SPE-GC-MS/MS同時測定烏牛早茶葉中13種農藥殘留

雷海燕

摘要：選取浙江云和縣茶葉烏牛早50份，經乙腈提取， 旋轉蒸發，用Cleanert TPT固相萃取柱凈化，濃縮，內標法定量，采用GC-MS/MS測定13種農藥殘留。結果表明，50份樣品中均未檢出13種農藥殘留，說明該地山區氣候優勢，烏牛早農殘檢測率低，為該地茶葉產業發展提供一定的基礎理論。

關鍵詞：氣相色譜-串聯質譜法（GC-MS/MS）;固相萃取（SPE）;茶葉;烏牛早;農藥殘留

中圖分類號：O657.7+1;S571.1 ? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2020）17-0142-03

Abstract： To simultaneously determine 13 pesticides in 50 samples of local tea Wuniuzao. The samples extracted by acetonitrile and dried by rotated， purified by Cleanert TPT column，then subjected to GC-MS/MS using internal standard method. The treated samples pesticide residues were not detected. The results showed that the Wuniuzao of the local mountain area were very low. This paper provides some basic theory for the development of local tea industry.

Key words： GC-MS/MS; SPE; tea; Wuniuzao; pesticide residues

烏牛早比洞庭碧螺春、西湖龍井早上市一個月，在國內早茶市場獨占鰲頭。中國是茶葉主要的生產、消費和出口國。茶葉農藥殘留限量值日趨嚴格，截至2016年12月31日，歐盟對茶葉中農殘限量要求已達493項，對未涉及的農殘則依據默認標準（0.01 mg/kg） 進行判定[1]。GB 2763—2016 《食品中農藥殘留限量標準》[2]中茶葉的檢測項目也增加至48項，最大殘留限量值都有大幅降低。

目前，國內外對茶葉中 OCPs（有機氯農藥）殘留的檢測方法主要采用氣相色譜法（Gas chromatography，GC）[3-5]、氣相色譜-質譜法（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）[6，7]、氣相色譜-串聯質譜法（Gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[8-12] 等。氣相色譜-三重四級桿串聯質譜（Gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry，GC-QqQ-MS/MS）具有選擇性好、特異性好、靈敏度高、抗干擾能力強和定量準確等優點， 大大提高了化合物定性和定量的準確性[13]。

本試驗采用固相萃取-氣相色譜-串聯質譜法（SPE-GC-MS/MS）測定早茶烏牛早中13種農藥殘留，為浙江云和縣茶葉產業發展提供一定的理論基礎。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

烏牛早為市售干制茶，粉碎研磨后備用。

TSQ8000 Evo氣相色譜-三重四極桿串聯質譜，配電子轟擊離子源，賽默飛世爾科技公司;全自動固相萃取儀、全自動平衡濃縮儀;高速離心機，賽默飛世爾科技公司;電子天平，瑞士METTLER TOLEDO公司;超純水儀，美國 Millipore公司;渦旋振蕩器，江蘇其林貝爾公司。

13種農藥標品;順式環氧七氯內標，99.36%，德國Dr Ehrenstorfer公司。乙腈、正己烷、丙酮、甲苯均為色譜純，美國Fisher Chemical公司;Cleanert TPT固相萃取柱，2 g/12 mL，天津博納艾杰爾科技;無水硫酸鈉 （Na2SO4）。

1.2 方法

1.2.1 標準溶液配制 準確吸取1 mL各混合標品于10 mL容量瓶中，用正己烷∶丙酮（1∶1，V∶V）定容，得到濃度為10 mg/L的混合標準儲備溶液，儲存于-18 ℃備用。準確稱取25.0 mg（精確至0.1 mg） 的順式環氧七氯標準品，用正己烷稀釋定容至25 mL，得到濃度為1 000 mg/L 的標準儲備液;用正己烷稀釋標準儲備液，配制成20 mg/L的標準中間液，儲存于-18 ℃備用。

1.2.2 樣品前處理 準確稱取烏牛早樣品 2.50 g（精確至0.01 g），置于50 mL聚乙烯離心管中，加入 20 mL 乙腈超聲30 min;加入無水硫酸鈉 2 g置于旋轉蒸發器上振蕩提取5 min，離心3 min（5 000 r/min），吸取上清液，轉入雞心瓶，殘渣用20 mL乙腈再提取1次，合并提取液，在40 ℃ 水浴下旋轉濃縮至約1 mL，待凈化。加入20 mg/L順式環氧七氯內標溶液0.1 mL。

1.2.3 儀器條件 色譜柱為 Agilent HP-5MS （30 m×0.25 mm，0.25 μm）;恒流模式，流速為1.2 mL/min;進樣口溫度250 ℃;載氣為氦氣（He），純度99.999%;初始柱溫 50 ℃;進樣量 1 μL;溶劑延遲 3 min。EI 離子源溫度 230 ℃;EI 源能量為 79 eV;燈絲電流為 35 μA;輔助加熱器 280 ℃;四級桿溫度150 ℃;淬滅氣體（He）流量 2.3 mL/min，碰撞氣體N2流量 1.2 mL/min。

用3 mL丙酮、6 mL正己烷依次淋洗弗羅里硅土固相萃取柱，棄去淋洗液，然后用6 mL丙酮-正己烷洗脫，收集全部洗脫液于10 mL試管中，45 ℃氮吹至近干，用丙酮溶解定容至0.5 mL，供上機測定。

