(安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部豬肉質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)調(diào)控與健康安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽 鳳陽(yáng) 233100)
腹瀉一直是養(yǎng)豬業(yè)的難題,其可以引起病豬生產(chǎn)性能下降,病死率增高,嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致死亡。目前治療方法多為使用見(jiàn)效較快的抗生素藥物,雖然能達(dá)到快速治愈的目的,但是易導(dǎo)致病原菌形成耐藥性,不能從根本上提升家畜免疫力,降低腹瀉發(fā)病率[1]。本研究根據(jù)中獸醫(yī)基礎(chǔ)理論,評(píng)價(jià)復(fù)方中草藥的實(shí)際效果。
復(fù)方附芩連止痢粗提液:附子90 kg,黨參40 kg,白術(shù) 40 kg,茯苓 40 kg,黃連 30 kg,熟地 30 kg,甘草30 kg。
免疫增強(qiáng)顆粒:黃芪200 kg,板蘭根40 kg,大青葉60 kg,制成顆粒。
將仔豬分成2組,試驗(yàn)組15窩,共162頭;對(duì)照組15窩,共165頭。將保育豬亦分成2組,試驗(yàn)組27頭,對(duì)照組34頭。
1.2.1 仔豬腹瀉治療試驗(yàn)。將出現(xiàn)腹瀉的仔豬分為2組,對(duì)照組只使用抗生素,試驗(yàn)組在使用抗生素的基礎(chǔ)上內(nèi)服中草藥3~5 mL(根據(jù)仔豬大小和腹瀉程度確定用藥量),直至仔豬徹底康復(fù),觀察記錄仔豬成活情況。

表1 第一批試驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥

表2 第二批試驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥
1.2.2 保育豬免疫提高試驗(yàn)。給對(duì)照組飼喂常規(guī)料,試驗(yàn)組在日糧中拌入相應(yīng)劑量的中草藥(每噸飼料中加入30 kg中草藥顆粒)。觀察記錄對(duì)照組和試驗(yàn)組動(dòng)物的發(fā)病率、血清指標(biāo)等。

表3 動(dòng)物分組及給藥情況
對(duì)保育豬分別在飼喂中草藥前進(jìn)行第一次采血,在飼喂中草藥20 d以后,進(jìn)行第二次采血,在飼喂中草藥40 d以后,進(jìn)行第三次采血。每天觀察記錄仔豬情況,分別在試驗(yàn)前、試驗(yàn)后20 d和試驗(yàn)后40 d采血,每頭豬采血3~5 mL,其中一支抗凝管采集1 mL全血,另外一支促凝管采集2 mL全血,3000 rmp/min離心,離心10 min,分離出血清后-20℃保存待測(cè)。隨后進(jìn)行小保育豬精神狀態(tài)、發(fā)病率、血清指標(biāo)(IgA、IgG、IgM)、抗體水平檢測(cè)(豬瘟、藍(lán)耳、偽狂犬)及血液中病原的檢測(cè)(豬瘟、藍(lán)耳、乙腦、圓環(huán)、細(xì)小、偽狂犬等病毒)。
仔豬發(fā)生腹瀉后立即使用藥物直至康復(fù),記錄用藥量、仔豬腹瀉好轉(zhuǎn)情況,計(jì)算仔豬治愈率。
對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel 2013進(jìn)行初步整理,用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析 (One-way ANOVA),對(duì)差異顯著者進(jìn)行多重比較。
從表4、表5可知,第一批試驗(yàn)中,中草藥治療組的平均治愈率為100%,極顯著地高于西藥治療組(20%),第二批試驗(yàn)中,試驗(yàn)組的總治愈率為59.26%,高于對(duì)照組(34.55%)。從表6、表7可知,第二批試驗(yàn)組共涉及15窩,好轉(zhuǎn)的有13窩,平均在4 d后出現(xiàn)好轉(zhuǎn),在第七天或第八天完全好轉(zhuǎn)。對(duì)照組共涉及15窩,1窩因未用藥而被舍棄,好轉(zhuǎn)的有9窩,平均在8 d后出現(xiàn)好轉(zhuǎn),在13 d后完全好轉(zhuǎn)。

