高效液相色譜法測定飲用瓶裝水中塑料添加劑

潘昱君

摘 要：建立了飲用瓶裝水中塑料添加劑1010、330、1076、168四種抗氧劑的高效液相色譜含量檢測方法。方法：色譜柱為Agilent TC-C18，250mm×4.6mm，5μm，以甲醇為流動相，檢測波長200nm，流速為1.0mL/min。結果：添加劑09、10、11、12分別在0.01852μg/ml～10.05μg/ml、0.004478μg/ml～9.930μg/ml、0.03428μg/ml～10.33μg/ml、0.01266μg/ml～10.17μg/ml濃度范圍內與峰面積成良好的線性關系，r值均大于0.999，平均回收率為85～88%。該方法簡便、準確、重復性好，可用于飲用瓶裝水中抗氧劑的含量測定。

關鍵詞：飲用瓶裝水;塑料添加劑;高效液相色譜;檢測

0 引言

瓶裝飲用水的質量關乎到消費者的健康問題，塑料瓶常由聚丙烯、聚乙烯等材料吹塑加工而成，具有透明度高、易于老化等特點，因此在飲用水塑料瓶的加工過程中會添加抗氧劑，以保證飲用水的質量安全，但是過量的抗氧劑又會影響到飲用者的健康。因此建立一種快速、便捷的飲用水中抗氧劑檢測方法顯得尤為必要。根據歐洲化學品管理局（ECHA）可知添加劑1010（09）、330（10）、1076（11）、16809（12）的限度值（口服途徑）分別為135mg/天、350mg/天、64mg/天、58mg/天。《中國居民膳食指南》指出，健康成年人每天需水2500ml左右，按2500ml計，各添加劑的限度值為54μg/ml、140μg/ml、25.6、23.2μg/ml。本研究參考相關文獻，確立了液相色譜同時測定四種抗氧化劑的最優方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

Waters 1525-2996高效液相色譜儀，Waters公司;ASE-24固相萃取儀（ASE-24）：天津奧特賽恩斯儀器有限公司;固相萃取小柱：MedLut C18 Column，MEDLUT SPE公司;

1.2 材料

添加劑09對照品：SIGMA-ALDRICH，CAS：6683-19-8，批號：MKBV3769V，含量：98%，簡稱EP09;添加劑10對照品：SIGMA-ALDRICH，CAS：1709-70-2，批號：MKBF6188V，含量：99.8%，簡稱EP10;添加劑11對照品：SIGMA-ALDRICH，CAS：2082-79-3，批號：MKBP4693V，含量：99.3%，簡稱EP11;添加劑12對照品：SIGMA-ALDRICH，CAS：31570-04-4，批號：MKBW5387V，含量：98%，簡稱EP12;瓶裝水：娃哈哈及農夫山泉純凈水。甲醇、四氫呋喃均為色譜純級。

2 方法與分析

2.1 樣品前處理方法

為提高檢測靈敏度，同時排除水中其他基質的干擾并提高檢測靈敏度，采用固相萃取的方法對飲用水進行處理，采用C18固相萃取小柱對飲用水中各添加劑吸附后再洗脫進行測定。

樣品的處理方法：固相萃取柱使用前分別用3ml甲醇和3ml水活化，量取100ml飲用水置100ml量瓶中，加入甲醇3.0ml，搖勻，得供試品溶液，上述溶液通過固相萃取柱，用5ml水淋洗后分別用5ml甲醇，4ml四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用甲醇稀釋至10ml，即得。

2.2 液相色譜條件

流動相：甲醇;色譜柱：Agilent TC-C18，250mm×4.6mm，5μm;檢測波長：220nm;流速：1.0ml/min;混合溶劑：甲醇：二氯甲烷=1：1。

2.3 對照液制備及檢測

（1）對照定位溶液的配制精密稱取抗氧劑09、10、11及12各60.0mg，分別置于10ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻;然后精密量取上述溶液2.0ml，分別置50ml量瓶中，加甲醇定量稀釋至刻度，搖勻。

（2）對照液（抗氧劑）的檢測分別精密量取添加劑09、10、11、12定位溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由色譜圖可知，添加劑09、10、11、12保留時間分別為6.975min、8.018min、13.737min、17.258min。

