艱難梭菌感染的實驗室診斷技術研究進展 *

袁寶玉，沈芳

(復旦大學附屬上海市第五人民醫院檢驗科，上海 200240)

艱難梭菌作為人類腸道正常菌群，是一種專性厭氧革蘭陽性芽孢桿菌，由于其較難在實驗室中分離和生長而被命名為艱難梭菌。腸道菌群的平衡對于維持人體健康至關重要，而廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑或化療藥物的大量使用會引起菌群失調，導致艱難梭菌感染(Clostridiumdifficileinfection, CDI)及相關性腹瀉，嚴重時可導致偽膜性結腸炎、暴發性結腸炎、中毒性巨結腸甚至死亡[1]。近年來，CDI發病率顯著增加，嚴重威脅公共衛生安全。有數據表明2003年美國出院人群CDI發病率為7.5‰，2012年增加到13.5‰[2]，平均每年有453 000人感染、29 000人死亡[3-4]，由CDI導致的經濟負擔為4.36～30億美元[5]。目前，CDI已成為重要的醫院感染之一，及早、正確地根據相關癥狀及實驗室檢查結果診斷CDI，不僅有助于臨床診療和疾病預防，還可降低不必要的醫療費用支出。本文就常用的艱難梭菌實驗室診斷方法進行綜述，以期為CDI診斷提供方法學參考。

1 目前常規使用的艱難梭菌實驗室診斷方法

艱難梭菌的實驗室診斷技術一般分為3類：微生物培養、免疫學檢測(艱難梭菌毒素、谷氨酸脫氫酶)和分子生物學檢測。

1.1微生物培養

1.1.1艱難梭菌的厭氧培養 艱難梭菌是專性厭氧菌，對培養條件要求嚴格，在常規厭氧培養條件下不易生長，在環絲氨酸-頭孢西丁-果糖瓊脂(cycloserin-cefoxitin-fructose agar, CCFA)培養基中厭氧培養24～48 h時，可形成白色或淡黃色、邊緣不整齊以及典型馬糞氣味的菌落，在紫外線照射下可見黃綠色熒光，因此使用CCFA進行培養后，可根據菌落形態、熒光特點、氣味和革蘭染色結果進行鑒定[6]。……