14-3-3ζ蛋白在乳腺癌發生發展中的作用研究進展

董正遠 楊清玲 陳昌杰★

癌癥目前仍然是醫學界難以克服的障礙，也是世界范圍內導致死亡的常見疾病，且發病率呈上升趨勢。癌癥的治療過程中常常出現耐藥、轉移等情況，導致治療失敗，迫切需要一種新的有效的治療手段來治療癌癥，或者能夠早期發現癌癥，達到早期治療的目的。最近幾年研究人員發現了14-3-3ζ，為癌癥的早期診斷、治療以及緩解耐藥提供了新思路。14-3-3ζ 通過與靶蛋白結合影響其活性達到調節靶蛋白的目的［1］。14-3-3ζ 蛋白是一種信號轉導蛋白，介導細胞信號轉導，在細胞遷移、凋亡和侵襲等過程中起到重要作用［2-3］。14-3-3ζ也參與癌癥的發生，細胞周期進程及耐藥等過程［4］。在本文中重點綜述了14-3-3ζ 與癌癥，尤其與乳腺癌的發生及耐藥、復發、轉移相關的分子機制，探討其作為標志物、臨床診斷以及治療靶點的價值。

1 14-3-3ζ 與癌癥

14-3-3 ζ 調節多種信號通路，參與癌癥的發生發展、耐藥、轉移等過程，因此，14-3-3ζ 可能是一種新的癌癥治療分子靶點［5］。

在肺癌研究中，降低Hsp 27 或14-3-3ζ 抑制了非小細胞肺癌（non-small cell lung carcinoma，NSCLC）的侵襲和轉移，且只有Hsp 27 和14-3-3ζ互補轉染才能完全恢復Hsp 27 和14-3-3ζ 的侵襲和轉移能力［6］。在卵巢癌研究中，卵巢癌組織中14-3-3ζ 蛋白的表達水平高于正常組織，14-3-3ζ 蛋白高表達與卵巢癌TNM 分期及無轉移預后有關，低表達可抑制卵巢癌細胞增殖、遷移、及體內轉移，促進細胞凋亡［7］。在骨肉瘤相關研究中，14-3-3ζ 蛋白在正常組織中表達很低，在骨肉瘤組織中呈高表達，且骨肉瘤患者腫瘤的大小與14-3-3ζ 蛋白的表達有關［8］，為骨肉瘤的臨床診斷提供一條新的思路。在原發性肝癌研究中，Zhao JF 等［9］證實了ASH 1-miR-375-14-3-3ζ 信號軸的存在，ASH 1和miR-375 被顯著下調，而14-3-3ζ 明顯升高，研究表明ASH 1 和miR-375 作為腫瘤抑制因子，而14-3-3ζ 在原發性肝癌中起癌基因的作用。綜合以上研究可以發現，14-3-3ζ 的高表達對于癌癥的發生可能具有重要的作用，在多種癌癥組織中表達過高。

2 14-3-3ζ 與乳腺癌

乳腺癌作為女性惡性腫瘤中發病率最高的惡性腫瘤［10］，在治療過程中往往發生耐藥，而耐藥也是是影響乳腺癌治療的重要因素［11］。近幾年來，14-3-3ζ 在乳腺癌耐藥中的研究越來越重要。隨著對14-3-3ζ 的不斷研究，人們發現14-3-3ζ 不僅在乳腺癌耐藥方面起著重要作用，在乳腺癌的復發和轉移方面也至關重要。

