非變性Ⅱ型膠原蛋白改善犬骨關節炎的研究

王海燕 張曉秋 鄒國慶 劉愛青 閆 征

（1.北京盛美諾生物技術有限公司，北京 100000；2.北京懿德動物醫院有限公司，北京 100000；3.安徽盛美諾生物技術有限公司，安徽淮北 235000）

骨關節炎是犬的一種退行性骨關節炎疾病，也是犬的一種比較常見多發的疾病。根據統計約有20%的1歲以上的犬，存在不同程度的關節炎，且在臨床上往往被忽略。隨著年齡的增加骨關節炎發生率升高，約有95% 的病例發生在5歲以上的犬。關節炎通常影響大型犬，實際上所有年齡、不同品種的犬都可能發生骨關節炎，而且所有關節都有可能發生[1]。據臨床統計犬骨關節炎的發病率髖關節為42.5%，后肢膝關節18.5%，肘關節12.8%[2]。骨關節炎對寵物犬的健康與福利造成了嚴重的損害。

目前常用的改善癥狀藥物有非甾體類抗炎藥、糖皮質激素以及營養補充劑如硫酸軟骨素、氨基葡萄糖、透明質酸等[3]，但是藥物治療會有副作用，而營養補充劑的效果也備受爭議[4]。非變性II型膠原蛋白（也稱之為含II型膠原蛋白的軟骨粉）20世紀90年代開始用于人的關節炎治療[5]，此后也用于馬和犬骨關節炎治療上，具有明顯改善效果，且無任何毒副作用[6-7]。本研究選用非變性II型膠原蛋白治療骨關節炎犬，探討其作用效果和機理。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

由北京懿德動物醫院有限公司征集30只無肝腎疾病的骨關節炎犬，平均年齡8±1.54歲，平均體重30kg±3.78kg。

1.2 實驗方法

將實驗動物隨機分為兩組，一組為對照組，正常飼喂犬糧；一組為實驗組，每天飼喂添加40mg非變性II型膠原蛋白犬糧。非變性II型膠原蛋白由北京盛美諾生物技術有限公司提供。實驗時間3個月。根據參考文獻[8-9]，由臨床醫生進行打分評估，分別記錄初始和3個月時分數。打分方法：（1）整體疼痛評價：起來后坐下和坐下后站起來的疼痛和困難；（2）跛行疼痛評價：強體力活動后進行評估的，包括跛瘸的跡象和四肢的僵硬；（3）四肢疼痛評價：拉伸或者彎曲幾分鐘四肢的疼痛來評估。所有評分的參數分成5個等級，從0（無癥狀）到5（嚴重）。

1.3 統計方法

用SPSS19.0統計軟件，對所有數據進行顯著性檢驗，并進行分析比較。

2 結果與分析

2.1 整體疼痛評價

如圖1所示，對照組和實驗組開始時整體疼痛分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組整體疼痛有所增加，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組整體疼痛明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著改善犬骨關節炎癥狀，降低起來后坐下和坐下后站起來的困難，并能有效緩解疼痛。

圖1 整體疼痛評價結果

2.2 跛行疼痛評價

如圖2所示，對照組和實驗組開始時跛行疼痛評價分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組跛行疼痛評價略有提高，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組跛行疼痛評價明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著改善骨關節炎犬的跛行，有效緩解運動后疼痛，減輕僵硬癥狀。

圖2 跛行疼痛評價

2.3 四肢疼痛評價

如圖3所示，對照組和實驗組開始時四肢疼痛評價分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組四肢疼痛評價略有提高，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組四肢疼痛評價明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著降低骨關節炎犬四肢疼痛。

圖3 四肢疼痛評分

2.4 安全性評價

表1 開始時和3個月后體重

對照組和實驗組開始時體重相似，3個月后對照組體重略有下降，實驗組有所增加，差異不顯著（P>0.05），見表1。實驗組經臨床診斷，無明顯其他病癥，肝和腎功能（谷丙轉氨酶，谷草轉氨酶，血尿素氮，肌酐）相關數據未顯示任何顯著變化，說明非變性II型膠原蛋白具有安全性。

3 討論

骨關節炎（Osteoarthritis）是一種由創傷、關節先天性異常、關節畸形、軟骨破裂或破壞等原因造成的慢性、漸進性疾病。發生骨關節炎時，由于骨的結構之間發生摩擦可以引起犬關節不適、疼痛、活動受限和關節畸形等癥狀。犬骨關節炎最明顯的癥狀就是“跛行”即瘸腿；常見的癥狀還有站立困難，活動減少、關節腫脹、關節僵硬等1。炎癥因子在骨關節炎軟骨病變中起了重要作用；細胞因子作用導致滑膜組織激活、軟骨內在穩態發生改變、軟骨下骨受到損害，加速軟骨破壞[10]。

非變性II型膠原蛋白能夠改善骨關節炎的作用機理為口服免疫耐受（Oral tolerance，簡稱OT），是指口服某種蛋白質抗原后，導致局部腸相關淋巴組織特異免疫，從而抑制全身免疫應答，是一種外周免疫耐受形式。非變性II型膠原蛋白是以動物軟骨為原料，采用低溫技術提取技術，得到的完整保留大分子膠原蛋白三螺旋結構未發生變化的膠原蛋白產品，分子量在30萬道爾頓左右[4]。國外也有人研究了非變性II型膠原蛋白對骨關節炎犬的作用。Peal等人2007年對骨關節炎犬飼喂非變性II型膠原蛋白120d和停止飼喂后30d分別進行評估。從總體疼痛、跛行時疼痛、運動時跛行評分結果發現，安慰劑組無效果，而實驗組可以顯著降低骨關節炎造成的疼痛；但停止飼喂后30d，疼痛恢復至原來水平[11]。Gupta等人2011年研究了非變性II型膠原蛋白對中度骨關節炎犬的改善，并以氨糖+硫酸軟骨素/天作為做對照，實驗時間150d。結果發現只有非變性II型膠原蛋白能夠降低由骨關節炎導致的疼痛[6]。

在本研究中，發現每天飼喂骨關節炎犬40mg非變性II型膠原蛋白3個月后，整體疼痛、跛行以及四肢疼痛明顯改善，且具有安全無毒的特點，與前人研究結果一致。在國外非變性II型膠原蛋白已經廣泛應用于犬、貓等寵物食品中，但在國內尚屬空白，只有極少數幾家在犬類營養劑中添加，市場潛力巨大。