T-SPOT.TB 與傳統檢測技術對活動性結核病的鑒別診斷分析

方四廷

（弋陽縣人民醫院感染科 江西 上饒 334400）

活動性結核病是臨床常見的傳染性疾病，患者處于活動期，有結核桿菌排出現象。患者主要有咳嗽、食欲不振、低熱、干咳等癥狀，具有強傳染性。隨著檢驗技術的不斷進步，臨床對活動性結核病診斷方法也明顯增多，包括組織病理學檢查、抗酸染色、結核菌素試驗、結核菌培養等[1]。結核菌培養結核病診斷的“金標準”，但是測試時間長、檢出率極低，容易延誤病情。T-spot.TB 試驗利用酶聯免疫斑點技術對特異性抗原進行檢測，可重復操作，大大提高了診斷效率。本文就結核菌培養、T-spot.TB 試驗對活動性結核病的診斷價值進行分析。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將選取本院2019 年1 月—2020 年1 月收治的120 例活動性結核病患者進行觀察，其中男性患者89 例，女性患者31 例；年齡23 ～70 歲，平均年齡（47.7±5.3）歲；病程0.5 ～9 月，平均病程（5.6±0.9）月；所有患者均符合WHO 關于活動性結核病診斷標準，有結核親密接觸史，經影像學檢查確診，本次研究獲得本院醫學倫理會審批，患者均知情同意。

1.2 方法

結核菌培養：采集患者晨起的第2 或3 口痰的痰液標本3～5ml，放置于室溫后進行堿處理，接種酸性改良羅氏培養基斜面，8周后觀察菌落生長情況，菌落超過斜面面積的25%即為陽性。

T-spot.TB 試驗：采集外周血，采集量為8ml，離心后對單個核細胞進行提取，洗滌后對細胞數量進行計算。結核特異性抗原PBMCs、ESAT-6 加入預包被抗體反應孔孵育，時間為18h。向預包被抗體加入效應T 淋巴細胞釋放因子，洗板后加入二抗，孵育1h 后洗板，加入顯色液，7Min 后用蒸餾水反應，Elispot進行效應T 細胞數量。陽性：（1）空白對照孔斑0 ～5 個點，抗原B 或抗原A 孔斑點數-空白對照孔斑點數≥6；（2）空白對照孔斑6 ～10 個點，抗原B 或抗原A 孔斑點數/空白對照孔斑點數≥2。

1.4 統計學方法

采用SPSS18.0 處理，計數資料用百分比（%）表示，經χ2檢驗，P ＜0.05 表示差異有統計學意義。

2.結果

2.1 兩種檢測技術對活動性結核陽性檢出率比較

T-spot.TB 試驗陽性率明顯高于結核菌培養，差異有統計學意義（P ＜0.05），見表1。

表1 兩種檢測技術結果比較[n（%）]

2.2 診斷價值比較

T-spot.TB 試驗結果顯示活動性結核病患者T 細胞斑點數的中位數是69.5（32.0，135.0），T-spot.TB 試驗靈敏度、特異度、陰性預測值與陽性預測值均高于結核菌培養，差異有統計學意義（P ＜0.05），如表2。

表2 兩種檢測技術的診斷價值比較（%）

3.討論

活動性結核主要因感染結核分支桿菌引起，具有病程長、傳染性強、病死率高的特點，對患者及周圍密切接觸者的身心健康均有不良影響[2]。疾病發生后不僅會給患者造成持續不適感，使患者在工作以及生活中均受到影響，由于癥狀反復發作因此易導致患者出現負性情緒，同時由于結核分枝病毒具備傳染性，因此患者的照護者以及周圍人群均存在較大心理壓力，不愿意與患者接觸，周圍人群的疏遠也會導致患者的情緒受到打擊，不利于患者生活質量改善。因此為使患者的疾病得到有效控制，就需要盡早使疾病得到診斷，并為其開展積極治療。

結核菌培養出結核分枝桿菌陽性是臨床診斷結核病的金標準，但是結核菌培養試驗耗時較長，觀察時間至少為2 ～6 周，甚至2 個月，且受實驗室條件、檢驗人員技術、標本采集質量的影響陽性率較低，不利于結核病的及時診治[3]。

結核分枝桿菌基因中特殊的RDI 序列可生成結核特異性抗原CFP-10、ESAT-6，從而刺激T 淋巴細胞生成干致敏T 淋巴細胞、IFN-γ[4]。T-SPOT.TB 試驗利用人體感染結核桿菌后會出現細胞免疫這一原理，酶聯顯色后ELISPOTReader 分辨系統計算斑點數量，通過效應T 細胞數量，判定是否感染結核分枝桿菌。斑點數量越多或者在短時間內迅速增多，提示結核病的活動程度越高，應加大抗結核藥物使用劑量[5]。本文中T-SPOT.TB 試驗陽性率達到90.%，且診斷特異性、靈敏度均高于結核菌培養試驗，大大提高了對結核病的準確檢出率，試驗時間僅需24h，可重復試驗，對實驗室、樣本要求相對降低，可及時指導臨床進行治療。

綜上所述，T-SPOT.TB 試驗是現代免疫學、基因學發展的接觸產物，可快速、準確進行活動性結核病診斷，相較傳統檢測技術具有明顯優勢。