香菇多糖對力竭運動大鼠外周血炎癥反應的抑制作用*

盧 川，李 娟

（1.廣西警察學院警察體育教研部，廣西 南寧 530000；2.廣西民族大學體育與健康科學學院，廣西 南寧 530006）

反復力竭運動導致機體產生炎癥，具體表現為炎性介質、促炎因子分泌增多。已有研究證實，炎癥是導致疾病發生、發展的重要因素，如常見的高血壓、高血糖、高血脂等慢性病都與自身的炎癥反應密切相關[1]，目前認為，腫瘤的發生也是自身炎癥累積導致[2]。因此，控制、減少炎癥的發生、發展，具有重要意義。

多糖是香菇 (Lentinus edodes）中富含的活性成分，目前提取香菇多糖的方法已經十分成熟。體外藥理試驗中，香菇多糖具有抗氧化、提升免疫力等功效[3]，大鼠體內試驗也表明香菇多糖有改善腸道功能的作用[4]。腸道是機體最大的細菌聚集地，研究表明通過改善腸道功能，可有效改善機體的炎癥狀態[5]。

本試驗通過建立大鼠反復力竭運動模型，探討香菇多糖對大鼠體重、誘導型一氧化氮合酶（iNOS）、白介-1β（IL-1β）、白介-6（IL-6）、白介-10（IL-10）的影響，旨在為香菇多糖在運動領域的應用提供相關科學依據。

1 試驗對象與方法

1.1 試驗動物及分組

成年雄性SD大鼠53只，8周齡，平均體質量（209±14）g，購于桂林醫學院實驗動物中心。試驗前對大鼠進行為期3 d的適應性游泳練習，淘汰3只懶惰大鼠，剩余大鼠隨機分為5組（每組10只），分別為安靜組、運動組、低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組。大鼠體質量、力竭游泳的比較結果見表1。

表1 大鼠體質量、力竭游泳的比較（±s）Tab.1 Comparison of body weight and exhaustive swimming of rats（±s）

表1 大鼠體質量、力竭游泳的比較（±s）Tab.1 Comparison of body weight and exhaustive swimming of rats（±s）

組別 數量/只體重/g力竭游泳時間/min安靜組 10208.42±14.28 55.85±6.73運動組 10209.11±13.32 56.01±5.29低劑量運動給藥組 10中劑量運動給藥組 10 208.12±13.31 56.88±5.31高劑量運動給藥組 10 208.77±14.98 55.23±6.21 209.09±14.21 57.01±5.21

由表1可知，試驗前對大鼠體重、力竭游泳時間進行測定，記錄顯示5組大鼠體重、力竭游泳（力竭標準：大鼠頭沒入水內約8 s，撈出吹干后，放桌面無法進行翻正反射）時間均無顯著性差異，符合試驗要求。

1.2 香菇多糖的制備

選用廣西金秀大瑤山野生香菇，厚菇。香菇買回后曬干、粉碎、稱重，采用石油醚脫脂，脫脂后按料液比1:20的比例加入90℃熱水浸提2次，收集的濾液添加無水乙醇靜置12 h后過濾收集沉淀，80%乙醇洗滌沉淀多次，干燥后得香菇多糖粗品[6]。多糖粗品呈白色粉粒狀，測定多糖含量87%。

1.3 試劑與儀器

1.3.1 試劑

iNOS測定試劑盒、IL1β檢測試劑盒、IL-6檢測試劑盒、IL-10檢測試劑盒，購自南京建成生物工程研究所。

1.3.2 儀器

小動物游泳缸（100 cm×60 cm×80 cm），水流為 100 L·h-1，水溫為（30±1）℃，水深為 60 cm，自制；NVA S6801全自動生化分析儀，山東諾安諾泰信息系統有限公司；DL-1005型冷卻液循環泵，西化儀有限公司；BCD-203A榮升冰箱，榮升冰箱有限公司；TGL-16G臺式高帶冷凍離心機，北京沃德生物醫學儀器公司。

1.4 動物訓練方案與給藥方案

1.4.1 動物訓練方案

安靜組不運動，正常飲食、進水；運動組、低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組，進行隔天1次的力竭游泳訓練，一共訓練20 d。

1.4.2 給藥方案

低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組每天上午9:00～10:00灌服香菇多糖溶液，每日劑量分別為 15 mg·kg-1、30 mg·kg-1、45 mg·kg-1，使用前采用生理鹽水按 6 mg·mL-1配置香菇多糖溶液。安靜組、運動組同時間灌服同體積生理鹽水。

1.5 指標的測定與方法

1.5.1 大鼠取材與勻漿

運動組、低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組最后1次訓練后，稱重，摘眼球取血約2.0 mL，肝素抗凝，靜止25 min，以4℃、3 500 r·min-1離心15 min，收集上清液，冰箱調制4℃保存。安靜組大鼠以同樣方式處理。

1.5.2 指標的測定

采用雙抗體夾心ELISA法檢測血清iNOS、IL-1β、IL-6、IL-10的濃度，測試過程按試劑盒說明書進行[7]。

1.6 數據處理

2 試驗結果

2.1 大鼠體質量、力竭游泳時間、iNOS的比較結果

大鼠體質量、力竭游泳時間、iNOS的測定結果見表2。

表2 大鼠體質量、力竭游泳時間、iNOS的測定結果（±s,n=10）Tab.2 Determination results of body weight,exhaustive swimming time and iNOS of rats（±s,n=10）

表2 大鼠體質量、力竭游泳時間、iNOS的測定結果（±s,n=10）Tab.2 Determination results of body weight,exhaustive swimming time and iNOS of rats（±s,n=10）

注：*表示與安靜組相比，P＜0.05差異顯著；**表示與運動組相比，P＜0.01差異顯著。Note:*means compared with the quiet group,there is a significant difference at the level of P＜0.05,**means compared with the exercise group,there is a significant difference at the level of P＜0.01.

