左卡尼汀對(duì)男性不育癥患者精子活力和DNA 完整性及不良反應(yīng)的影響

彭進(jìn)強(qiáng)，郭一彪，李勵(lì)獻(xiàn)（通信作者），李勵(lì)軍，柳嵐

1 莆田學(xué)院附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心 （福建莆田 351100）；2 泉州市婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心 （福建泉州 362000）

男性不育癥主要指夫妻同居1年，未采取任何避孕措施，由于男方因素造成女方不孕。該病給男性心理帶來(lái)極大的創(chuàng)傷，甚至影響家庭和諧[1]。五子衍宗丸是男性不育癥的主要治療藥物，其屬于中藥制劑，內(nèi)含枸杞子、覆盆子、車(chē)前子、菟絲子及五味子等中藥材，具有補(bǔ)腎益精之功效，可在一定程度上改善不育癥狀，增強(qiáng)精子活性[2]。左卡尼汀屬于能量代謝的必需物質(zhì)，通過(guò)補(bǔ)充機(jī)體左卡尼汀儲(chǔ)備，可提高附睪組織、精漿中左卡尼汀濃度，加快精子代謝及成熟，增強(qiáng)精子運(yùn)動(dòng)能力，促使精卵結(jié)合[3]。本研究旨在分析左卡尼汀對(duì)男性不育癥患者精子活力、DNA 完整性及不良反應(yīng)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2020年1月于醫(yī)院就診的86例男性不育癥患者，按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，各43例。對(duì)照組年齡23～39歲，平均（29.64±2.47）歲；文化程度，大專(zhuān)21例、高中14例、初中8例；病程2～9年，平均（4.32±0.47）年；不育因素，生精障礙24例、精液異常19例。試驗(yàn)組年齡22～38歲，平均（29.62±2.45）歲；文化程度，大專(zhuān)20例、高中15例、初中8例；病程2～9年，平均（4.34±0.48）年；不育因素，生精障礙23例、精液異常20例。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究已獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：夫妻性生活正常，無(wú)避孕措施同居1年以上；精子DNA 碎片率>15%；精子濃度低于15.0×106/ml 或射精1 h 內(nèi)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率低于32%；患者及家屬已簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴泌尿系統(tǒng)感染的患者；合并精索靜脈曲張的患者；睪丸發(fā)育異常的患者；對(duì)本研究用藥過(guò)敏的患者。

1.2 方法

對(duì)照組口服五子衍宗丸（四川旭華制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20093630）治療，6.0 g/次，2次/d。

試驗(yàn)組口服左卡尼汀口服溶液（東北制藥集團(tuán)沈陽(yáng)第一制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H19990372）治療，1.0 g/次，3次/d。

兩組均持續(xù)治療3個(gè)月。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

（1）精子活力：于治療前及治療3個(gè)月后，指導(dǎo)患者禁欲3～5 d，手淫獲取精液后，常規(guī)室溫靜置30 min，于37 ℃ Marker 板中置入10 μl 樣品，通過(guò)美國(guó)Hamilton Thorne 公司生產(chǎn)的計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀測(cè)定兩組的精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率及精子總活率。（2）DNA 完整性：于治療前及治療3個(gè)月后，通過(guò)精子染色質(zhì)擴(kuò)散法測(cè)定兩組的精子DNA 碎片率，試劑盒購(gòu)自深圳市博銳德生物科技有限公司，儀器選用貝克曼庫(kù)爾特CytoFLEX 流式細(xì)胞儀，碎片率越低表明DNA 完整性越佳。（3）不良反應(yīng)：口干、胃腸不適。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 精子活力

治療前，兩組精子活力比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療3個(gè)月后，試驗(yàn)組精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率及精子總活率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組精子活力比較（）

表1 兩組精子活力比較（）

組別 例數(shù)精子濃度（×106/ml）前向運(yùn)動(dòng)精子百分率（%） 精子總活率（%）3 個(gè)月后 治療前 治療3 個(gè)月后試驗(yàn)組 43 20.65±4.25 31.27±5.42 21.33±4.05 35.74±5.72 29.58±3.96 48.75±5.82對(duì)照組 43 21.02±4.33 25.14±5.07 20.36±4.01 29.66±5.31 30.11±4.03 40.39±5.56 t 0.400 5.416 1.116 5.108 0.615 6.811 P 0.690 0.000 0.268 0.000 0.540 0.000治療前 治療3 個(gè)月后 治療前 治療

