健心平律丸對(duì)心房顫動(dòng)患者金屬基質(zhì)蛋白酶-2、血清熱休克蛋白70表達(dá)的影響*

燕竹青 何緒屏 陳穎穎 焦萁薈

心房顫動(dòng)(Atrial fibrillation，AF)簡(jiǎn)稱房顫，房顫時(shí)心臟的電重構(gòu)和結(jié)構(gòu)重構(gòu)被認(rèn)為是其主要機(jī)制，心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的主要表現(xiàn)為心肌纖維化。有研究表明[1]房顫發(fā)生和維持過程中，金屬基質(zhì)蛋白酶(Metalloproteinase，MMP)發(fā)揮重要作用，其中MMP-2與心房心肌纖維化具有密切相關(guān)性。亦有研究顯示[2]熱休克蛋白(Heat shock protein,HSP)在細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)、內(nèi)源性保護(hù)、炎癥免疫等方面與心血管疾病相關(guān)，血清HSP70水平與心房顫動(dòng)關(guān)聯(lián)密切。我院院內(nèi)制劑健心平律丸依據(jù)中醫(yī)理論治療房顫已近20年。本研究主要觀察健心平律丸對(duì)房顫患者血清MMP-2、HSP70的影響，以進(jìn)一步研究健心平律丸在心房重構(gòu)方面對(duì)心臟保護(hù)的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017年12月—2018年12月在深圳市中醫(yī)院門診及住院部治療的永久性心房顫動(dòng)患者80例，按照隨機(jī)對(duì)照原則根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分組，分別為治療組40例與對(duì)照組40例。均詳細(xì)告知患者試驗(yàn)事項(xiàng)，得到患者同意并簽署知情同意書。2組患者年齡、性別、病程、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、心臟結(jié)構(gòu)等一般情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有可比性。見表1。

表1 2組患者一般資料比較 (例，

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷參考2016年ESC房顫管理指南中心房顫動(dòng)診斷標(biāo)準(zhǔn)。中醫(yī)證候標(biāo)準(zhǔn)參考《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則：試行》[3]中氣虛痰瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷符合房顫-永久性房顫診斷標(biāo)準(zhǔn)，中醫(yī)辨證分型符合氣虛痰瘀阻滯者。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)排除先天性心臟病、瓣膜性心臟病、心肌病、慢性心力衰竭(心功能NYHA分級(jí)III-IV級(jí))、預(yù)激綜合征、II度及以上心臟傳導(dǎo)阻滯、甲狀腺功能異常、腦血管病急性期、嚴(yán)重腎功能不全、嚴(yán)重電解質(zhì)紊亂、慢性阻塞性肺疾病；因病情需要，需立即電轉(zhuǎn)復(fù)者、精神異常者；對(duì)治療用藥有禁忌證、過敏等不良反應(yīng)者。

1.5 脫落標(biāo)準(zhǔn)①患者自己要求放棄試驗(yàn)者；②試驗(yàn)過程中出現(xiàn)不良反應(yīng)或者過敏反應(yīng)者；③治療中患者未按要求用藥。本試驗(yàn)過程中無脫落病例。

1.6 治療方法對(duì)照組服用琥珀酸美托洛爾緩釋片(阿斯利康公司，47.5 mg，每日1次)控制心率，華法林鈉片(芬蘭奧立安公司 監(jiān)測(cè)國際標(biāo)準(zhǔn)化比值INR2.0～2.5)抗凝或新型口服抗凝藥物(達(dá)比加群酯片、利伐沙班)。治療組在常規(guī)西藥治療上聯(lián)合服用健心平律丸(本院院內(nèi)制劑)每次6 g，餐后服，每天3次；健心平律丸由深圳市中醫(yī)院制劑室提供(批號(hào)20150420)(主要成分：太子參、麥冬、五味子、遠(yuǎn)志、酸棗仁、三七等)。2組均以12個(gè)月為一個(gè)療程。