2 結果與分析

2.1 各化合物質譜條件優化

該方法檢測代謝組分中有同分異構體，碎片分離13 種組分進行全掃描，確定目標農藥組分豐度高且質量數較大的離子作母離子，選擇SRM模式對待測組分進行掃描（表1）。

2.2 各化合物標準色譜圖

按表1確定的各農藥質譜參數， 13種農藥的標準GC-MS/MS的總離子流色譜見圖1。

2.3 各化合物標準曲線

按照 “1.2.3”和“2.1”確定的儀器色譜、質譜條件進行測定，以各農藥峰面積相對應的溶液濃度繪制標準曲線。13種農藥回歸方程及相關系數見表2 。由表2可以看出，13種農藥在質量濃度 0.01～1.00 μg/mL線性關系良好，且相關系數均大于0.996 0。

3 結論

采用該方法檢測早茶烏牛早樣品50 份，未檢出13種農藥殘留。近年來，云和縣形成了以食用菌、云和雪梨、茶葉、板栗等為代表的主導產業，茶葉是該縣發展的一項新興產業。據統計，茶園面積 ? ? ? ?2 017.8 hm2，其中采摘茶園1 540 hm2，總產量 660 t，產值4 765萬元[14]。

烏牛早在云和縣引種成功，當地種植戶充分利用山區光、熱、水、氣不同的生態環境特點，發展形成了以石塘鎮朱村、梅源村為主的茶葉主要種植區域。近年來，政府加大政策支持，2009 年云和縣出臺了《中共云和縣委云和縣人民政府關于加快推進農村改革發展的實施意見》，為大力發展高效生態農業，進一步提升農業產業化經營水平，提高云和農業效益和農產品市場競爭力，制定了一系列政策。

烏牛早的種植在一定程度上解決了當地農戶就業問題，帶來了增收，但茶產業如何更好地推動一二三產業融合，形成完善的農業產業鏈，需要在提高茶葉的品質和檔次方面加強引導，重視農產品質量和不斷提高加工技術。

參考文獻：

[1] 任明興，楊 勇，沈若峰，等. ?我國出口茶葉主要目標市場技術性貿易措施及對策[J]. ?中國茶葉加工，2017（5/6）：15-20.

[2] GB 2763—2016，食品安全國家標準食品中農藥殘留限量標準[S].

[3] 胡付照，陳正行，李 鶴，等. ?茶葉中農藥殘留標準及檢測方法研究進展[J]. ?食品與生物技術學報，2018，37（10）：1009-1014.

[4] 蔣定國， 方從容， 楊大進， 等. ? 測定茶葉中 27 種有機氯和擬除蟲菊酯農藥多組分殘留氣相色譜法[J]. 中國食品衛生雜志， 2005， 17（5）：385-389.

[5] LIU D， MIN S. Rapid analysis of organochlorine and pyrethroid pesticides in tea samples by directly suspended droplet microextraction using a gas chromatography-electron capture detector[J]. J Chromatogr A， 2012， 1235： 166-173.

[6] JI J， DENG C， ZHANG H， et al. Microwave-assisted steam distillation for the determination of organochlorine pesticides and pyrethroids in Chinese teas [J]. Talanta， 2007， 71（3）： 1068-1074.

[7] LI Y， CHEN X， FAN C， et al. Compensation for matrix effects in the gas chromatography-mass spectrometry analysis of 186 pesticides in tea matrices using analyte protectants[J]. J Chromatogr A， 2012， 1266： 131-142.

[8] 榮杰峰， 韋 航， 黃伙水， 等. 羥基化多壁碳納米管分散固相萃取/氣相色譜-質譜測定茶葉中有機氯農藥和擬除蟲菊酯類農藥殘留[J]. 分析測試學報， 2016，35（1）： 8-15.

[9] HOU X，LEI S R，GUO L A，et al. Optimization of a multi-residue method for 101 pesticides in green tea leaves using gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. ?Rev Bras Farmacogn，2016， ?26（4）： 401-407.

[10] CAJKA T，SANDY C，BACHANOVA V，et al. Streamlining sample preparation and gas chromatography-tandem mass spectrometry analysis of multiple pesticide residues in tea[J]. Anal Chim Acta， 2012， 743： 51-60.

[11] 李福敏，邵 林. QuEChERS-氣相色譜-三重四級桿串聯質譜法測定茶葉中的12種有機氯農藥殘留[J]. 食品安全質量檢測學報，2018，9（6）：1377-1382.

[12] 羅 彤，付文雯，郭盧云，等. ?QuEChERS-氣相色譜-三重四級桿串聯質譜法測定茶葉中草甘膦和氨甲基膦酸殘留[J]. ?食品研究與開發， 2018，39（14）：153-158.

[13] 袁 河，趙振宇，吳建霞，等. 程序升溫汽化-氣相色譜-三重四極桿串聯質譜法（PTV-GC-MS/MS）同時測定小麥中的 109 種農藥殘留[J]. ?釀酒科技，2016（6）： 120-128.

[14] 練美林，藍李真. 云和縣主要農產品產地初加工現狀及建議[J]. 農業科技通訊，2016（11）：181-182.