2.1 14-3-3ζ 與乳腺癌的發生

14-3-3 ζ 表達增加始于乳腺疾病早期的不典型導管增生，同時他們在MCF10A 細胞中過表達14-3-3ζ，發現14-3-3ζ 過表達嚴重破壞腺泡結構，認為14-3-3ζ 過表達是乳腺癌發生的早期因素［12］。Rehman SK［13］的實驗發現14-3-3ζ 高表達增強了MAPK/c-Jun 信號，增加了miR-221 的轉錄使p27 CDKI 的翻譯水平下降，加速細胞增殖，且14-3-3ζmiR-221-p27 增殖軸也在乳腺癌患者中發揮作用，這表明，14-3-3ζ 的高表達可能在乳腺癌的發生發展中起著因果作用。TGF-β/Smad 信號在腫瘤中發揮雙重角色，其中14-3-3ζ 發揮關鍵調控作用［14］。TGF-β 在癌前病變細胞中作為癌癥抑制因子，但在癌細胞中作為轉移促進劑，Xu J 等［15］證實了TGF-β 通過下游效應分子Smads 發揮兩種不同的功能。在乳腺上皮細胞癌前病變中，14-3-3ζ 使p53 穩定性降低，抑制了TGF-β 的癌癥抑制功能，促進癌癥的發生；反之，14-3-3ζ 可促進TGF-β誘導骨轉移。表明14-3-3ζ 對癌癥的重要性。以上研究表明14-3-3ζ 在癌癥的發生中起重要作用，可做為一種新型分子標志物，用于乳腺癌的早期診斷。

代謝重排是癌癥的一個特征，代謝失調發生在癌癥的早期階段，并對癌癥的發生起著關鍵作用，早期乳腺腫瘤病變顯示14-3-3ζ 的表達與典型糖酵解基因的表達密切相關，尤其是乳酸脫氫酶A（lactate dehydrogenase A，LDHA）的表達，在人乳腺癌上皮細胞中14-3-3ζ 的高表達上調了LDHA，刺激早期轉化，促進乳腺癌發生［16］；支架蛋白（caffolding protein）在調節信號網絡保真度方面發揮著重要作用，缺乏這種功能往往是發生癌癥等疾病的基礎，Suen KM［17］發現典型的支架蛋白Shc 被細胞外信號調節激酶ERK 磷酸化。此外，在三陰性乳腺癌（Triple Negative Breast Cancer Tnbc）細胞株中，shc 蘇氨酸磷酸化被特異性上調。利用體外模型和生物物理分析進一步發現，Shc 蘇氨酸磷酸化可能通過募集14-3-3ζ 和Pin-1而引起Akt 和ERK 信號的升高。由此可見，體內14-3-3ζ 的異常表達可能間接地促進乳腺癌的發生，或者在重要調節途徑中發揮關鍵調控作用。

2.2 14-3-3ζ 與乳腺癌耐藥

在乳腺癌中，約70%屬于雌激素受體陽性，這種乳腺癌對激素療法較為敏感。雌激素通路相關的內分泌治療是國內外乳腺癌治療的標準方案，其中他莫昔芬作為內分泌治療的一線藥物，具有良好的效果，且經濟、低毒性，但在治療過程中常發生耐藥［18］。Bergamaschi A［19］的研究發現揭示了他莫昔芬具有上調14-3-3ζ 的作用，因為它能夠快速下調專門針對14-3-3ζ 的microRNA-451。患乳腺癌時，由于miR-451 的高表達，下調14-3-3ζ，恢復了SERMs 對內分泌抵抗細胞的生長抑制作用。此外，Liu ZR［20］進一步研究發現miR-451a 過表達可增強MCF-7 和LCC 2 細胞對他莫昔芬的敏感性。miR-451a 與14-3-3ζ 的表達呈負相關，14-3-3ζ低表達增加細胞凋亡，14-3-3ζ 與miR-451a 的相互調節抑制對他莫昔芬的抵抗作用，所以14-3-3ζ 對他莫昔芬耐藥具有關鍵調控作用。14-3-3ζ 作為內分泌治療失敗風險的重要預測指標，對生長因子信號轉導有重要影響，且促進細胞存活和抵抗內分泌療法，所以靶向14-3-3ζ 蛋白及其共調控蛋白（如FOXM 1）在恢復內分泌敏感性方面具有重要價值［21］。由此可見，14-3-3ζ 的出現為逆轉乳腺癌耐藥打開了新的大門。