2.4 系統適用性試驗

精密量取對照定位溶液20μl注入液相色譜儀，按上述色譜方法測定，結果顯示，4種抗氧劑各成分峰分離度>4.66，分離度良好。

2.5 檢測限與定量限的測定

分別取添加劑09、10、11、12對照品適量，用混合溶劑混合逐級稀釋降低至需要濃度，在上述色譜系統條件下進樣測定，檢測限以信噪比S/N為2～3倍計;定量限以信噪比S/N為10計。結果見表1。

2.6 線性關系試驗

線性貯備溶液的配制：取添加劑09、10、11、12對照品各約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備溶液。

線性關系溶液的配制：分別精密量取貯備溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得線性關系溶液1、2、3、4、5。

分別取上述溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積A為縱坐標，濃度C（ug/mL）為橫坐標，行線性回歸，線性關系結果見表2。

2.7 系統精密度試驗

取線性關系溶液3，精密量取20μl注入液相色譜儀，連續進樣6次，記錄色譜圖。結果四種抗氧劑09、10、11、12峰面積的RSD分別0.31%、0.29%、0.24%、0.32%，結果表明本方法系統精密度良好。

2.8 穩定性試驗

穩定性試驗是為了確定添加劑溶液放置一定時間后，檢測結果不受影響的程度。

供試品溶液的配制：取添加劑09、10、11對照品各約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，得溶液A;

取添加劑12對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，得溶液B;

取溶液A、B各3ml置同一50ml量瓶中，加甲醇定量稀釋至刻度，搖勻，得穩定性試驗供試品溶液;

取溶液B 3ml置50ml量瓶中，加甲醇定量稀釋至刻度，搖勻，得添加劑12穩定性試驗供試品溶液;

檢測及結果：室溫避光放置，分別于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12小時取上述溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明本品在12小時內穩定性良好。

2.9 加標回收率實驗

對照品溶液的配制：取添加劑09、10、11、12對照品各約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取3.0ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

準確度試驗貯備溶液：取添加劑09、10、11、12對照品各約12.5mg置同一50ml量瓶中，用混合溶劑溶解并定容至刻度，搖勻，分別精密量取上述溶液2ml、4ml、6ml置50ml量瓶中，加甲醇溶解并定量稀釋至刻度，搖勻，作為貯備溶液1、2、3。

供試品溶液的制備：取樣品100ml置100ml量瓶中，按表3加入各溶液3ml，混合均勻。固相萃取柱使用前分別用3ml甲醇和3ml水活化，混合后的溶液通過固相萃取柱，用5ml水淋洗后分別用5ml甲醇，4ml四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用甲醇稀釋至10ml，即得?？瞻坠┰嚻啡芤褐苽?份，其他各制備3份（見表3）。

檢測及結果：精密量取供試品溶液和對照品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算回收率。結果表明本方法測定添加劑09、10、11、12的含量平均回收率分別為87.5%、86.3%、85.4%、86.6%，回收率RSD%均小于5.0%。

2.10 重復性試驗

供試品溶液：固相萃取柱使用前分別用3ml甲醇和3ml水活化，量取100ml樣品置100ml量瓶中，加入貯備溶液（2）3.0ml，搖勻，得供試品溶液，上述溶液通過固相萃取柱，用5ml水淋洗后分別用5ml甲醇，4ml四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用甲醇稀釋至10ml，即得。平行制備6份。

對照品溶液：取添加劑09、10、11、12對照品各約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取3.0ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

檢測及結果：精密量取供試品溶液和對照品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計算6份樣品測得量的相對標準偏差（RSD%），考察該方法測定含量的重復性，結果表明RSD%均小于5.0%。

2.11 樣品中抗氧化劑含量的測定

按照2.1的預處理方法對兩個品牌的樣品進行前處理，將處理后的溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，結果表明各添加劑均未檢出。

3 結論

本研究建立了固相萃取-高效液相色譜法快速測定瓶裝飲用水中4種抗氧劑方法。該方法僅以甲醇為流動相，且4種抗氧劑在濃度范圍內線性關系良好，r值均大于0.999，平均回收率為85-88%，滿足檢測要求。本研究為瓶裝飲用水抗氧劑的檢測建立了一套樣品處理簡單、提取率高，檢測方法快速、穩定且結果可靠， 操作簡單的高效液相色譜最優分析方法。

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