組別 體重/g力竭游泳時間/min iNOS/（U·mL-1）安靜組 270.37±17.33- 0.73±0.01運動組 234.22±12.11*62.01±6.43 0.31±0.04*低劑量運動給藥組 257.27±13.27**中劑量運動給藥組 261.23±13.14**73.21±7.21**0.51±0.04**高劑量運動給藥組 259.23±13.22**71.23±7.21**0.50±0.02**71.16±7.22**0.49±0.03**

如表2所示，與安靜組相比，運動組、低劑量組、中劑量組、高劑量組體重、iNOS均低降低，差異顯著（P＜0.05）；與運動組相比，低劑量組、中劑量組、高劑量組體重、力竭游泳時間、iNOS均升高，差異顯著（P＜0.05）；與低劑量運動給藥組相比，中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組體質量、iNOS、力竭游泳時間均無顯著性差異；與中等劑量為最佳相比，高劑量運動給藥組體質量、iNOS、力竭游泳時間均無顯著性差異。

2.2 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比較結果

不同劑量組大鼠IL-1β、IL-6、IL-10測定比較結果見表3。

由表3可知，與安靜組相比，運動組、低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組IL-1β、IL-6含量升高，IL-10含量降低，差異顯著（P＜0.05）；與運動組相比，低劑量運動給藥組、中劑量運動給藥組、高劑量運動給藥組IL-1β、IL-6均降低，IL-10升高，差異顯著（P＜0.05）；與低劑量運動給藥組相比，中劑量運動給藥組、高劑量運動藥組IL-1β、IL-6、IL-10均無顯著性差異；與中劑量運動給藥組相比，高劑量運動藥組IL-1β、IL-6、IL-10均無顯著性差異。

表3 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比較結果（±s,n=10）Tab.3 Comparison results of IL-1 β,IL-6 and IL-10 in rats（±s,n=10）

表3 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比較結果（±s,n=10）Tab.3 Comparison results of IL-1 β,IL-6 and IL-10 in rats（±s,n=10）

注：*表示與安靜組相比，P＜0.05差異顯著；**表示與運動組相比，P＜0.01差異顯著。Note:*means compared with the quiet group,there is a significant difference at the level of P＜0.05,**means compared with the exercise group,there is a significant difference at the level of P＜0.01.

IL-1β安靜組 20.63±4.22 53.88±5.62 25.44±3.22組別含量/（ng·mL-1）IL-6 IL-10運動組 70.37±7.21*87.11±8.89* 8.21±2.01*低劑量運動給藥組 43.21±5.64**71.22±7.72**22.46±3.21**中劑量運動給藥組 42.20±5.60**69.34±6.71**19.46±2.25**高劑量運動給藥組 44.22±5.13**68.27±6.23**20.46±2.11**

3 討論

體質量是代表生長發育的重要指標，力竭游泳時間是代表運動能力的重要指標[8]。本試驗中，大鼠經20 d隔天1次的力竭訓練后，運動組大鼠體質量顯著降低，力竭游泳時間較運動給藥組少，說明香菇多糖能抑制力竭游動，提示香菇多糖能促進機體生長發育，提升運動能力。

iNOS是較典型的炎性介質，安靜狀態下細胞內不表達，在過度訓練或者病理狀態下可以過度表達，在催生一氧化氮（NO）的同時伴隨大量毒性物質產生，引發機體的炎癥反應[9]。本試驗中，力竭運動引起機體外周血iNOS過量表達，而香菇多糖能減少i－NOS的產生，說明香菇多糖對力竭運動誘導的炎性介質的產生具有抑制作用。

炎性細胞因子在炎癥反應中具有主導作用，在正常生理情況下，體內抗炎因子與促炎因子呈動態平衡狀態[10]。病理或者大強度運動下平衡被打破，體內促炎因子分泌增多，引發炎癥狀態。L-1β、IL-6屬于促炎因子，IL-10是典型的抗炎因子[10]。本試驗中，力竭運動誘導L-1β、IL-6分泌增多，IL-10分泌減少，而香菇多糖能抑制上述現象，表明香菇多糖通過抑制促炎因子分泌、提升抗炎因子分泌，抑制機體炎癥反應。

4 結論

香菇多糖能抑制力竭運動誘導的機體體重減輕、力竭游泳時間縮短，外周血iNOS、L-1β、IL-6濃度升高、IL-10濃度降低。說明香菇多糖通過抑制炎癥介質，抑制促炎因子分泌，提升抗炎因子分泌，促進機體的生長發育，提升運動能力。