2.2 DNA 碎片率

治療前，兩組DNA 碎片率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療3個(gè)月后，兩組DNA 碎片率均低于治療前，且試驗(yàn)組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組DNA 碎片率比較（%，）

表2 兩組DNA 碎片率比較（%，）

組別 例數(shù) 治療前 治療3 個(gè)月后 t P試驗(yàn)組 43 23.41±3.27 12.14±2.05 19.148 0.000對(duì)照組 43 23.28±3.31 16.94±2.87 9.490 0.000 t 0.183 8.924 P 0.855 0.000

2.3 不良反應(yīng)

對(duì)照組出現(xiàn)1例口干，不良反應(yīng)發(fā)生率為2.33%（1/43）；試驗(yàn)組出現(xiàn)1例口干、1例胃腸不適，不良反應(yīng)發(fā)生率為4.65%（2/43）。兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.000，P=1.000）。

3 討論

男性不育癥發(fā)病復(fù)雜，誘發(fā)因素包括精液異常、生精障礙、內(nèi)分泌疾病及精卵結(jié)合障礙等，且隨著對(duì)該病的深入研究，發(fā)現(xiàn)不育患者精子DNA 損傷程度遠(yuǎn)高于生育正常男性[4]。精子DNA 屬于遺傳信息載體，維持其完整性是確保遺傳物質(zhì)正確傳輸給子代的前提，也是受精及胚胎發(fā)育的重要物質(zhì)。當(dāng)機(jī)體受生殖系統(tǒng)感染、吸煙、睪丸局部溫度升高等多種因素影響時(shí)，體內(nèi)活性氧濃度增加，促使精液出現(xiàn)氧化應(yīng)激反應(yīng)；而精子DNA 核酸中含有親核基團(tuán)，活性氧可與之發(fā)生堿基反應(yīng)，加快DNA 鏈聚集，改變DNA結(jié)構(gòu)，使得DNA 鏈斷裂，且能夠減少超氧化物歧化酶合成，導(dǎo)致精子DNA 損傷。

五子衍宗丸是中醫(yī)治療男性不育癥患者的經(jīng)典古方，具有補(bǔ)腎益氣、填精補(bǔ)髓、壯陽(yáng)之效，可加快生精上皮細(xì)胞增殖，增加曲細(xì)精管內(nèi)精原細(xì)胞及初級(jí)精母細(xì)胞數(shù)量，從而加快精子生成，提高精子濃度[5]。但其整體效果欠佳，對(duì)于DNA 修復(fù)效果不甚理想。DNA 碎片率是反映精子DNA 損傷的重要指標(biāo)，可獨(dú)立預(yù)測(cè)精子質(zhì)量，通過(guò)監(jiān)測(cè)其變化，利于判斷男性不育癥療效。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組治療3個(gè)月后的精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率及精子總活率均高于對(duì)照組，DNA 碎片率低于對(duì)照組，且兩組均無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)，表明左卡尼汀治療男性不育癥患者可提高精子活力，減輕精子DNA 損傷，加快病情好轉(zhuǎn)。左卡尼汀口服進(jìn)入人體后可經(jīng)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)方式進(jìn)入精子內(nèi)，提高精子能量?jī)?chǔ)備，并全程參與精子運(yùn)行過(guò)程，幫助精子減少膜上脂類(lèi)含量，升高膽固醇、飽和脂肪酸等物質(zhì)比率，從而改變膜成分及結(jié)構(gòu)，促使精子膜流動(dòng)性增強(qiáng)，利于精卵結(jié)合[6]；同時(shí)，可改善細(xì)胞脂肪、蛋白質(zhì)等代謝，刺激支持細(xì)胞攝取葡萄糖，提高乳酸脫氫酶活性，加快乳酸鹽、丙酮酸氧等生殖細(xì)胞成熟所需物質(zhì)分泌，促進(jìn)睪丸內(nèi)精子成熟；此外，其具有抗氧化作用，可抑制活性氧生成，增強(qiáng)機(jī)體活性氧清除能力，從而減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，保護(hù)精子DNA 完整性，且該藥可減少線粒體呼吸鏈氧化代謝中活性氧的產(chǎn)生，進(jìn)一步阻止活性氧損傷精子DNA。

綜上所述，左卡尼汀可增強(qiáng)男性不育癥患者的治療效果，提高精子總活率，增加精子濃度，降低精子DNA 碎片率，且安全性較高。