孕婦血清HPA-1a抗體水平對新生兒血小板減少癥的預測價值

熱娜古麗·吾買爾，李玉嬌，居敏，宋小川

(新疆醫科大學第一附屬醫院，烏魯木齊830054)

新生兒血小板減少癥(NT)的發生率為18%～35%[1]，多發于早產兒、低體質量兒或母親患有妊娠期疾病的足月兒，是新生兒常見的血液異常性疾病，也是引起新生兒出血的主要原因。NT病情進展迅速，若不及時治療極易出現顱內出血、神經系統后遺癥等嚴重并發癥，病死率高達10%。因此，早期發現和干預對于降低NT發生率和減少并發癥的發生具有積極意義。以往人們多采用檢測體液免疫因子如血小板相關抗體PA-IgM來預測NT，PA-IgM是一類血小板細胞膜表面抗原誘導的相關漿細胞抗體，其能夠在外源性病毒顆粒的誘導或感染性病原體的激活等條件下表達，破壞血小板細胞膜的完整性。人類血小板抗原-1a(HPA-1a)是一類血小板特異度抗原，約10%HPA-1a抗體陰性的女性在用胎兒HPA-1a抗體陽性血小板免疫后產生HPA-1a抗體，且這些女性大多數具有主要組織相容性抗原HLA-DRB基因[2]。目前，尚無關于HPA-1a抗體對NT影響的報道。本研究通過檢測孕婦血清HPA-1a抗體水平，探討其對NT的早期預測價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年3月～2018年5月在新疆醫科大學第一附屬醫院規律產檢并最終分娩的孕婦314例。納入標準：年齡23～35歲；單胎妊娠；彩超排除胎兒畸形或先天性心臟病；排除死胎或死產、新生兒窒息、母親臨床資料不完整者。本研究獲得醫院倫理委員會批準，受試對象均知情同意。

1.2 NT判定方法[3]根據新生兒出生后臍血或3 d內外周血檢測，血小板計數滿足至少2次<100×109/L；其中PLT<50×109/L為重度NT，(50～100)×109/L為輕度NT。

1.3 血清HPA-1a抗體、PA-IgM檢測方法 于孕20周采集孕婦靜脈血5 mL，離心后取上層血清，采用HPA-1a抗體標準抗血清、MASPAT試劑盒測定血清HPA-1a抗體水平，采用固相凝集法測定PA-IgM水平。

2 結果

2.1 新生兒NT發生情況 314例新生兒中，發生NT 60例，發生率為19.11%，其中輕度42例、重度18例。根據新生兒是否發生NT將孕婦分為NT組和非NT組。

2.2 兩組臨床資料比較 NT組年齡(27.17±4.66)歲，產次(27.53±4.39)次；非NT組年齡(1.44±0.51)歲，產次(1.47±0.63)次；兩組年齡、產次比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。NT組患免疫性疾病、妊娠期血小板減少癥、剖宮產及早產兒比例高于非NT組(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料比較[例(%)]

2.3 兩組孕婦HPA-1a抗體、血小板相關抗體比較 NT組HPA-1a抗體水平、PA-IgM水平高于非NT組(P均<0.05)；NT組中，重度NT孕婦HPA-1a抗體水平、PA-IgM水平高于輕度NT孕婦(P<0.05)。見表2。

表2 兩組孕婦HPA-1a抗體、血小板相關抗體及血小板水平比較

2.4 NT發生的影響因素分析結果 將上述有統計學意義的指標納入多因素Logistics回歸分析，結果顯示，母體患有免疫系統疾病(OR=4.323)、妊娠期血小板減少癥(OR=7.419)、HPA-1a抗體高表達(OR=1.150)是NT發生的獨立危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 發生NT影響因素的多因素分析結果

