野外引種與圈養大熊貓(Ailuropoda melanoleuca)巢穴期的育幼能力比較

羅 永 周世強 何勝山 韋 華 孫萌萌 黃 炎 張和民

(中國大熊貓保護研究中心，大熊貓國家公園珍稀動物保護生物學國家林業和草原局重點實驗室，都江堰，611830)

育幼行為是動物為了延續自身基因和拓展種群規模的一種必要手段，親代的照顧對幼仔的生存和行為發育有著重要作用[1]。大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是我國特有的珍稀瀕危物種。在繁育方面，雄性大熊貓只參加交配，而育幼工作全部由雌性負責，是典型的單親育幼物種[2]。由于大熊貓初生幼仔十分脆弱，身體質量是母獸質量的一千分之一左右[3]，除能發出洪亮的叫聲外，視覺、聽覺、嗅覺和運動能力都十分低下，因此出生幼獸完全依賴于母獸的照顧[4]。從出生到4月齡，幼仔除了必要的進食、飲水和排泄外，大部分時間會一直和母獸呆在巢穴內，這段時間被稱為巢穴期[5]。在1月齡內，母獸每日離開巢穴時間不會超過1 h；1月齡后，離開時間不會超過6 h[5]。這一時期是觀察母獸育幼行為，評價其育幼能力的絕佳時段。

隨著“三難”問題的攻克，大熊貓的圈養種群已能自我維持[6]。為了復壯野外小種群和避免圈養種群的退化，中國大熊貓保護研究中心先后開始了大熊貓野化放歸和野外引種項目[7]。母獸帶仔野化培訓是大熊貓野化項目的核心內容，挑選帶仔母獸又是這核心內容的關鍵一步。在行為生態學上，大熊貓母獸育幼能刺激幼仔的社會行為發育[8]，并且很多生存技能都會在育幼期間由母獸傳授給幼仔[9]。因此，挑選合適的母獸對放歸后的亞成體在野外的生存與繁衍尤為重要。從野化培訓項目開展至今，對圈養母獸的挑選都是根據飼養繁育經驗進行的定性挑選，缺乏科學的定量標準。目前，還未見到對不同來源大熊貓母獸育幼能力比較的相關研究報道?！安莶荨笔怯?002年野外救助回來的亞成體。其后代“淘淘”已在野外生存了5年[10]，并且2019年“草草”在野外成功引種并產仔[11]。本研究旨在巢穴期將 “草草”和參加野化培訓項目的圈養出生母獸的育幼能力進行比較，揭示兩者之間的差異性，意在為培訓母獸定量選擇標準的建立累積研究資料，也為今后在培訓圈養出生母獸育幼能力方面提供一定的參考。

1 研究方法

1.1 研究對象和研究地點

研究對象為2018年參加野化培訓的圈養出生大熊貓母獸“博斯”“平平”“翠翠”以及當年野外引種成功的大熊貓“草草”(表1)。

研究地點位于四川省臥龍國家級自然保護區內的中國大熊貓保護研究中心核桃坪野化放歸培訓基地。在2018年7月—2019年1月整個研究期間，所有研究對象都在一期培訓圈內。每個培訓圈由兩個內室(3 m×6 m)和1個活動場(40 m×60 m)組成，內室為水泥圈舍，活動場依自然環境圍建而起，除水泥投食地、木棲架外都為野生環境。4只大熊貓都選擇內室為巢穴，除60日齡以后“翠翠”將幼仔叼出到離內室不遠的活動場一隅繼續育幼。

1.2 數據采集

所有培訓圈都安裝有浙江?？低暪镜摹案咔寰W絡攝像機監視系統”，能全面監視內室和外室，并能進行高清錄像和高質量錄音。在研究對象產仔的次日我們選擇每天8：00—9：00、16：00—17：00以及20：00—21：00這3個時段進行高清錄像和錄音。選擇1 d中的這3個時段是為了避開飼養人員對圈舍的打掃和獸醫對大熊貓的例行檢查，確保研究期間無人打擾。用移動硬盤從監視系統內保存并收集了4個研究對象110 d共計1 320 h的影像資料。

1.3 行為觀測和行為譜

提取影像資料數據采用的是焦點動物取樣法和連續記錄法。將1 h的錄像資料分為60 min，觀察記錄研究對象在每1 min內各種行為的持續時間和發生的次數。1個狀態行為至少持續5 s以上，而2個獨立的行為間隔時間也必須持續5 s以上。參照《圈養大熊貓行為研究及其方法》[12]，重點對以下行為進行記錄(表2)。

