乙型肝炎肝硬化患者腸道菌群與血清炎癥因子及肝功能水平的關(guān)系分析

黃漢麟 鄭鎮(zhèn)森 黃凱濤

廣東省汕頭市潮陽(yáng)區(qū)大峰醫(yī)院消化內(nèi)科 515154

肝硬化是慢性肝病發(fā)展的終末階段，以肝細(xì)胞廣泛壞死、肝小葉結(jié)構(gòu)破壞、結(jié)節(jié)性再生、假小葉形成等為主要病理組織學(xué)改變。乙型肝炎肝硬化由長(zhǎng)期乙肝病毒感染和復(fù)制破壞肝臟細(xì)胞所引起，患者早期無(wú)明顯癥狀體征，以后隨著肝臟代償功能下降，會(huì)出現(xiàn)明顯肝功能損害與門脈高壓表現(xiàn)，并累及多系統(tǒng)，不易或不可逆轉(zhuǎn)，是導(dǎo)致患者死亡的重要原因[1]。有研究指出，乙肝會(huì)引起復(fù)雜的免疫反應(yīng)，VHC失代償可導(dǎo)致全身炎性癥狀，會(huì)釋放大量炎癥因子，參與肝細(xì)胞損傷機(jī)制，加速病情惡化，抑制炎癥因子釋放對(duì)控制患者病程進(jìn)展、改善預(yù)后具有積極作用[2]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群在人體營(yíng)養(yǎng)吸收、新陳代謝、免疫功能等方面發(fā)揮著重要作用，一旦菌群穩(wěn)態(tài)遭到破壞，可引起多種健康問(wèn)題，也是研究認(rèn)為的導(dǎo)致VHC發(fā)生與進(jìn)展的“幫兇”[3]。本文對(duì)腸道菌群同VHC患者炎癥因子與肝功能的關(guān)系進(jìn)行研究，以期為本病臨床治療提供方向和思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2019年10月我院收治的VHC患者80例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：慢性乙型肝炎所致VHC，診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)《肝硬化診治指南》(2019)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；年齡>18歲；對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他肝臟疾病；合并感染性疾病或存在感染傾向；合并其他明確可以引起腸道菌群紊亂的疾病；近3個(gè)月內(nèi)服用過(guò)影響腸道菌群的制劑。依據(jù)肝功能Child-Pugh改良分級(jí)結(jié)果不同分為三組。試驗(yàn)1組(A級(jí)，24例)：男13例，女11例，年齡39～75歲，平均年齡(56.2±10.9)歲。試驗(yàn)2組(B級(jí)，31例)：男17例，女14例，年齡35～78歲，平均年齡(55.8±12.1)歲。試驗(yàn)3組(C級(jí)，25例)：男14例，女11例；年齡38～76歲，平均年齡(56.0±11.4)歲。另根據(jù)一般資料相近原則，選取同期30例成年健康體檢志愿者為對(duì)照組，排除標(biāo)準(zhǔn)同試驗(yàn)組。其中男18例，女12例；年齡36～77歲，平均年齡(55.9±11.3)歲。各組基線資料兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 采集兩組晨起糞便樣本(干便)，常規(guī)送檢試驗(yàn)室，取0.5g新鮮樣本，加入4.5ml生理鹽水中(換算勻漿比例10%)充分混勻，并以10倍連續(xù)稀釋法繼續(xù)稀釋至10-9，分別取1ml稀釋后的樣本接種在培養(yǎng)基上，對(duì)具有代表性的乳桿菌、腸桿菌、梭菌、雙歧桿菌、腸球菌進(jìn)行培養(yǎng)和測(cè)定。腸桿菌和腸球菌為需氧菌，35℃孵育24h，乳桿菌、梭菌、雙歧桿菌為厭氧菌，抽氣換氣培養(yǎng)法培養(yǎng)48h，采用全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)鑒定細(xì)菌和計(jì)算細(xì)菌總量。另采集兩組清晨空腹靜脈血樣，常規(guī)送檢試驗(yàn)室，提取血清，以全自動(dòng)生化分析及配套試劑測(cè)定炎癥因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)以及肝功能指標(biāo)血清總膽紅素(TBil)與白蛋白(ALB)。基于測(cè)定的TBil、ALB水平，綜合患者臨床癥狀，依據(jù)Child-Pugh改良分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，將患者肝功能分為A、B、C三級(jí)(C級(jí)患者肝臟儲(chǔ)備功能最差，A級(jí)最好)，分別納入試驗(yàn)1、2、3組，結(jié)合對(duì)照組，比較觀察各組指標(biāo)差異，分析指標(biāo)相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以SPSS21.0軟件統(tǒng)計(jì)分析所得數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間總體比較方差分析，多組間兩兩比較SNK-q檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腸道菌群指標(biāo) 各試驗(yàn)組乳桿菌、雙歧桿菌水平均低于對(duì)照組；各試驗(yàn)組腸桿菌、梭菌、腸球菌水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且乳桿菌、雙歧桿菌水平隨肝功能的下降呈遞減趨勢(shì)，腸桿菌、梭菌、腸球菌隨肝功能的下降呈遞增趨勢(shì)，組間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組腸道菌群指標(biāo)比較

