其在鼻咽癌放療后骨轉移患者中診斷價值如何，臨床鮮有研究，基于此，本研究從骨代謝角度對鼻咽癌放療后患者進行觀察，旨在彌補影像學檢查和常規腫瘤標志物對骨轉移診斷和預后評價的不足。現將具體結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2015年3月至2018年3月鼻咽癌放療后骨轉移患者89 例作為轉移組，放療后未發生骨轉移患者37 例作為未轉移組。入選標準：經內鏡病理檢查確診為鼻咽癌；轉移組均行放射性核素骨顯像檢查確診；均知情本研究并簽署同意書。排除標準：影響骨代謝的內分泌疾病，近3 個月內出現過骨折或接受雙磷酸鹽、激素、鈣制劑治療者；合并其他惡性腫瘤者。

1.2 方法

取晨空腹靜脈血3 mL，室溫凝固，以3 500 r/min 的轉速離心10 min（離心半徑：8 cm），分離取上層血清，置于-80℃恒溫箱待測。采用德國羅氏公司CobasE-601 全自動電化學發光免疫分析儀及配套試劑盒以電化學發光免疫法測定N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP、癌胚抗原（CEA）及細胞角蛋白19 片段2l-l（CYFRA21-1）水平。

1.3 觀察指標

①比較兩組臨床資料，包括年齡、性別、病理類型（角化癌、未分化型非角化癌、分化型非角化癌）、臨床分期（Ⅰb 期、Ⅱ期、Ⅲ期）、腫瘤家族史、卡氏功能（KPS）評分（＞70 分、≤70 分）、血紅蛋白（Hb）是否正常、常規腫瘤標志物（CEA、CYFRA21-1）。②比較兩組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平。③采用Pearson 相關性分析轉移組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 與常規腫瘤標志物相關性。④受試者工作特征（ROC）曲線評價血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平對鼻咽癌放療后骨轉移的診斷價值。⑤隨訪2年，統計轉移組2年生存率。⑥采用Kaplan-Meier 曲線對鼻咽癌放療后骨轉移患者進行生存分析。

1.4 統計學處理

采用SPSS 23.0 軟件進行處理數據，計數資料以n（%）表示，χ2檢驗，等級資料采用Ridit 檢驗，計量資料采用（±s）表示，用t檢驗，采用Pearson 相關系數模型分析相關性；采用ROC 曲線，獲取曲線下面積、置信區間、敏感度、特異度及cut-off 值，用DeLong 檢驗，采用Kaplan-Meier 曲線進行生存分析，均采用雙側檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床資料比較

兩組病理類型、腫瘤家族史、KPS 評分、Hb 等資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組年齡、性別、臨床分期、血清CEA、CYFRA21-1 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平

轉移組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平高于未轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表1 兩組臨床資料比較［n（%）］Table 1 Comparison of clinical data between 2 groups［n（%）］

表2 兩組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP levels between 2 groups（±s）

表2 兩組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP levels between 2 groups（±s）

組別轉移組未轉移組t 值P 值n 89 37 N-Osrteoc（μg/L）18.34±4.49 14.13±3.76 5.016＜0.001 β-Crosslaps（ng/L）681.16±225.44 430.57±142.39 8.866＜0.001 TPINP（μg/L）87.52±29.01 46.29±15.57 8.158＜0.001

2.3 轉移組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 與常規腫瘤標志物相關性

Pearson 相關性分析，轉移組血清N-Osrteoc（r=0.881、0.800）、β-Crosslaps（r=0.789、0.773）、TPINP（r=0.770、0.760）與CEA、CYFRA21-1 呈正相關（P＜0.05），見圖1。

圖1 轉移組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 與常規腫瘤標志物相關性Figure 1 The correlation between serum N-Osrteoc,β-Crosslaps,TPINP and conventional tumor markers in metastasis group

2.4 多元線性回歸分析

將年齡、性別、臨床分期、血清CEA、CYFRA21-1等其他因素控制后，血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 仍與鼻咽癌放療后骨轉移顯著相關（P＜0.05），見表3。

表3 多元線性回歸分析Table 3 Multiple linear regression analysis

2.5 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 對鼻咽癌放療后骨轉移的診斷價值

根據兩組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平繪制ROC 曲線，結果顯示，見表4、圖2。

表4 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 對鼻咽癌放療后骨轉移的診斷價值Table 4 The diagnostic value of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP for bone metastases after radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma

