血清膽紅素、肌酸激酶同工酶MB質量與新生兒日齡的相關性

鄭高明， 蘇曉茹

（杭州師范大學附屬醫院醫學檢驗科，浙江 杭州 310015）

由于膽紅素生成過多，肝臟對膽紅素攝取和結合能力下降，腸-肝循環增加，因此新生兒高膽紅素血癥較為常見[1]。國內外關于高膽紅素血癥引起心肌酶升高的報道很多，但新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷及其機制仍存在爭議。目前，對正常新生兒血清膽紅素、肌酸激酶同工酶MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）水平與日齡的關系研究較少。探討正常狀態新生兒日齡與血清膽紅素、CK-MB水平的關系有助于完善新生兒膽紅素血癥及心臟損傷機制，對建立新生兒膽紅素和CK-MB參考區間也有一定的價值。因此，本研究選取日齡為0～28 d的新生兒，通過檢測血清總膽紅素（total bilirubin，TB）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）和肌酸激酶同工酶MB質量（creatine kinase isoenzyme MB mass，CK-MB mass）水平，探討血清膽紅素和CK-MB mass與日齡的相關性。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2018年12月—2019年12月杭州師范大學附屬醫院新生兒科新生兒106名，其中男嬰53名，日齡（6.98±5.51）d；女嬰53名，日齡（8.21±6.00）d；根據出生天數分為3組：≤5 d組[48名，出生體質量（3.32±0.60）kg]、＞5～≤10 d組[32例，出生體質量（3.29±0.70）kg]、＞10～≤28 d組[26例，出生體質量（3.34±0.50）kg]。所有新生兒均符合：（1）胎齡滿37周～＜42周，出生體質量≥2 400 g，無宮內窘迫及生后窒息史；（2）無先天性心臟病、缺血缺氧性腦病、嚴重感染等影響心肌酶測定結果的疾病。3組胎齡和出生體質量差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

本研究所用的血清樣本均為完成其他檢測后的剩余血清。采用重氮法檢測TB和DBil，試劑盒均購自美國貝克曼庫爾特公司（批號分別為2588、2587）。采用膠乳免疫比濁法測定CK-MB mass，試劑盒購自北京九強生物技術股份有限公司（批號為19-0916）。檢測儀器為AU5800全自動生化分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）。

1.3 統計學方法

采用SPSS 25.0軟件進行統計分析。呈非正態分布的數據以中位數（M）[四分位數（P25～P75）]表示，組間比較采用非參數Wilcoxon秩和檢驗。相關性分析采用Spearman相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同出生天數新生兒血清TB、DBil、CKMB mass水平的比較

＞5～≤10 d組血清TB水平明顯高于≤5 d組和＞10～≤28 d組（P＜0.001），＞10～≤28 d組血清DBil水平明顯高于≤5 d組和＞5～≤10 d組（P＜0.001），≤5 d組、＞5～≤10 d組、＞10～≤28 d組血清CK-MB mass水平依次降低（P＜0.05）。見表1。

表1 不同出生天數新生兒血清TB、DBil、CK-MB mass水平的比較

2.2 血清TB、DBil、CK-MB mass水平與新生兒日齡的相關性

TB與日齡無相關性（r=0.038，P＞0.05），DBil與日齡呈正相關（r=0.469，P＜0.05），CK-MB mass與日齡呈負相關（r=-0.559，P＜0.05）。見圖1。

圖1 血清TB、DBil、CK-MB mass水平與新生兒日齡的相關性

3 討論

膽紅素在體內具有保護和損傷的雙重作用。生理濃度的膽紅素既是強氧化劑又是自由基清除劑，對心、腦、血管等多種組織器官具有保護作用，但濃度過高時又可對機體造成不同程度的損傷[2]。高膽紅素血癥是新生兒的常見疾病之一，早產兒發病率約為80%，足月兒發病率約為60%，若不及時進行有效治療，不僅會引起患兒神經系統損傷，還可能引發神經外器官或組織損傷，對新生兒的健康造成嚴重影響[3-4]。

