強直性脊柱炎患者血清軟骨寡聚基質(zhì)蛋白水平及意義研究

陳佳麗， 高錦團， 梅永紅

強直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)是累及中軸骨、骶髂關(guān)節(jié)/外周關(guān)節(jié)，可伴關(guān)節(jié)外表現(xiàn)的自身免疫性炎癥性疾病，其主要病理改變?yōu)榛ぱ准败浌亲冃浴⑵茐摹Ｔ摬『冒l(fā)于青年男性，早期癥狀不典型，病程持續(xù)時間長，病情難以控制，常因疼痛、脊柱關(guān)節(jié)畸形、功能受限而就診，可造成嚴重的社會經(jīng)濟負擔，故早期診斷并監(jiān)測疾病的炎癥和疾病活動至關(guān)重要[1]。血清軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)是1992年在類風濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)、反應性關(guān)節(jié)炎(reactive arthritis，ReA)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，OA)患者的血清和滑膜液中首次檢測到的一種組織特異性非膠原蛋白，主要在軟骨中表達，其次也可表達于肌腱、半月板、滑膜等組織中[2]。學者在RA和OA的研究中證明血清COMP水平可以反應軟骨損傷和滑膜炎癥。筆者采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme linked-immuno-sorbent assay，ELISA)檢測AS患者血清COMP水平及其他相關(guān)指標，探討COMP的水平與疾病活動性的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1對象 采用前瞻性隊列研究方法，收集2016年11月-2018年8月在風濕免疫科門診及住院確診的AS患者60例，活動組和非活動組各30例。入組標準：(1)符合1984年修訂的AS紐約標準[3]；(2)Bath強直性脊柱炎疾病活動性指數(shù)(BASDAI)評分≥4分納入活動組，評分<4分納入非活動組；(3)年齡16～60歲，男女不限；(4)近3月未使用相關(guān)藥物治療；(5)同意在研究期間規(guī)則服用治療藥物；(6)自愿參加此項目研究并經(jīng)過倫理委員會同意，遵守研究規(guī)定，自愿簽署書面知情同意書。排除標準：(1)合并其他風濕性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關(guān)節(jié)炎等患者；(2)有心血管、肺、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病或病史者；(3)目前或過去有惡性腫瘤病史者；(4)免疫缺陷、未控制的感染或活動性胃腸道疾病患者；(5)近期或過去有骨折等外傷史者；(6)嚴重骨質(zhì)疏松者；(7)孕婦、哺乳期婦女及近期有生育要求的男性或女性；(8)因其他情況研究者認為不宜參加本研究者。同時，收集年齡和性別相匹配的同期健康體檢人員30例作為對照組，均無風濕性疾病及相關(guān)疾病。

1.2方法 于8:00～10:00在安靜狀態(tài)下采集空腹靜脈血5 mL，2 000 r/min離心分離血清，用EP管分裝后-80 ℃冷凍保存，集中采用Human COMP ELISA Kit試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)進行檢測。收集AS患者同時期紅細胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)、C反應蛋白(C reactive protein，CRP)、血小板(platelet，PLT)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、球蛋白(globulin，GLB)、人白細胞抗原B27(human leukocyte antigen，HLA-B27)等檢測資料，并進行骶髂關(guān)節(jié)CT攝片和分級。12例活動期AS患者于治療24周前后檢測血清COMP水平及其他相關(guān)實驗室指標。詳細記錄受試者的性別、年齡、病程、健康狀況。

2 結(jié) 果

2.1一般資料 3組患者的性別、年齡等比較，差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，活動組的BASDAI、脊柱痛VAS高于非活動組(P<0.05)，其他一般資料比較，差別無統(tǒng)計學意義(表1)。

2.2血清COMP及其他實驗室指標比較 活動組和非活動組的COMP高于對照組(P<0.05)。活動組的CRP，ESR及GLB平均水平高于非活動組(P<0.05)，活動組與非活動組的PLT比較，差別無統(tǒng)計學意義(表2)。