表1 研究對象的基本信息

表2 重點觀察的行為類型和描述

1.4 數據分析

所有數據應用SPSS 19.0軟件進行處理，以“無響應”“滯后安撫”“舔仔”這3個行為再加上“幼仔完全暴露”的時間作為育幼能力的指標進行分析。用單個樣本K-S檢驗法對所有樣本進行正態性檢驗，結果為數據不符合正態分布。于是運用非參數檢驗Kruskal-Waillis檢驗(后文簡寫為K-W)對4只大熊貓在上述育幼能力指標下的差異性進行分析，有顯著差異性就用Mann-WhitneyU比較方法(后文簡寫為M-W)進行兩兩比較。以P<0.050 作為顯著拒絕H0假設的標準說明具有顯著差異，P<0.010作為極顯著拒絕H0假設說明具有極顯著差異。

2 結果與分析

2.1 “無響應”行為

結果表明(圖1)：“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“無響應”行為分別共計88次、104次、94次及64次。4只大熊貓在“無響應”行為上沒有顯著性差異(K-W：H=6.569，P=0.087)。

2.2 “滯后安撫”行為

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“滯后安撫”行為分別共計10次、43次、18次及28次。4只大熊貓在“滯后安撫”行為上有極顯著性差異(K-W：H=13.185，P=0.004)(圖2)。經過兩兩比較，“草草”與“博斯”在“滯后安撫”行為上有極顯著性差異(M-W：P=0.001)，與“翠翠”(M-W：P=0.127)無顯著性差異，和“平平”(M-W：P=0.009)有極顯著性差異?！安┧埂钡摹皽蟀矒帷毙袨榕c“翠翠”有顯著性差異(M-W：P=0.038)，和“平平”沒有差異(M-W：P=0.363)?！按浯洹焙汀捌狡健痹凇皽蟀矒帷毙袨樯蠜]有顯著性差異(M-W：P=0.233)。

圖1 “無響應”行為對比圖Fig.1 “No response” behavior comparison 注：標有不同大寫字母表示組間差異極顯著，標有不同小寫字母表示組間差異顯著，標有相同小寫字母表示組間差異不顯著，按字母表順序來比較，下同 Note：Different uppercase letters indicate very significant differences between groups，different lowercase letters indicate significant differences between groups，and the same lowercase letters indicate no significant differences between groups.Compare in alphabetical order，the same below

圖2 “滯后安撫”行為對比圖Fig.2 Comparison of “lagging appeasement”

2.3 “舔仔”行為

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“舔仔”行為分別共計1 733次、1 399次、1 643次及1 070次。4只大熊貓在“舔仔”行為上也有極顯著性差異(K-W：H=25.046，P=0.00)(圖3)。其中，“草草”的“舔仔”行為極顯著不同于“平平”(M-W：P=0.000)，“草草”與“博斯”(M-W：P=0.050)，以及“翠翠”(M-W：P=0.653)在“舔仔”行為上沒有顯著差異?！安┧埂焙汀按浯洹痹凇疤蜃小毙袨樯蠜]有差異(M-W：P=0.102)，與“平平”有極顯著性差異(M-W：P=0.008)。“翠翠”的“舔仔”行為極顯著不同于“平平”(M-W：P=0.000)。

2.4 “幼仔完全暴露”時間

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“幼仔完全暴露”持續時間分別共計2 322 min、7 261 min、7 153 min及6 524 min。如圖4，4只大熊貓在“幼仔完全暴露”時間上有極顯著性差異(K-W：H=31.043，P=0.000)。其中，“草草”在“幼仔完全暴露”的每日3 h內持續時間上都極顯著地不同于“博斯”(M-W：P=0.005)、“翠翠”(M-W：P=0.000)和“平平”(M-W：P=0.000)?！安┧埂焙汀按浯洹?M-W：P=0.640)，“博斯”和“平平”(M-W：P=0.974)在“幼仔完全暴露”時間上沒有顯著性差異?！按浯洹焙汀捌狡健痹凇坝鬃型耆┞丁睍r間上也沒有顯著性差異(M-W：P=0.531)。