圖2 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 對鼻咽癌放療后骨轉移的診斷價值Figure 2 The diagnostic value of serum N-Osrteoc,β-Crosslaps,and TPINP for bone metastasis after radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma

2.6 轉移組2年生存率

隨訪2年，轉移組失訪3 例。86 例鼻咽癌放療后骨轉移患者，2年生存率為67.44%（58/86）。

2.7 生存分析

根據轉移組血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 平均值作為界限，分為高危患者、低危患者，KM 曲線分析，血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 高危患者2年生存率低于低危患者（χ2=4.993、3.980、4.291，P=0.025、0.046、0.038），見圖3。

圖3 生存分析Figure 3 Survival analysis

3 討論

骨轉移是鼻咽癌放療后最常見的轉移部位，目前臨床多采用影像學方法或腫瘤標志物檢測診斷骨轉移，影像學檢查對骨轉移部位、數量、大小均具有較好的分辨率，但費用高，不適用于短期多次復查或長期監測。臨床證實，骨轉移是骨形成、骨吸收相關細胞因子構成網絡并互相作用的過程，能誘導成骨細胞或破骨細胞數量及活性改變，導致正常骨組織中骨合成動態平衡打破，進而形成骨轉移灶，骨轉換標志物隨之發生相應變化［5］。因此，骨轉換標志物有望為評價鼻咽癌骨轉移提供新方向。

骨鈣素（BGP）由成熟的成骨細胞合成，其中約1/3 表現為N-Osrteoc，N-Osrteoc 具有較好的穩定性，可維持骨正常礦化速率，其含量可特異性反映成骨速率［6-7］；TPINP 由成骨細胞合成釋放，反映成骨細胞合成骨膠原能力，二者均可用于評估成骨細胞活力［8-9］。同時學者陳雪等［10］對卵巢癌患者血清N-Osrteoc 水平進行監測發現，患者發生骨轉移后N-Osrteoc 水平顯著升高，且隨著骨轉移病灶數目增加，其血清N-Osrteoc 水平均逐漸升高，對病情評估及預后預測具有重要價值。方美群等［11］研究指出，TPINP、N-Osrteoc 二者可作為肺癌患者骨轉移診斷、療效評估的有效指標。TPINP、N-Osrteoc 僅可反映患者骨形成情況，而鼻咽癌患者放療后骨轉移的發生是由骨形成與骨吸收共同作用的病理結果，故需聯合其他指標進行診斷。

β-Crosslaps 是Ⅰ型膠原纖維在破骨細胞吸收骨質的過程中降解產生的末端肽，其釋放入血后可反映骨基質吸收情況，在評估破骨細胞活性方面具有較高的敏感性、特異性［12-14］。龐艷等［15］研究證實，β-Crosslaps 診斷對卵巢癌骨轉移具有較高的輔助診斷價值，在骨轉移診斷及病情監測中有重要意義。鼻咽癌患者腫瘤細胞分泌的甲狀旁腺激素相關蛋白（PTHrP）能促進破骨細胞介導骨吸收，從而形成骨轉移病灶，隨著腫瘤細胞生長與侵襲，骨組織損傷程度增加，骨代謝微環境遭到破壞，造成β-Crosslaps 水平升高，因此推測β-Crosslaps 與鼻咽癌患者放療后骨轉移有關。

為進一步明確聯合診斷效果，本研究發現，年齡≥50 歲、男性、Ⅲ期是發生骨轉移的影響因素，提示臨床需針對上述高風險群體強化病情評價機制，聯合檢測血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 以提高診斷效能。本研究結果可見骨代謝異常嚴重的鼻咽癌患者放療后生存率更低，可為患者預后評估提供新方案。但鼻咽癌不同類型骨轉移患者，如溶骨型、移成骨型臨床需結合具體病情予以強化對癥治療，以控制轉移灶，N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平在鼻咽癌放療后不同類型骨轉移患者否存在差異仍需臨床進一步深入探究，以期為鑒別患者骨轉移類型提供新途徑。

綜上可知，鼻咽癌放療后骨轉移患者腫瘤標志物、N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平異常升高，臨床可通過監測N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平評估鼻咽癌患者放療后骨轉移情況，有利于為患者預后評估提供參考依據。