1.7 觀察指標(biāo)①血清MMP-2、HSP70水平檢測(cè)：2組患者均于清晨空腹抽取肘靜脈血5 ml(非抗凝管)，室溫下自然凝固10～20 min，常溫下以3500 r/min速度離心15 min后，分離血清后置于冰箱-40 ℃保存。檢測(cè)試劑及方法：應(yīng)用ELISA檢測(cè)試劑盒，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，檢測(cè)患者血清中MMP-2(美國Biosourse公司提供)及熱休克蛋白70(芬蘭Orion Dignostics公司提供)水平。②其他指標(biāo)：心律、心率、心電圖、心臟彩超、肝腎功能、電解質(zhì)、凝血功能、三大常規(guī)。

2 結(jié)果

2組治療前MMP-2、HSP70差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；對(duì)照組治療前后MMP-2、HSP70相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療組治療前后MMP-2、HSP70比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組治療后MMP-2、HSP70比較，有顯著差異(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者治療前后MMP-2、HSP70水平比較 (例，

3 討論

心房顫動(dòng)(房顫)發(fā)生和維持時(shí)的心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)目前研究較多，心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的關(guān)鍵在于心房纖維化。金屬基質(zhì)蛋白酶-2(MMP-2)和心房纖維化有密切相關(guān)性，部分研究提示房顫患者的心房組織MMP-2蛋白表達(dá)量明顯增高，MMP-2活性升高，引致正常的細(xì)胞外基質(zhì)成分減少，導(dǎo)致異常結(jié)締組織和膠原蛋白合成增加，導(dǎo)致心肌結(jié)構(gòu)重塑[4]。本研究顯示，2組治療后血清MMP-2 水平較治療前下降，表明在心房顫動(dòng)的形成過程中 MMP-2升高，心房組織細(xì)胞外基質(zhì)成分降解增加，異常膠原蛋白合成增加，從而導(dǎo)致心肌纖維化，引起心房顫動(dòng)的發(fā)生。2組治療后MMP-2水平均降低，治療組降低明顯，說明健心平律丸可能通過抑制MMP-2 表達(dá)，減輕心房心肌纖維化的發(fā)生，進(jìn)而改善心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)。

Giffard等[3]的研究發(fā)現(xiàn)，熱休克蛋白-70(HSP70)通過阻斷細(xì)胞多個(gè)凋亡途徑，阻止心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的進(jìn)程。宋偉等[5]通過大白兔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，心肌HSP70可抑制KCa3.1mRNA和蛋白的增加，從而使心肌細(xì)胞的動(dòng)作電位、有效不應(yīng)期縮短及頻率適應(yīng)，提示HSP70可通過調(diào)節(jié)離子濃度減少電重構(gòu)，從而減緩房顫的發(fā)生和維持。本研究顯示，2組治療后HSP70水平升高，治療組升高明顯，說明健心平律丸可能通過上調(diào)HSP70水平表達(dá)改善心房重構(gòu)、減少電重構(gòu)。

房顫大部分屬中醫(yī)“心悸”“怔忡”“心動(dòng)悸”范疇，國醫(yī)大師鄧鐵濤教授認(rèn)為本病病機(jī)為氣陰虧虛，心神失養(yǎng)，加之痰飲瘀阻心脈，擾亂心神，以氣陰虛為本，痰瘀閉阻為標(biāo)，治療以溫膽湯為主方治療[6]。健心平律丸即以此理論依據(jù)在溫膽湯基礎(chǔ)上加減化裁而成。何緒屏等[7]研究提示健心平律丸具有提高心肌AQP4 水平，降低心肌細(xì)胞水腫，減緩心律失常的作用。本研究結(jié)果提示健心平律丸可能通過下調(diào) MMP-2 表達(dá)及上調(diào)HSP70表達(dá)抑制心肌纖維化，改善心房重構(gòu)，減少電重構(gòu)，從而對(duì)心房顫動(dòng)發(fā)揮防治作用。