環(huán)維黃楊星D對大鼠長期肝毒性試驗研究

戴平 黃鳳香 韋漢燕 廖迎

摘要：目的：研究環(huán)維黃楊星D長期給藥對雌性大鼠產(chǎn)生急性毒性的情況。方法：將SD雌性大鼠隨機分為四組，分別為空白組、低劑量組（2mg/kg）、中劑量組（6mg/kg）和高劑量組（12mg/kg）連續(xù)灌胃3 個月，三個月后處死雌鼠標(biāo)本收集，檢測血清AST，ALT，MDA的活性，并且觀察雌鼠肝臟的變化。結(jié)果：高劑量組（12mg/kg）血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（196.29±24.16），谷丙轉(zhuǎn)氨酶（167.54±40.23）顯著高于空白組（P*<0.05），且肝臟表面有一定程度變性壞死。結(jié)論：大劑量環(huán)維黃楊星D（12mg/kg）灌胃可導(dǎo)致SD大鼠出現(xiàn)顯著的肝毒性。

關(guān)鍵詞：環(huán)維黃楊星;SD大鼠;肝毒性

[Abstract]Objective：to study hepatotoxicity of cyclovirobuxine D which has been given to the female rats for a long time.Methods：female rats are divided into4groups，control group，the low dosage group，middle dosage group，high dosage group of cyclovirobuxine D.Female rats are given with cyclovirobuxine D for3months.All rats were sacrificed at the3month and samples were collected.Serum ALT，AST，MDA level were determined and observe livers pathology changes.Results：serum AST（196.29±24.16）and ALT（67.54±40.23）in dose group are higher significantly than those in control groups.Besides，the livers in dose group（12mg/kg）are thanatosis in a certain.Conclusion：dose group（12mg/kg）given cyclovirobuxine D for a long time appears hepatotoxicity significantly.

[Keywords]cyclovirobuxine D;SD rats;hepatotoxicity

環(huán)維黃楊星D系小葉黃楊木黃楊寧中提取的生物堿加輔料制成的中藥片劑的有效成分，為黃楊科植物中的小葉黃楊及其同屬植物中提取的有效單體成份，臨床上主要用于治療心血管疾病，是我國首創(chuàng)的治療心腦血管的新藥。本文通過連續(xù)三個月給藥，觀察不同劑量的環(huán)維黃楊星D對雌性大鼠肝臟的影響情況。

1材料

黃楊寧片，每片含環(huán)維黃楊星D1mg，由山西同達藥業(yè)有限公司提供。

SD大鼠，體重120～150g，雌鼠，采自桂林醫(yī)學(xué)院SPF級實驗動物室。

谷草轉(zhuǎn)氨酶（ALT）（批號：C010-2）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（AST）（批號：C009-2）、丙二醛（MDA）（批號：A003-1）生化試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

2方法

黃楊寧片實驗前研磨至粉狀，用雙蒸水配成所需濃度，加入適量冰醋酸助溶，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)PH至中性。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周隨機分為四組，每組8 只。分別為空白對照組（給予同體積蒸餾水）、低劑量組（2mg/kg/d）、中劑量組（6mg/kg/d）和高劑量組（12mg/kg/d）。各組采用灌胃給藥，灌胃體積6ml/kg，每天給藥1 次，每周根據(jù)體重變化調(diào)整給藥劑量。連續(xù)給藥3個月，于第三個月末次給藥24小時后眼眶取血，脫椎處死，檢測血清生化指標(biāo)，并取肝臟進行病理觀察。

2.1? 一般檢查

每天觀察并記錄動物的一般活動及精神狀態(tài);每隔2 天稱量1 次體重以及攝食量，觀察體重與攝食量的動態(tài)變化。

2.2? 血液生化檢測

大鼠眼眶取血，離心3500rpm離心10min，取上清液，用酶標(biāo)儀檢測血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的活性及丙二醛（MDA）的含量。

2.3? 病理學(xué)觀察

取大鼠肝臟，肉眼觀察肝表面病變情況。

2.4? 統(tǒng)計學(xué)處理

計量資料以X±S n=8表示，采用SPSS1.6統(tǒng)計軟件處理，各組間比較用t檢驗，多組間比較用方差分析。

3???? 結(jié)果

3.1? 對大鼠體重的影響

動物一般體征：大鼠灌胃2 周后，高劑量組體重出現(xiàn)增長緩慢的現(xiàn)象，而其他組大鼠體重正常增長。在給藥3 個月后高劑量組總體出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、精神不振、呼吸急促、體重增長緩慢的現(xiàn)象，其中有4 只大鼠在給藥一個月后出現(xiàn)大便稀溏的現(xiàn)象，并有2 只大鼠在給藥2 個月后死亡。各組攝食量均在正常范圍內(nèi)，與高劑量給藥組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異，P<0.05，反應(yīng)靈活，精神狀況良好。見表1。

3.2? 對大鼠血液生化指標(biāo)的影響

環(huán)維黃楊星D連續(xù)給藥三個月，高劑量組血清AST、ALT顯著高于其他組（P<0.05），見表2。

3.3? 肝表面現(xiàn)象

各組環(huán)維黃楊星D連續(xù)給藥三個月的大鼠肝臟變化對比明顯。空白對照組肝臟表面光滑，邊緣整齊，低劑量和中劑量給藥組無明顯變化。而高劑量給藥組肝臟表面較其他組有明顯肝臟表面粗糙，表面可見白色不規(guī)則形狀，邊緣不規(guī)則，肝細胞大片狀壞死，炎細胞浸潤，有少量纖維組織增生。

4討論

本實驗初步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)高劑量環(huán)維黃楊星D的實驗大鼠血清生化指標(biāo)ALT，AST，MDA與對照組和低劑量組比較有顯著升高，肝臟表面現(xiàn)象觀察結(jié)果顯示，一定劑量的環(huán)維黃楊星D連續(xù)灌胃給藥可致肝臟損傷。

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[基金]廣西壯族自治區(qū)高等學(xué)校科學(xué)研究項目（自然科學(xué)類），項目編號：KY2015LX278