CML、Asprosin與2型糖尿病患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系

劉書苑 陳小敏

2 型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus，T2DM）為僅次于惡性腫瘤、心血管疾病的嚴(yán)重威脅人類健康的一類內(nèi)分泌疾病，其在中老年人群中發(fā)病率較高，近年來研究表明我國T2DM 發(fā)病有逐漸年輕化的趨勢(shì)［1］。T2DM 多數(shù)早期無明顯癥狀，隨著病情發(fā)展機(jī)體內(nèi)分泌代謝異常逐漸加重，可引發(fā)微血管病變、甚至大血管病變的發(fā)生。頸動(dòng)脈粥樣硬化（carotid atherosclerotic sclerosis，CAS）是導(dǎo)致T2DM并發(fā)血管病變的的重要危險(xiǎn)因素之一，動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與內(nèi)皮功能紊亂、氧化應(yīng)激有關(guān)［2］。Nε-羧甲基賴氨酸（Nε-carboxymethyl lysine，CML）為糖基化終末產(chǎn)物，其與機(jī)體氧化應(yīng)激和促炎因子釋放存在密切關(guān)系［3］；還有研究顯示CML 參與了血管粥樣硬化的發(fā)展［4］。白脂素（Asprosin）主要源自白色脂肪組織，其與T2DM 患者代謝紊亂存在密切關(guān)系［5］。本研究對(duì)T2DM 患者CML、Asprosin 水平進(jìn)行檢測(cè)，以了解CML、Asprosin 與T2DM患者CAS的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年1月于本院住院治療的135 例T2DM 患者，根據(jù)頸動(dòng)脈超聲檢查頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）結(jié)果是否存在頸動(dòng)脈粥樣硬化CAS（IMT≥1.0 mm 或（和）有1 個(gè)以上斑塊）［6］分為CAS 組（n=79）和無CAS 組（n=56），另選取同時(shí)期年齡性別匹配的糖耐量正常的60 例健康體檢者作為對(duì)照組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合WHO 定義的T2DM 診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；均對(duì)本研究知情同意并簽署責(zé)任書；年齡≥18 歲，臨床資料完整，能夠配合完成此研究。本研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。排除標(biāo)準(zhǔn)：1 型糖尿病、其他內(nèi)分泌疾病所致糖尿病、糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病高滲性昏迷狀；肝腎等臟器嚴(yán)重功能障礙、膿毒血癥、自身免疫性疾病惡性腫瘤患者；合并精神疾病、文盲等存在交流障礙者；無法配合完成此研究者。3 組間性別、年齡、飲酒史、吸煙史、BMI 等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 頸動(dòng)脈超聲檢測(cè)

所有研究對(duì)象均通過美國惠普SONOS 5500 彩色多普勒超聲診斷儀行超聲檢查，取平臥頭仰位，探頭頻率7～11 MHz，對(duì)左右兩側(cè)頸動(dòng)脈分叉處遠(yuǎn)端1 cm 處前后壁的4 個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)側(cè)壁內(nèi)膜至中層厚度，以左右兩側(cè)較大值進(jìn)行分析。

1.2.2 血生化指標(biāo)檢測(cè)

所有研究對(duì)象收集5 mL 空腹靜脈血，3 000 r/min 離心15 min 分離血清，-80℃保存待測(cè)。采用日立7600 全自動(dòng)生化分析儀及儀器配套試劑檢測(cè)總膽固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin，HbA1C），空腹血糖（Fasting plasma glucose，F(xiàn)PG），酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定CML 及Asprosin 水平，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。嚴(yán)格依照試劑盒及儀器說明書執(zhí)行各項(xiàng)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間比較用LSD-t 檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson 檢驗(yàn)；多元線性回歸分析CML、Asprosin 的獨(dú)立影響因素，非條件一般logistic 回歸分析動(dòng)脈粥樣硬化分類變量的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組臨床一般資料及血生化指標(biāo)比較