目前，臨床主要通過檢測新生兒血清膽紅素水平來指導新生兒高膽紅素血癥的治療。當血清TB＞221.0 μmol/L 或每日升高≥85.0 μmol/L，且血清結合膽紅素＜34.0 μmol/L，便可確診為高膽紅素血癥。然而，對高膽紅素血癥是否伴隨器官損傷及其診斷方案并未統一，且臟器損傷常與膽紅素升高不完全一致，這給臨床的診斷和治療帶來一定的困難。由于多數高膽紅素血癥新生兒心肌損傷的臨床表現不明顯或因其他系統受累導致心肌損傷癥狀被忽視，因此臨床希望能有一種可靈敏地反映心肌損傷的標志物。

目前常用的心肌損傷標志物有心肌肌鈣蛋白T、心肌肌鈣蛋白I、CK-MB等。CK-MB絕大部分存在于心肌細胞的外漿層，心肌以外的細胞中含量甚微，因此血清 CK-MB水平的高低可較特異性地反映心肌損傷的程度[5]。由于肌鈣蛋白在心肌損傷發生6 h以內時敏感性較低[6]，因此肌鈣蛋白與CK-MB聯合檢測可以提高心肌損傷診斷的準確性。傳統的CK-MB活性檢測建立在忽略肌酸激酶同工酶BB干擾的基礎上，具有一定的局限性。本研究采用質量法檢測CK-MB mass，用單克隆抗體直接識別CK-MB，排除了肌酸激酶同工酶BB、巨肌酸激酶及腺苷酸激酶的干擾，特異性和敏感性均高于傳統的CK-MB活性檢測[7-8]。

目前，新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷及其機制仍存在爭議。有研究結果顯示，新生兒病理性黃疸可出現心肌損傷，患兒心肌酶升高與黃疸的嚴重程度和持續時間呈正相關（r=0.902）[9]，原因可能是未結合膽紅素為脂溶性的，可以透過細胞膜進入細胞內，干擾細胞的代謝，導致心肌細胞損傷，與文獻報道[10-11]一致。然而，也有研究結果顯示，高膽紅素血癥患兒的CK-MB水平與血清TB水平并無明顯關聯[1]，新生兒高膽紅素血癥不會對CK-MB產生明顯影響，CK-MB 與日齡呈負相關（r=-0.375，P＜0.001）[12]，與本研究結果一致。

本研究結果顯示，＞5～≤10 d組血清TB水平明顯高于≤5 d組和＞10～≤28 d組（P＜0.001），DBil與日齡呈正相關（r=0.469，P＜0.05）。原因可能是隨著新生兒成長，肝臟快速發育成熟，對膽紅素攝取和結合能力逐步提高，導致DBil逐漸升高，而由于各種生理或病理原因導致非結合膽紅素存在及升高，使得＞5～≤10 d組TB水平顯著高于其他2個組，因此要格外關注日齡為＞5～≤10 d的新生兒非結合膽紅素升高導致的高膽紅素血癥。此外，本研究結果還顯示，CKMB mass與日齡呈負相關（r=-0.559，P＜0.05）。隨著日齡的增長，新生兒CK-MB mass逐漸降低。這表明新生兒CK-MB mass升高不一定是由心肌損傷導致的，可能是由新生兒早期特殊的生理特點導致的暫時性增高，需關注新生兒的CK-MB參考區間，并結合其他檢查或肌鈣蛋白等指標綜合評判高膽紅素血癥新生兒是否存在心肌損傷。關于新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷目前存在2種不同的研究結論，這可能是由于新生兒有其特殊的生理、病理特點，不同的研究結論基于不同的病例數、病例選取的局限性等原因導致的。

總之，新生兒血清DBil、CK-MB mass水平與日齡有一定的關系。由于本研究的樣本量較小，所用樣本為其他檢測后的剩余血清，量極少，且由于方法學問題和樣本種類的要求，未能檢測心肌肌鈣蛋白等心肌損傷標志物。后續將擴大樣本量，進一步研究新生兒高膽紅素血癥與心肌損傷的關系，同時建立新生兒相關標志物的參考區間。