2.5 HPA-1a抗體和PA-IgM對NT的預測價值 ROC曲線顯示，HPA-1a抗體預測NT的AUC為0.993，95%CI為0.978～1.000；其最佳截點值為211 AU/L，以此為界值預測NT的敏感度為91.67%、特異度為98.61%。PA-IgM預測NT的AUC為0.701，95%CI為0.522～0.879；其最佳截點值為67 ng/mL，以此為界值預測NT的敏感度為79.17%、特異度為74.44%。HPA-1a抗體對NT預測的敏感度和特異度均高于PA-IgM。見圖1。

圖1 HPA-1a抗體和PA-IgM預測NT的ROC曲線

3 討論

關于NT的發病機制目前尚不明確。有研究認為，NT可能與母體部分血小板抗體通過胎盤進入胎兒體內導致血小板破壞所致[4]；也有研究認為，母體患先天性免疫系統疾病與NT的發生具有相關性[5]。導致NT發病的主要原因為血小板生成減少和破壞過多，在新生兒中破壞過多占主導因素，宮內感染、新生兒窒息和母體免疫功能紊亂均會造成胎兒在宮內血小板不同程度地遭到破壞[6]。隨著檢測技術的不斷進步，免疫因素造成的新生兒血小板減少受到廣泛關注。很多學者認為，無論是新生兒同種免疫還是自身免疫造成的NT，其發病機制均與母體的血小板抗原抗體有關;母體產生的抗血小板抗體通過胎盤進入胎兒的血液循環，在胎兒脾臟及其他單核巨噬細胞系統停留并破壞，導致新生兒在母體內就已經發生血小板減少[7～9]。此外，因母體原因導致的NT血小板破壞更為迅速，造成明顯的黏膜、消化道及顱內出血，約40%為重癥NT[10]，嚴重威脅新生兒生命。

與血小板抗原相對應，人類的血小板抗體也分為兩類，一類是針對血小板的非特異度抗體，稱之為血小板相關抗體；另一類是特異度抗體，稱為HPA，此種抗體在同種免疫中表達，但在血小板輸注無效的病例中表達卻較低[11]。本研究中新生兒NT的發生率約為19.11%，與以往報道[12]相近。對比NT組與非NT組的臨床資料發現，母親患有免疫性疾病、妊娠期血小板減少癥及早產的新生兒，NT發生率更高。組間比較發現，NT患兒出生體質量低于非NT組，這與早產兒相對應，早產兒出生體質量多較低，且早產兒各種疾病發生率均高于足月產兒，這點在業內已經被公認；血清學檢測方面，特別是在重度和輕度NT亞組之間，重度NT亞組的母體HPA-1a抗體水平高于輕度NT組。國外研究表明，NT患兒的母親與正常新生兒母親相比，其體內HPA-1a抗體陽性率升高[13]。

對早產、免疫性疾病、妊娠期血小板減少癥、HPA-1a抗體水平等指標進一步行多因素分析，結果顯示，母體患有免疫系統疾病、妊娠期血小板減少癥、HPA-1a抗體高表達是NT發生的獨立危險因素。對HPA-1a抗體和PA-IgM進行ROC曲線分析，得出HPA-1a抗體在預測NT方面的AUC高于PA-IgM，在診斷效能方面，HPA-1a抗體也展現出良好的預測價值。關于妊娠與血小板抗體高表達之間的關系，目前認為在孕20周時檢測血小板抗體是必要的[14]。

Resch等[15]報道，對于存在免疫性疾病且無法正常生育的患者，通過體外受精能夠早期針對性的進行相關疾病分析，進而有效避免NT的發生。但少有對血小板抗體特別是HPA-1a抗體的定量檢測在預測NT中的價值報道。本研究結果顯示,孕婦血清HPA-1a抗體水平高表達是發生NT的獨立危險因素，在早期預測新生兒血小板減少癥發病風險中具有較高的效能。本研究受到樣本量和地域因素限制，研究結論尚需要大樣本多中心研究證實；且HPA-1a抗體定量檢測在孕期的波動本研究未涉及，也限制了該指標的應用時機。