2.3COMP與其他指標的相關(guān)性 血清COMP水平與BASDAI、脊柱痛VAS呈正相關(guān)(P<0.05)，與年齡、病程及CRP，ESR，PLT，GLB，CT等級無明顯相關(guān)(表3)。

表1 3組患者的一般資料比較

2.412例AS活動期患者治療前后COMP及實驗室指標比較 治療前COMP,CRP,ESR及GLB均高于治療后(P<0.05)，但PLT及TNF-α治療前后比較差別無統(tǒng)計學意義(表4)。

表2 3組患者血清COMP及其他實驗室指標比較

表3 COMP與其他指標的相關(guān)性分析

表4 12例AS活動期患者治療前后相關(guān)實驗室指標比較

3 討 論

AS的主要特征為中軸脊柱的炎癥和新骨形成，骨形成和骨吸收并存，當這些過程中出現(xiàn)不平衡，則導致患者的骨侵蝕，且通常導致進行性、不可逆的結(jié)構(gòu)損傷，從而造成殘疾、功能受限以及生活質(zhì)量的降低[4-5]，并帶來巨大的經(jīng)濟負擔。因此，評估AS患者對于了解患者病情、指導治療、評估療效有非常重要的意義。

COMP是軟骨細胞外基質(zhì)的重要結(jié)構(gòu)和功能成分，在細胞增殖和凋亡以及軟骨組織中細胞運動和附著的調(diào)控中起著一定的作用。關(guān)節(jié)損傷時，COMP以碎片的形式分泌，先進入滑膜液，然后進入血清。血清COMP水平在炎癥的早期即可檢測到，遠早于X線關(guān)節(jié)退變和不可逆損害。將COMP作為軟骨代謝生物標志物，可以很好地反映關(guān)節(jié)退行性炎癥變化，有風險的患者和早期炎癥的患者可以通過血清COMP評估得到有效的識別[6]。本研究對AS患者和健康體檢者的血清COMP水平進行比較，結(jié)果顯示活動組、非活動組血清COMP水平均高于對照組(P<0.05)，說明存在關(guān)節(jié)損害的患者血清COMP水平會升高。活動組血清COMP水平高于非活動組(P<0.05)，進一步說明疾病活動期有更高的血清COMP水平。非活動組AS患者血清COMP水平高于對照組(P<0.05)，說明即使在AS緩解期，軟骨也在一定程度上存在持續(xù)性損傷。這與國內(nèi)學者劉堅、馬英淳等的研究結(jié)果相似[7]。Saghafi等的研究顯示，COMP不僅在進展期RA患者中具有高水平，對晚期RA患者的診斷也具有較高的敏感性和特異性，COMP的產(chǎn)生與RA患者關(guān)節(jié)持續(xù)損傷有關(guān)[8]。黃闊的研究認為，COMP是軟骨代謝標志物中唯一可持續(xù)表達，并可推測關(guān)節(jié)炎進程的最佳生物學標志物[9]。AS患者外周關(guān)節(jié)滑膜炎的病理改變在光鏡下與RA患者的滑膜炎病理變化完全相同，僅在滑膜浸潤的細胞數(shù)量上有微小差別[10]。推測COMP水平升高亦可作為AS患者炎癥反應的指標，在一定程度上反應軟骨損傷和疾病活動性。

CRP和ESR是兩個經(jīng)典的急性時相反應的炎癥指標，可以反映機體的炎癥狀態(tài)。AS活動組患者血清CRP和ESR平均水平高于非活動組(P<0.05)，這與血清COMP水平在2組中的檢測結(jié)果相似，可進一步支持COMP作為AS患者炎癥指標和反應疾病活動的這一觀點。活動組GLB水平高于非活動組，考慮與AS疾病活動時B淋巴細胞產(chǎn)生免疫球蛋白升高有關(guān)。GLB包括多種免疫球蛋白，而AS疾病活動時主要升高的是免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)[1]，因此，有待進一步分析AS患者的免疫球蛋白水平。

