PCOS患者IL-17A、Betatrophin、可溶性CD68表達水平及與卵巢功能的關系

席彥東 沈自旺 白虹

多囊卵巢綜合征（Polycystic ovarian syndrome，PCOS）是臨床常見的女性內分泌疾病，發病率5%～10%［1］。研究指出，PCOS 可增加2 型糖尿病、心血管疾病、以及子宮內膜癌的發生風險，嚴重影響女性身心健康［2］。PCOS 相關病理生理機制研究較多，但目前尚無定論，其中慢性炎癥因子與疾病的發生發展密切相關，白細胞介素-17A（Interleukin-17A，IL-17A）被證實在PCOS 患者體內表達增加，可促進疾病進展［3］。可溶性CD68（Soluble CD68，sCD68）作為單核/巨噬細胞的特異性表面分子標志物，在卵巢型子宮內膜異位癥的發生發展中發揮重要作用［4］。此外，Betatrophin 是一種新發現的影響糖脂代謝的因子，被認為有調節脂代謝、改善糖耐量的雙重作用，在PCOS 患者體內表達升高［5］。基于此，本研究嘗試分析PCOS 患者選取IL-17A、Betatrophin、sCD68 表達水平及與卵巢功能的關系，旨在為臨床治療本病提供數據支持。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年4月至2019年4月銀川市第一人民醫院婦科102 例PCOS 患者作為研究組，另選同期48 例健康體檢者作為對照組。納入標準：①研究組均符合PCOS 診斷標準［6］，對照組均為體檢結果正常者；②自主行為能力良好，能配合完成研究；③近2 個月內未使用過激素類藥物、胰島素和降脂類藥物；④月經周期規律；⑤知曉本研究，已簽署同意書。排除標準：①精神疾病患者；②惡性腫瘤患者；③血液系統疾病患者；④全身感染性疾病患者；⑤合并卵巢早衰、子宮畸形、宮腔粘連、甲狀腺功能異常等疾病者；⑥嚴重心腦肝腎功能不全者。

1.2 方法

研究組均參照相關指南［7］行促排卵治療，持續治療3 個月后根據獲卵數評估卵巢反應，控制性促超排卵周期卵數≤5 個為卵巢低反應，獲卵數＞5 個為卵巢正常反應。治療前，于月經來潮后2～5 d，采集研究對象空腹靜脈血6 mL，以3 500 rpm 轉速離心處理5 min，取血清標本置于-70℃冷藏室待檢，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平，試劑盒分別購自蘇州浩歐博生物醫藥有限公司、遼寧邁迪生物科技有限公司、湖南省麗拓生物科技有限公司，檢測操作均按照試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標

①研究組與對照組血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平。②研究組不同卵巢反應患者臨床資料及血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平，臨床資料包括年齡、初潮年齡、病程、結婚時間、性生活史、不孕年限、流產史、初潮月經紊亂、家族遺傳史、BMI、胰島素抵抗指數（Homa-insulin resistance，HOMA-IR）、血清黃體生成素（Luteinizing hormone，LH）/卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone，FSH）、抗繆勒管激素（Anti-Müllerian hormone，AMH），HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰島素/22.5；取血清標本，采用化學發光免疫分析法檢測血清LH 及FSH 水平，試劑盒購自深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司，計算LH/FSH 值；采用酶聯免疫吸附法檢測血清AMH 水平，試劑盒購自遼寧邁迪生物科技有限公司。③探究血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、臨床指標與卵巢反應性的相關性，及血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 與臨床指標的相關性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行數據處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗，通過Logistic 進行多因素回歸分析，采用Pearson 進行相關性分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較

對比兩組年齡、初潮年齡、性生活史、體質量指數（Body Mass Index，BMI）、吸煙和飲酒情況，比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of 2 groups of general data［n（%），（±s）］

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of 2 groups of general data［n（%），（±s）］

注：飲酒定義：每日飲白酒≥2 兩或啤酒≥2 瓶，每周飲酒≥1 次；吸煙定義：每天抽煙≥1 支，連續吸煙時間＞6月。

項目年齡（歲）初潮年齡（歲）性生活史（年）BMI（kg/m2）吸煙t/χ2值1.528 1.197 1.096 1.502 0.388 P 值0.129 0.233 0.275 0.135 0.533是否飲酒0.558 0.270是否研究組（n=102）31.15±4.35 13.48±1.61 5.39±1.09 25.91±1.77 26（25.49）76（74.51）20（19.61）82（80.39）對照組（n=48）29.86±5.71 13.15±1.49 5.61±1.26 25.46±1.58 10（20.83）38（79.17）7（14.58）41（85.42）

2.2 研究組與對照組血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平

研究組血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平較對照組高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels between the 2 groups（±s）

表2 兩組血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels between the 2 groups（±s）

組別研究組對照組t 值P 值n 102 48 IL-17A（pg/mL）18.75±3.52 5.07±1.03 26.358＜0.001 Betatrophin（pg/mL）178.34±48.19 106.12±35.26 9.274＜0.001 sCD68（μg/mL）2.22±0.41 1.68±0.30 8.150＜0.001

2.3 不同卵巢反應患者臨床資料

不同卵巢反應性患者HOMA-IR、血清LH/FSH、AMH 水平相比，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同卵巢反應患者臨床資料［n（%），（±s）］Table 3 Clinical data of different ovarian responses［n（%），（±s）］

表3 不同卵巢反應患者臨床資料［n（%），（±s）］Table 3 Clinical data of different ovarian responses［n（%），（±s）］

