郭艷麗,王會恩,尹 情,韓俊淑,郭 煒,沈素朋,梁 佳,董稚明
長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA, lncRNA)在多種人類腫瘤中異常表達,失調的lncRNA可通過多種機制參與腫瘤的發生和發展[1-2]。研究發現,lncRNA DDX11-AS1在肝細胞癌[3]、結腸癌[4]、骨肉瘤[5]中均異常表達,但其在賁門腺癌(gastric cardia adenocarcinoma, GCA)中的表達及作用仍未完全闡明。本文著重探討DDX11-AS1在GCA中的表達及其與臨床病理特征、預后的關系,并進一步探討DDX11-AS1對胃癌細胞增殖及侵襲能力的影響,旨在闡明DDX11-AS1在GCA中可能發揮的作用,為GCA患者分子靶向治療提供候選分子靶點及預后評估提供有價值的指標。
1.1 材料選取河北醫科大學第四醫院2012~2014年收治的GCA患者136例,所有患者術前均未經放、化療。患者臨床病理資料見表1。其中臨床分期依據美國癌癥聯合會(AJCC)及國際抗癌聯盟(UICC)標準進行分類;腫瘤病理分級依據WHO標準進行分類。每例患者均取癌組織原發灶及距癌組織2~5 cm處的癌旁組織,手術切除標本一部分保存于-80 ℃低溫冰箱用于提取RNA,另一部分進行石蠟包埋,常規HE染色,經病理醫師診斷證實均為GCA,癌旁組織均為正常黏膜組織。對136例GCA患者進行隨訪,其中11例失訪。本實驗經醫院倫理委員會審查通過,入選患者均簽署知情同意書。
MGC803、BGC823、SGC7901、HGC27胃癌細胞株由河北醫科大學第四醫院腫瘤研究所病理研究室留存并傳代。Trizol購自美國Invitrogen公司;逆轉錄試劑盒(Reverse Transcription System A3500)、Lipofectamine 2000轉染試劑、MTS試劑均購自美國Promega公司;RPMI 1640細胞培養基購自美國Gibco公司,Transwell小室購自美國Corning公司,Matrigel膠購自美國BD Biosciences公司,siRNA由中國GenePharma公司合成,所用引物均由上海生工公司合成。……