3 組研究對(duì)象性別、年齡、飲酒史、吸煙史、BMI 比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；T2DM 合并CAS 組DBP、SBP、FPG、TC、TG、LDL-C、HbA1c、HOMA-IR、CML 及Asprosin 顯著高于NCAS 組和NC 組，HDL-C 顯著低于NCAS 組和NC 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。T2DM 合并CAS 組患者糖尿病病程顯著高于NCAS 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3 組臨床一般資料及血生化指標(biāo)比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general clinical data and blood biochemical indexes of 3 groups［n（%），（±s）］

表1 3 組臨床一般資料及血生化指標(biāo)比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general clinical data and blood biochemical indexes of 3 groups［n（%），（±s）］

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與無CAS 組比較，bP＜0.05。

因素性別（男/女）年齡（歲）病程（年）飲酒史（%）吸煙史（%）BMI（kg/m2）DBP（mmHg）SBP（mmHg）FPG（mmol/L）HbA1c（%）HOMA-IR TC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）CML（μg/L）Asprosin（pg/mL）NC 組（n=60）32/28 56.0±3.9-12（20.0）16（26.7）24.5±2.9 74.3±4.9 121.2±7.3 4.8±0.8 5.2±0.7 1.9±0.5 4.4±0.3 1.5±0.3 2.4±0.2 1.4±0.3 16.3±1.7 176.4±23.6 NCAS 組（n=56）30/26 57.2±3.9 3.7±1.9 11（19.6）15（26.7）25.5±2.6 80.2±7.9a 130.2±11.4a 8.2±1.7a 8.4±1.4a 4.7±0.9a 4.7±0.3a 1.9±0.4a 2.6±0.3a 1.2±0.3a 32.2±3.7a 253.5±24.8a CAS 組（n=79）43/36 59.3±3.7 7.4±0.9 16（20.4）22（27.8）26.2±2.2 88.9±7.7ab 138.3±11.8ab 9.6±1.4ab 10.6±2.4ab 6.8±1.8ab 5.1±0.2ab 2.2±0.4ab 3.1±0.6ab 0.9±0.2ab 54.1±5.5ab 355.1±40.6ab F/χ2值1.059 1.083 7.937 0.026 2.011 4.444 6.390 7.325 17.869 13.829 18.123 14.437 9.996 7.671 10.312 45.447 26.832 P 值0.589 0.190 0.015 0.871 0.181 0.132 0.038 0.032 0.009 0.001 0.000 0.026 0.018 0.023 0.009 0.000 0.008

2.2 T2DM 患者CML、及Asprosin 與臨床各指標(biāo)的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果，CML、Asprosin 之間并與糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C、HbA1C 存在正相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 CML Asprosin 與臨床各指標(biāo)的相關(guān)性分析Table 2 Correlation analysis of CML，Asprosin and clinical indicators in Patients

2.3 T2DM 患者CML 及Asprosin 與相關(guān)性指標(biāo)的多元線性回歸分析

分別以CML、Asprosin 為因變量，以糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C、HbA1C 為自變量，行多元線性逐步回歸分析進(jìn)一步分析結(jié)果顯示：糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、均為影響CML 及Asprosin 水平的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見表3。

2.4 T2DM 患者頸動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素的logistic 回歸分析

以是否合并頸動(dòng)脈粥樣硬化為因變量，以CML、Asprosin、糖尿病病程、FPG、HOMI-IR、TC、TG、LDL-C 為自變量，進(jìn)行l(wèi)ogistic 回歸分析，結(jié)果顯示CML、Asprosin、糖尿病病程、FPG、HOMI-IR為頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素。見表4。