表4 復(fù)方附芩連止痢粗提液治療仔豬腹瀉的結(jié)果(第一批)

表5 復(fù)方附芩連止痢粗提液治療仔豬腹瀉的結(jié)果(第二批)

表6 第二批試驗(yàn)組用藥天數(shù)與出現(xiàn)好轉(zhuǎn)和死亡情況表

表7 第二批對(duì)照組用藥天數(shù)與出現(xiàn)好轉(zhuǎn)和死亡情況表
2.2.1 免疫增強(qiáng)顆粒對(duì)對(duì)保育豬免疫球蛋白的影響。由圖1可知,中草藥復(fù)方對(duì)保育豬免疫功能具有增強(qiáng)作用,結(jié)果顯示,該中藥復(fù)方組與對(duì)照組相比,在給藥40 d后 IgA、IgG 含量提高顯著(P<0.05),說(shuō)明該中草藥復(fù)方能夠使保育豬的免疫功能增強(qiáng)。當(dāng)受到抗原的刺激時(shí)血清中首先出現(xiàn)IgM。隨著免疫反應(yīng)持續(xù)進(jìn)行,其含量不斷減少,其能夠抵抗細(xì)菌、病毒,使動(dòng)物免于疾病的威脅。
2.2.2 免疫增強(qiáng)顆粒對(duì)保育豬抗氧化性能的影響。由圖2可知,與對(duì)照組相比中草藥復(fù)方組在給藥40 d時(shí),谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(T-SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)的含量均有提高,說(shuō)明中草藥復(fù)方能顯著增強(qiáng)仔豬體內(nèi)抗氧化物酶的活性。
2.2.3 免疫增強(qiáng)顆粒對(duì)保育豬膽固醇與脂蛋白的影響。由圖3可知,在用藥40 d時(shí)能降低仔豬血清中膽固醇含量,提高血清中甘油三酯含量,但是差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比,飼料中添加中草藥復(fù)方組保育仔豬血清中的低密度脂蛋白含量有所下降,其隨中草藥復(fù)方添加的時(shí)長(zhǎng)而逐漸降低。與對(duì)照組相比,飼料中添加中草藥復(fù)方組保育仔豬血清中的高密度脂蛋白含量均有升高,其中在給藥20 d時(shí),中草藥復(fù)方組增加最明顯。與對(duì)照組相比,飼料中添加中草藥復(fù)方組保育仔豬血清中的總脂蛋白脂肪酶(LPL)含量隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,尤其在40 d時(shí)有所升高,但與對(duì)照組差異不顯著。
2.2.4 免疫增強(qiáng)顆粒對(duì)保育豬血液中6種病毒抗原的影響。由表8可知,試驗(yàn)20 d時(shí)保育豬對(duì)照組同時(shí)感染圓環(huán)Ⅱ型和偽狂犬病毒的比率為43%(3/7),保育豬試驗(yàn)組只有1頭感染偽狂犬病毒,感染比率為20%(1/5);試驗(yàn) 40 d 時(shí),保育豬對(duì)照組感染比率為33%(2/6),保育豬試驗(yàn)組圓環(huán)病毒感染比率為25%(2/8)。由于保育豬35日齡時(shí)注射了偽狂犬病毒活疫苗,故試驗(yàn)至20 d時(shí),能夠檢測(cè)到試驗(yàn)組和對(duì)照組保育豬血液中的偽狂犬病毒。由于飼喂中草藥能夠增強(qiáng)保育豬免疫力,所以從試驗(yàn)組血液中檢測(cè)到的偽狂犬病毒陽(yáng)性率低于對(duì)照組。