資料t/χ2值P 值年齡（歲）初潮年齡（歲）病程（年）性生活史（年）結婚時間（年）不孕年限（年）初潮月經紊亂0.960 1.658 0.629 0.973 1.015 0.862 0.003 0.339 0.100 0.531 0.333 0.313 0.391 0.959有無流產史0.060 0.807有無家族遺傳史0.039 0.844有無BMI（kg/m2）HOMA-IR LH/FSH AMH（ng/L）卵巢低反應患者（n=48）31.56±4.17 13.74±1.59 3.27±1.02 5.49±1.13 6.43±1.27 2.84±0.51 14（29.17）34（70.83）8（16.67）40（83.33）16（33.33）32（66.67）25.77±1.71 5.53±1.14 1.84±0.30 0.40±0.06卵巢正常反應患者（n=54）30.73±4.52 13.21±1.63 3.14±1.06 5.28±1.05 6.17±1.31 2.75±0.54 16（29.63）38（70.73）10（18.52）44（81.48）19（35.19）35（64.81）26.04±1.83 3.26±0.82 1.23±0.27 1.53±0.35 0.767 11.635 10.809 22.070 0.445＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 不同卵巢反應患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD 68 水平

卵巢低反應患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平較卵巢正常反應患者高差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 不同卵巢反應患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels in patients with different ovarian reactions（±s）

表4 不同卵巢反應患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels in patients with different ovarian reactions（±s）

組別卵巢低反應患者卵巢正常反應患者t 值P 值n 48 54 IL-17A（pg/mL）23.31±4.72 14.70±3.06 11.048＜0.001 Betatrophin（pg/mL）211.46±53.37 148.90±42.08 6.609＜0.001 sCD68（μg/mL）2.57±0.52 1.91±0.23 8.447＜0.001

2.5 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、臨床指標與卵巢反應性的關系

Pearson 相關性分析顯示，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、HOMA-IR、LH/FSH 與卵巢反應性呈負相關，AMH 與卵巢反應性呈正相關（P＜0.05），見表5。

表5 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、臨床指標與卵巢反應性的關系Table 5 Relationship between serum IL-17A，Betatrophin，sCD68，clinical indicators and ovarian reactivity

2.6 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 與臨床指標的關系

Pearson 相關性分析，血清IL-17A（r=0.524、0.725、0.514）、Betatrophin（r=0.695、0.632、0.597）、sCD68（r=0.328、0.485、0.540）與HOMA-IR、LH/FSH、AMH 呈正相關（P＜0.05），見圖1。

2.7 多元線性逐步回歸分析

多元線性逐步回歸分析，將HOMA-IR、LH/FSH、AMH 等其他因素控制后，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 仍與卵巢反應性顯著相關（P＜0.05），見表6。

表6 多元線性逐步回歸分析Table 6 Multiple linear stepwise regression analysis

3 討論

PCOS 受基因遺傳和環境因素的共同影響，發病機制復雜，文獻報道證實，PCOS 患者多數處于一種低度慢性炎癥狀態，炎癥與胰島素抵抗相互影響，最終共同促進了PCOS 的發生與發展［8-9］。本研究發現，PCOS 患者血清IL-17A 表達水平明顯高于健康體檢者，提示PCOS 患者處于慢性炎癥狀態，與上述研究結論一致。IL-17A 水平升高可直接或間接誘導多種細胞因子、趨化因子、炎癥因子和抗微生物蛋白識別介導自身免疫和慢性炎癥反應，炎癥反應增強可促進胰島素抵抗，從而參與PCOS 的發生。研究指出，巨噬細胞廣泛分布在女性生殖系統如胎盤、乳腺、子宮、卵巢等組織中，作為免疫系統中能夠導致炎癥的細胞，其可釋放多種炎性因子［10］。CD68 主要在單核細胞、巨噬細胞、粒細胞等細胞中表達，被認為是巨噬細胞最可靠的標記物，廣泛應用于檢測人體組織中存在的巨噬細胞［11-12］。本研究發現，PCOS 患者血清sCD68水平處于高表達狀態，提示血清sCD68 表達升高可能參與PCOS 的發生。本研究還發現，Betatrophin在PCOS 患者血清中呈異常高表達狀態，也可能參與PCOS 的發生。Betatrophin 由Yi P 等［13］于2013年在胰島素抵抗小鼠模型中首次發現并命名，認為胰島素抵抗可誘導肝臟合成、分泌Betatrophin。且新近研究顯示，Betatrophin 可能通過抑制脂肪酶活性，調節脂代謝，從而促進PCOS 患者體內的脂代謝紊亂，參與PCOS 的發生發展［14］。

本研究進一步通過相關性分析發現，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 與HOMA-IR、LH/FSH、AMH 呈正相關，其中HOMA-IR 是反映機體胰島素抵抗的重要措施，LH/FSH、AMH 是反映卵巢功能的主要指標，因此我們認為通過檢測血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 表達情況可在一定程度上反映PCOS 患者胰島素抵抗及卵巢功能，有助于判斷患者病情。促排卵是臨床治療PCOS 的主要方法之一，治療前需結合患者具體情況，如病情、卵巢儲備功能等，制定治療方案，以提高卵巢對治療的反應性，保障卵子回收效率。本研究發現，PCOS 患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、HOMA-IR、LH/FSH、AMH 均與卵巢反應性存在密切相關性，且在控制了HOMA-IR、LH/FSH、AMH等其他因素后，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 仍與卵巢反應性顯著相關，提示血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 表達水平升高反映出PCOS 患者存在卵巢低反應性，治療效果可能較差，應積極調整治療方案，以改善治療效果。