本研究的結(jié)果顯示，血清COMP水平與BASDAI、脊柱痛VAS呈正相關(guān)(P<0.05)，這與有關(guān)脊柱關(guān)節(jié)炎(spondyloarthritis，SpA)患者血清COMP水平的研究結(jié)果相近[11]。BASDAI評分是臨床上常用的一個AS疾病活動評分指標，血清COMP水平與BASDAI評分、脊柱痛VAS呈正相關(guān)，說明血清COMP濃度越高，AS患者急性炎癥反應和疼痛越明顯。本研究結(jié)果還顯示，血清COMP水平與CRP及ESR無明顯相關(guān)性(P<0.05)，而有學者對SpA患者的研究顯示血清COMP水平與CRP及ESR呈正相關(guān)[12-14]。Sakthiswary等對61例RA患者的血清COMP水平研究顯示，CRP和ESR與血清COMP水平無顯著相關(guān)性[11]；一些研究也表明血清COMP水平與血清CRP及ESR或其他急性炎癥指標沒有相關(guān)性[12-14]。推測COMP似乎具有獨立于炎癥調(diào)節(jié)過程的致病機制。AS患者中有很大一部分CRP及ESR不升高或者僅輕微升高，CRP的基因位點多態(tài)性會影響其表達水平，從而影響其與AS病情活動度的相關(guān)性[15]；而且ESR也會受血漿白蛋白濃度、α-球蛋白以及紅細胞的大小、形狀和數(shù)量等多種因素的影響，因此對炎癥反應的敏感性和特異性都不高[16]。雖然國內(nèi)外對于血清COMP與CRP和ESR的相關(guān)性研究結(jié)果不一致，但是作為兩種經(jīng)典的全身炎癥反應標志物，CRP和ESR在AS患者疾病活動性和療效評價方面仍有非常重要的作用[17-21]。因此，結(jié)合血清COMP，CRP和ESR可以更好地評價AS患者的炎癥反應、疾病活動性并指導治療。

本研究還對12例活動期患者治療前后的血清COMP水平及相關(guān)實驗室指標進行了分析，結(jié)果顯示，治療后血清的COMP，CRP，ESR及GLB均較治療前明顯下降(P<0.05)，提示COMP可以作為AS患者療效的參考指標。Skoumal等的研究證明，經(jīng)激素治療后RA患者血清的COMP水平及CRP明顯下降，COMP可以作為監(jiān)測RA患者治療反應的標志物[22]。Crnkic等的研究顯示，接受依那西普治療的RA患者，治療3月后血清COMP水平下降，治療6月時血清COMP仍維持在低水平[13]。Morozzi等的研究得出，與基線水平較高的RA患者相比，血清COMP基線水平較低的患者有較高的ACR70反應率，而與全身性炎癥的狀態(tài)無關(guān)，并且得出結(jié)論，COMP似乎具有獨立于調(diào)節(jié)炎癥機制的致病作用[23]。結(jié)合12例AS活動期患者治療前后血清COMP水平和學者們的研究結(jié)果，說明血清COMP水平可以作為監(jiān)測AS治療效果的參考指標，了解COMP水平有助于醫(yī)師考慮繼續(xù)觀察或修改當前的治療方案。本研究結(jié)果顯示，治療前后TNF-α水平無明顯改變，考慮可能是樣本量不足，同時也不排除檢測方法所導致的誤差可能。

本研究認為，血清COMP是一種新的可以反映AS患者炎癥的血清學標志物，可在一定程度上反映軟骨損傷和疾病活動性，結(jié)合血清CRP及ESR結(jié)果可以更好地評價AS患者的炎癥反應、疾病活動性并指導治療。由于樣本量少，缺少外周關(guān)節(jié)影像學檢查，本研究具有局限性，有待進一步擴大樣本量，完善外周關(guān)節(jié)彩超、骨密度、TNF-α和免疫球蛋白資料，觀察骶髂關(guān)節(jié)影像學的變化，進一步了解血清COMP在AS患者發(fā)病過程中的機制和臨床意義。