表8 豬血液中6種病毒抗原檢測(cè)結(jié)果
2.2.5免疫增強(qiáng)顆粒對(duì)保育豬血清中3種病毒抗體的影響。由表9可知,保育豬試驗(yàn)前沒(méi)有被藍(lán)耳病毒感染,在飼喂中草藥20 d后,試驗(yàn)組藍(lán)耳顯示陰性,而對(duì)照組藍(lán)耳為陽(yáng)性。在飼喂中草藥40 d時(shí),試驗(yàn)組和對(duì)照組均為陽(yáng)性,但是對(duì)照組高于試驗(yàn)組。由表10可知,保育豬試驗(yàn)前豬瘟抗體為可疑,在飼喂中草藥20 d后,試驗(yàn)組豬瘟為陰性,而對(duì)照組豬瘟為可疑;在飼喂中草藥40 d時(shí),試驗(yàn)組和對(duì)照組均為陽(yáng)性,但是對(duì)照組高于試驗(yàn)組。由表11可知,保育豬試驗(yàn)前偽狂犬gE抗體(非疫苗毒抗體,野毒抗體)為陽(yáng)性,試驗(yàn)組略高于對(duì)照組。在飼喂中草藥20 d后,試驗(yàn)組和對(duì)照組偽狂犬野毒抗體均為陽(yáng)性,但是試驗(yàn)組略低于對(duì)照組。在飼喂中草藥40 d時(shí),試驗(yàn)組和對(duì)照組均為陽(yáng)性,但是均比試驗(yàn)20 d時(shí)野毒抗體為低,而且試驗(yàn)組略低于對(duì)照組。

表9 保育豬PRRSV抗體檢測(cè)(s/p<0.4 為陰性,s/p≥0.4 為陽(yáng)性)

表10 保育豬CSFV抗體檢測(cè)(阻斷率%≤30為陰性,30<阻斷率%<40為可疑,阻斷率%≥40為陽(yáng)性)

表11 保育豬PRVgE抗體檢測(cè)(s/n>0.70 陰性,0.6<s/n≤0.70 可疑,s/n≤0.60 陽(yáng)性;s/n 值越高,代表抗體水平越低)
第一批試驗(yàn)組15窩仔豬共162頭,總計(jì)治愈96頭,總治愈率為59.26%,表明中草藥復(fù)方附芩連止痢粗提液對(duì)仔豬腹瀉具有顯著療效,能夠顯著提高仔豬存活率。第二批試驗(yàn)組共15窩,好轉(zhuǎn)的有13窩,平均在4 d后出現(xiàn)好轉(zhuǎn),在第七天或第八天完全好轉(zhuǎn)。這說(shuō)明中草藥復(fù)方附芩連止痢粗提液可以促進(jìn)腹瀉仔豬提前康復(fù),顯著提高治愈率[2]。
從第一批試驗(yàn)組仔豬腹瀉治療效果可以看出,單獨(dú)使用中草藥復(fù)方附芩連止痢粗提液的平均治愈率可以達(dá)到100%,而單獨(dú)使用抗生素的對(duì)照組的平均治愈率只有20%。表明中草藥復(fù)方附芩連止痢粗提液完全可以替代抗生素治療仔豬腹瀉,從而達(dá)到綠色無(wú)抗的目的。
中藥復(fù)方免疫增強(qiáng)顆粒能提高保育豬免疫力,促進(jìn)其生長(zhǎng),提高其抗氧化能力,調(diào)理其消化代謝機(jī)能,提高其抗病毒能力[3]。中草藥復(fù)方免疫增強(qiáng)顆粒在給藥40 d后,使豬的IgA、IgG含量顯著提高。
飼喂復(fù)方中草藥能顯著增強(qiáng)保育豬的免疫力,盡管在低日齡保育豬體內(nèi)檢測(cè)到了圓環(huán)Ⅱ型病毒和偽狂犬病毒野毒,但是中草藥飼喂試驗(yàn)組的感染率顯著低于對(duì)照組。需要密切監(jiān)控低日齡保育豬的野毒感染情況,同時(shí)增加中草藥飼喂劑量和次數(shù),切實(shí)提高保育豬的免疫力,逐步凈化豬場(chǎng)圓環(huán)Ⅱ型、藍(lán)耳和偽狂犬野毒株。