2.3 14-3-3ζ 與乳腺癌復發

為了治愈或延緩乳腺癌患者的生存周期，治療方法有很多，比如：手術治療、放療、化療、內分泌療法等，因為治療后的復發，使得患者的生存時間大大縮短。迫切需要找到腫瘤復發的原因或分子機制。目前研究發現14-3-3ζ 的表達可能是乳腺癌復發的分子機制［22］。在腫瘤的復發中，14-3-3ζ 的陽性率為70%～75%，而原發腫瘤的陽性率為45%［23］。在乳腺腫瘤中，14-3-3ζ 高水平的基因特征包括許多與有絲分裂和胞質分裂有關的功能，包括極光激酶-B、馬球樣激酶-1、CDC25B 和birc5，該基因特征與乳腺癌早期復發相關［24］，從基因層面描述了14-3-3ζ 蛋白與乳腺癌復發的關系，具有重要參考價值。Li Y 等［25］通過整合基因組學，從染色體8q22 中發現了少數高表達和擴增的基因，這些基因與早期疾病復發有關，siRNA 介導兩種基因，即抗凋亡基因14-3-3 ζ 和溶酶體基因LAPTM4B，且LAPTM4B 和14-3-3ζ 的8q22 擴增和高表達對復發有一定的抑制作用。14-3-3ζ蛋白狀態與腫瘤分級、大小和雌激素受體α（ERα）顯著相關，而且14-3-3ζ蛋白的高表達也與復發部位有關［26］。綜合以上研究可以發現14-3-3ζ 的高表達與乳腺癌復發密切相關，對以后乳腺癌的診治有重要價值依據。

2.4 14-3-3ζ 與乳腺癌轉移

目前，轉移仍然是乳腺癌死亡的主要原因之一。轉移使乳腺癌治療的難度加大，如何控制乳腺癌轉移迫在眉睫。Lu J 等［27］研究發現，14-3-3ζ高表達降低細胞粘附，誘導EMT 發生，介導非浸潤性導管原位癌（noninvasive ductal carcinomas in situ DCIS）向浸潤性乳腺癌（Invasive breast cancer IBC）發展。且高表達ErbB 2 和14-3-3ζ 的乳腺癌患者的轉移率高于僅表達ErbB 2 的患者，14-3-3ζ的高表達促使乳腺上皮細胞間質化，促進了乳腺癌細胞浸潤轉移；TGF-β 在癌細胞中起促進轉移的作用，14-3-3ζ 能穩定乳腺癌細胞中的Gli2，促進TGF-β 誘導骨轉移［15］。14-3-3ζ 蛋白的高表達不僅與復發部位有關而且有肺和胸壁遠處轉移的傾向，減少其表達或干擾其作用可能會降低乳腺癌的轉移并改善臨床癥狀和乳腺癌患者的預后，預示著14-3-3ζ 蛋白可能會成為乳腺癌新的治療靶點［26］。此外，14-3-3ζ 在乳腺癌中是多種信號調節網絡的關鍵調控因，14-3-3ζ 的高表達使p53 下降，破壞乳腺上皮細胞并促進乳腺上皮細胞EMT，使轉移發生［28］。14-3-3ζ 與磷酸化的YAP1 相互作用，使其隔絕于細胞質，并且激活14-3-3σ，減弱TGF-β 的抑癌作用，進一步促進乳腺癌細胞的轉移［29］。

3 小結與展望

本篇文章介紹了14-3-3ζ 與腫瘤尤其是乳腺癌相關關系。14-3-3ζ 作為一種潛在的靶標，能夠調節相關基因或靶蛋白，進而影響細胞的生長周期、調控細胞凋亡等。14-3-3ζ 在腫瘤中有較高的表達，對腫瘤尤其是乳腺癌的發生發展至關重要，甚至對乳腺癌的耐藥、復發、轉移等有重要調控作用。隨著對14-3-3ζ 的深入研究，更多14-3-3ζ 蛋白與腫瘤的關系不斷被發現，有望成為新的腫瘤標志物，為乳腺癌臨床診療提供新的依據。雖然目前對乳腺癌的耐藥、復發、轉移等方面還沒有理想的解決方法，但14-3-3ζ 的出現給了乳腺癌相關機制研究新的啟示，我們相信隨著對14-3-3ζ 與乳腺癌相關機制的深入探索，未來不久在乳腺癌診療方面將會有大的突破。