3 討論

T2DM 合并大血管病變病情一旦迅速發(fā)展，可累及中、大動(dòng)脈內(nèi)膜，加速內(nèi)膜損傷和斑塊形成，最終導(dǎo)致急性卒中、心肌梗死等心腦血管事件的發(fā)生。然而，目前對(duì)于T2DM 患者頸動(dòng)脈粥樣硬化等血管病變的進(jìn)展缺乏有效的分子預(yù)測(cè)標(biāo)志物。有研究證實(shí)［8］，晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycosylation end products，AGEs）在動(dòng)脈粥樣硬化中存在關(guān)鍵作用。AGEs 通過與受體結(jié)合激活NF-kB 轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)傳導(dǎo)通路，促進(jìn)炎性細(xì)胞黏附，增加內(nèi)皮細(xì)胞通透性，從而加重內(nèi)皮功能失調(diào)和血管內(nèi)皮炎性損傷，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化形成。CML 為機(jī)體重要的AGEs 之一，研究證實(shí)其與高血壓患者IMT 以及糖尿病足截肢患者、糖尿病合并冠心病患者CAS 存在密切關(guān)系，在CAS 的演進(jìn)中有一定的早期預(yù)測(cè)價(jià)值［9-11］。因此，CML 可成為預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化有效的分子標(biāo)志物。本研究結(jié)果提示CML 與T2DM 頸動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展存在密切關(guān)系。氧化型LDL 通過損傷內(nèi)皮細(xì)胞滲透至內(nèi)膜下，參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。

表3 T2DM 患者CML、Asprosin 與相關(guān)性指標(biāo)的多元線性回歸分析Table 3 Multiple linear regression analysis of CML and Asprosin correlation indicators in Patients with T2DM

表4 T2DM 患者頸動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素的logistic 回歸分析Table 4 logistic Regression Analysis on Risk Factors of CAS in Patients with T2DM

近年來人們逐漸認(rèn)識(shí)到脂肪組織作為人體最大的內(nèi)分泌器官，在機(jī)體能量代謝中具有重要作用。T2DM 患者存在明顯的胰島素分泌異常和胰島素抵抗，往往伴有不同程度的血脂異常，加重胰島素抵抗，促進(jìn)T2DM 的發(fā)生發(fā)展。脂肪組織可分泌脂聯(lián)素、瘦素、抵抗素、內(nèi)脂素等多種脂肪細(xì)胞因子來維持機(jī)體代謝調(diào)節(jié)的穩(wěn)態(tài)。研究證實(shí)［14］，脂肪因子中瘦素抵抗，抵抗素分泌增加或脂聯(lián)素減少可導(dǎo)致胰島素抵抗，因而脂肪因子在T2DM 的發(fā)病機(jī)制起到重要作用。本研究結(jié)果提示Asprosin 不僅參與了T2DM 發(fā)病過程，還增加了T2DM 患者發(fā)生CAS 的風(fēng)險(xiǎn)。Asprosin 為近幾年新發(fā)現(xiàn)的一種以肝臟為主要靶器官的新型脂肪因子，由原纖維蛋白1（fbn1）基因的兩個(gè)外顯子（外顯子65 和外顯子66）編碼，主要由白色脂肪組織在禁食期間合成和釋放［5］。多項(xiàng)研究顯示在肥胖成人，多囊卵巢綜合征患者、2 型糖尿病、糖耐量異常等患者中血清Asprosin 水平均較健康人群明顯升高［5，12-13］，本研究結(jié)果與之相一致。在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下，機(jī)體Asprosin 呈病理性增加Asprosin 在介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能、血管炎癥反應(yīng)及動(dòng)脈粥樣硬化形成的過程中具有重要作用。本研究結(jié)果提示，CML、Asprosin 與T2DM 并發(fā)CAS 患者病情發(fā)展、糖脂代謝及胰島素抵抗存在相互作用［15-16］。

綜上所述，T2DM 患者CML、Asprosin 升高與患者糖脂代謝紊亂密切相關(guān)，并導(dǎo)致T2DM 患者并發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。對(duì)于T2DM 患者CML、Asprosin 檢測(cè)可作為T2DM 患者評(píng)價(jià)糖脂毒性、氧化應(yīng)激水平及頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生進(jìn)展的有效指標(biāo)。