2.2 炎癥因子水平 各試驗(yàn)組IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β隨患者肝功能的下降呈遞增趨勢(shì)，組間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組血清炎癥因子水平比較

2.3 肝功能指標(biāo) 各試驗(yàn)組TBil均高于對(duì)照組，ALB均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且TBil隨肝功能下降呈遞增趨勢(shì)，ALB隨肝功能的下降呈遞減趨勢(shì)，組間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 各組肝功能指標(biāo)比較

2.4 相關(guān)性分析 經(jīng)Spearman相關(guān)分析，乳桿菌、雙歧桿菌與四項(xiàng)炎癥因子指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)，腸桿菌、梭菌、腸球菌與四項(xiàng)炎癥因子指標(biāo)呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。乳桿菌、雙歧桿菌與肝功能指標(biāo)TBil呈負(fù)相關(guān)，與ALB呈正相關(guān)，腸桿菌、梭菌、腸球菌與肝功能指標(biāo)TBil呈正相關(guān)，與ALB呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 VHC患者腸道菌群與血清炎癥因子及肝功能的相關(guān)系數(shù)(r)

3 討論

腸道菌群與肝臟健康關(guān)系密切。有研究指出，腸道吸收的營(yíng)養(yǎng)成分經(jīng)由肝臟代謝后合成人體所需物質(zhì)，在這一過(guò)程中，腸道菌群中的益生菌參與肝細(xì)胞蛋白質(zhì)代謝，可以幫助提高肝臟代謝能力，減輕肝臟解毒負(fù)荷，對(duì)肝臟具有保護(hù)作用[4-5]。如果腸道菌群失調(diào)，腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝紊亂，會(huì)損傷腸道黏膜，使通透性增加，細(xì)菌及代謝物進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，會(huì)加重腎臟負(fù)擔(dān)和損害，形成惡性循環(huán)[6-7]。反之，VHC患者肝功能損傷，肝臟代謝異常，對(duì)腸源性有毒物質(zhì)的分解能力下降，也會(huì)引起腸道菌群紊亂。由此可見(jiàn)，肝臟與腸道是相互作用的，腸道菌群穩(wěn)態(tài)、腸道屏障完整是保護(hù)肝臟健康的重要途徑。

本次臨床研究結(jié)果顯示，乳桿菌、雙歧桿菌與肝功能指標(biāo)TBil呈負(fù)相關(guān)，與ALB呈正相關(guān)，腸桿菌、梭菌、腸球菌與肝功能指標(biāo)TBil呈正相關(guān)，與ALB呈負(fù)相關(guān)，提示VHC患者腸道菌群紊亂與肝功能密切相關(guān)，紊亂程度越嚴(yán)重，肝功能水平越低。有學(xué)者在研究中指出[8-9]，腸道菌群紊亂是肝硬化患者肝功能下降的重要促發(fā)因素，在常規(guī)保肝治療基礎(chǔ)上，予以肝硬化患者三聯(lián)活菌治療，積極糾正腸道菌群失衡，結(jié)果顯示肝功能指標(biāo)得到顯著改善，證明了腸道菌群失衡對(duì)肝硬化患者肝功能的影響，與本文研究結(jié)論相符。

VHC病理進(jìn)展過(guò)程中有著復(fù)雜的免疫反應(yīng)，亦會(huì)引起全身炎性癥狀，參與肝細(xì)胞損傷機(jī)制。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群也與慢性炎癥存在密切關(guān)聯(lián)。目前，已有證據(jù)表明，改變腸道菌群能夠增加炎癥標(biāo)志物[10]。另有研究指出，腸道菌群可能是炎癥反應(yīng)的驅(qū)動(dòng)力，腸道菌群紊亂，腸屏障功能減弱，會(huì)加速毒素進(jìn)入血液，引發(fā)炎癥，而有些益生菌具有物理強(qiáng)化腸屏障的功能，其產(chǎn)生的短鏈脂肪酸也有助于減少促炎細(xì)胞因子的生成[11-12]。本研究比較觀察VHC患者腸道菌群與炎癥因子水平，結(jié)果顯示菌群紊亂越嚴(yán)重，患者的血清炎癥因子水平越高，考慮原因在于腸道菌群紊亂，有益菌遭到抑制，VHC患者炎癥反應(yīng)增加了胃腸道通透性，大量釋放的炎性因子得以通過(guò)腸屏障進(jìn)入血液，損傷肝臟，促使VHC進(jìn)展。這使得肝臟的代謝與分泌功能進(jìn)一步惡化，加劇了炎癥因子釋放與腸道菌群紊亂，最終導(dǎo)致惡性循環(huán)。

綜上所述，腸道菌群失調(diào)與血清炎癥因子及肝功能密切相關(guān)，維持乙型VHC患者腸道菌群平衡，對(duì)降低血清炎癥因子水平，改善肝功能具有積極作用，應(yīng)引起臨床重視。