圖3 “舔仔”行為對比圖Fig.3 “Licking”behavior comparison

圖4 “幼仔完全暴露”時間對比圖Fig.4 “Cup completely exposed” time comparison

3 討論

除了在“無響應”行為這一指標上，4只大熊貓沒有顯著性差異。在其他3項指標上，4只大熊貓都表現出了顯著性差異。大熊貓幼仔在巢穴期，特別是在前1個月，身體十分脆弱。這段時間的幼仔缺乏視力和行動能力，只能依靠叫聲同母獸進行交流[13-14]。幼仔為了引起母獸的注意，它們叫聲的基礎頻率都很高甚至能達到1 000 Hz[15]，并且聲音洪亮[16]。幼仔叫聲內包含有自身覺醒程度和生理狀態的信息[17-18]，能夠讓母獸作出正確的育幼行為如調姿、舔仔等[19]。作為研究對象的4只大熊貓都具有多年的育幼經驗，對幼仔的叫聲都非常敏感。因此，4只母獸在“無響應”行為這一指標上沒有差異性。并且，它們的偏離值很少，絕大多數每日無響應次數不會超過3次，這符合我們選擇大熊貓母獸參加野化培訓的基本要求。

在“滯后安撫”行為和“舔仔”行為上，4只大熊貓表現出了極顯著差異性。“滯后安撫”行為是母獸對幼仔叫聲反應速度的一種體現。母獸表現出了“滯后安撫”說明母獸的注意力沒有完全放在幼仔身上，在第一時間沒有作出應有的育幼反應。4只大熊貓的“滯后安撫”行為箱型圖都呈線條狀，其中“草草”的最大值在零點上，其他3只大熊貓的最大值在1左右。這說明對于有育幼經驗的母獸，“滯后安撫”發生的次數很少。但“博斯”在“滯后安撫”上是4只母獸中“滯后安撫行為”發生次數最多的，表現稍遜于其他3只母獸?！疤蜃小笔谴笮茇埬斧F在育幼行為中最為主動的育幼行為之一，“舔仔”能幫助幼仔清潔身體濕潤毛發，為幼仔提供健康的生存環境[20]?！安莶荨钡奶蜃行袨樵谥形粩?、最大值以及總數上都高于其他3只母獸，而“平平”的“舔仔”行為是4只大熊貓中表現得最差的。在巢穴期的第1個月，幼仔胎毛還未脫盡，沒有完整的被毛[21]，保暖完全靠母獸來維持。母獸身體對幼仔的遮蓋能很好地為幼仔保暖。此時，“幼仔完全暴露時間”可以作為母獸為幼仔提供保暖能力的指標。2個月以后，幼仔具備一定的攀爬能力，且已發育出完整的被毛，御寒能力大大增強[21]，對母獸來為其提供外環境的溫度和濕度的需求已降低了很多。母獸離開幼仔的時間會逐漸增加。在自然環境中，大熊貓亞成體會受到諸如云豹(Neofelisnebulosa)、豺(Cuonalpinus)等天敵的威脅[22]?！坝鬃型耆┞丁睍r間越長遭受天敵危害的可能性就越大。2月齡以后，“幼仔完全暴露”時間能反應出母獸對幼仔的看顧程度。因此，對幼仔的生存和發育來說這是一項非常重要的育幼能力指標?！安莶荨痹谶@一指標上有別于前3項指標，“幼仔完全暴露”時間是極顯著地不同于另外3只圈養母獸。并且，3只圈養母獸之間在這一指標上沒有顯著差異，而在前3項指標上都有與“草草”育幼能力沒有明顯差別的圈養母獸存在。圈養母獸在“幼仔完全暴露”每日3 h內的持續時間的中位數和最大值都是“草草”的3倍左右，圈養母獸的中位數和最大值彼此相差不大。以上，顯然說明了圈養母獸育幼能力的短板就是在“幼仔完全暴露”時間上?！安莶荨笔菑囊巴饩戎貋淼膩喅审w，它的這種育幼能力可能是來自野外母獸的傳授[9]。野生大熊貓對幼仔的保護和關懷能力很強[23]。圈養母獸對幼仔的看顧能力低下可能是因為沒在野外生存過，對亞成體的天敵動物沒有形成危機感，無法促使它們表現出對幼仔應有的敏感性。

綜上所述，“草草”的育幼能力強于3只圈養母獸，特別是在“幼仔完全暴露”時間這一育幼能力指標上表現得尤其突出。這為我們以后提高野化培訓圈養大熊貓母獸育幼能力指明了方向，需要加強圈養母獸對幼仔的看顧能力。可以考慮通過大熊貓天敵的氣味和聲音來刺激母獸，激發它們潛在的本能來提高圈養母獸對幼仔的看顧能力。我們會在今后的實際飼養和科研工作中進行探索，以期能提高圈養母獸的育幼能力。這次研究的樣本數量還是較少，隨著大熊貓野化培訓工作的開展，我們會不斷積累更多的數據資料，希望能在未來建立起科學定量的培訓母獸選擇標準。