HPV型別與宮頸癌的臨床病理特征關系研究＊

敖梅紅，鄭涵，李明梅，李隆玉

（江西省婦幼保健院腫瘤科，南昌 330006）

已證實人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的直接病因， 不同的地區， 不同病理類型宮頸癌其HPV 感染型別有一定的差別。然而，在宮頸癌發生發展過程中是否也存在不同的HPV 基因型別也存在差異呢？ 本研究旨在探討宮頸癌高發區江西地區宮頸癌中不同HPV 感染的型別與宮頸癌病理特性之間的關系，為宮頸癌防治提供科學依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 回顧性分析我院腫瘤科于2015 年1 月-2015 年12 月住院因IB-IIA 宮頸癌行根治性宮頸癌手術患者。入選標準：既往無宮頸手術史，無盆腔放射治療史；術前3 個月內已用導流雜交技術進行HPV 型別檢測；資料完整。 排除標準：既往宮頸手術史，盆腔放射治療史；未行或用其他方法檢測宮頸HPV 型別；資料不完整。

1.2 組織學、臨床分期判斷標準 組織病理和臨床分期由2 名本院該專業的專家進行診斷， 有疑問時經第3 名專家協商確診。 組織病理分類遵照2014 年世界衛生組織分類標準： 鱗狀細胞癌、腺癌、 其他類型腫瘤。 子宮頸癌的臨床分期按2009年FIGO 子宮頸癌的臨床分期標準。

1.3 研究方法

1.3.1 HPV 型別檢測 在術前3 個月內采用導流雜交技術進行HPV 型別檢測方法： 針對HPV L1段基因設計引物,利用生物素標記的引物進行PCR擴增,然后DNA 快速雜交儀,與固定在纖維膜上的HPV 基因型的特異性探針進行雜交和顯色, 檢測HPV 感染型別。 包括 HPV6、11、l6、18、26、31、33、35、39、40、42、43、44、45、51、52、53、54、56、58、59、61、66、68、73、82、83 及 CP8304。

1.3.2 結果判定 每一張芯片有生物素點和IC 點各一個，當兩點同時顯色才為HPV 陽性。根據雜交膜條上相應點的有無和位置判讀HPV 感染的亞型，多點陽性即為多重感染。

1.4 統計學 分析采用SPSS 16.0 軟件進行統計學處理，計數資料采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法，以P＜0.05 表示差異有統計學意義.

2 結果

2015 年 1 月-2015 年 12 月在我院腫瘤科有339 人因IB-IIA 期宮頸癌行根治性宮頸癌手術，符合本研究條件的141 例，其中鱗癌132 例，腺癌7 例，其他病理類型2 例。年齡為26-67 歲，中位年齡 46 歲；IB1 期 110 例，IB2 期 15 例，IIA1 期 13例，IIA2 期 3 例。

宮頸癌組織中總HPV 感染率為89.4%（126/141），單一感染率為 77.3%（109/141），多重感染率為12.1%（17/141）。 單一感染中主要感染型別依次為 HPV l6、18、52 和 58，分別為 82 例、12 例、4 例、3 例；17 例多重感染中含 16 型、18 型， 分別為 14例、2 例。

HPV 多重感染與單一感染、無HPV 感染的比例在病理分級方面存在差異(P＜0.05)，在年齡、脈管見癌栓、肌層浸潤、臨床分期、病理類型和淋巴結轉移上無差異（見表1）。

16、18 型感染（含多重感染）與其他型別感染、無HPV 感染的比例在病理分級方面存在差異 (P＜0.05)，在年齡、脈管見癌栓、肌層浸潤、臨床分期、病理類型和淋巴結轉移上無差異（見表2）。

表1 141 例宮頸癌患者HPV 感染狀態與臨床病理特征關系

3 討論

子宮頸癌一直是危害女性生命三大癌癥之一，對女性健康產生嚴重威脅。 全球每年約 50 萬新發子宮頸癌患者， 給包括我國在內的發展中國家子宮頸癌患者家庭及社會造成較重負擔[1]。 發達國家（尤其是歐洲）因從1960 年代開始就開展宮頸癌篩查， 該病的發病率和死亡率以每年2%-4%遞減，呈明顯下降趨勢。2009 年國家衛生部全面開展了對農村婦女免費的兩癌 (子宮頸癌和乳腺癌)篩查項目，發現宮頸癌例數增多，以早期宮頸癌增加為主，篩查效果初步成效[2]，但子宮頸癌防治形勢仍不樂觀。 子宮頸癌的發生與 HPV 感染有密切相關性。 研究表明，有一半以上的有性生活史的女性曾感染過HPV， 但絕大部分的女性感染的病毒一段時間內可被自身免疫清除， 僅有一小部分人群將會出現高危型HPV 持續感染[3]。 環境、遺傳學或免疫學等因素可能在宮頸癌的發生過程中也起著關鍵的作用[4]。 本研究旨在探討宮頸癌高發區江西地區宮頸癌中不同HPV 感染的型別與宮頸癌病理特性之間的關系，為宮頸癌防治提供科學依據。

表2 141 例宮頸癌患者HPV 不同型別感染與臨床病理特征關系

在宮頸病變的進展中，HPV 分型比HPV 負荷更為重要，相關性更為密切。 有學者[5]對丹麥哥本哈根11088 名登記在冊的婦女進行了為期數年的跟蹤隨訪研究，結果發現，連續兩次HPV 檢測（相隔2 年）陰性的危險系數均為1.0，第一次、第二次均為陽性， 感染型別至少有一種是相同的， 其致HSIL 的危險系數為813.0。 本研究針對IB-IIA 宮頸癌行根治性宮頸癌手術141 例資料分析宮頸癌中單一HPV 感染為主。宮頸癌組織中總HPV 感染率為 89.4%（126/141）， 單一感染率為 77.3%（109/141），多重感染率為 12.1%（17/141），主要感染型別依次為 HPV l6、18、52 和 58。 可 見宮頸 癌與HPV 感染是密切相關的，HPV l6、18 仍為主導地位，HPV 型別不同致癌可能性不同。

但對宮頸癌患者HPV 感染的分布情況及多重感染與臨床病理特征的關系仍不完全明確[6,7]。我們研究宮頸癌IB-IIA 期早期宮頸癌，發現HPV 多重感染與單一感染、 無HPV 感染的比例在病理分級方面存在差異(P＜0.05)；在年齡、脈管見癌栓、肌層浸潤、 臨床分期、 病理類型和淋巴結轉移上無差異；16、18 型感染與其他型別感染、無 HPV 感染的比例在病理分級方面也存在差異(P＜0.05)，在年齡、脈管見癌栓、肌層浸潤、臨床分期、病理類型和淋巴結轉移上無差異。 其原因可能是HPV 感染是宮頸癌發生的重要原因， 目前已有研究證實當人體感染高危型HPV 后，HPV 可以將自身的DNA 整介到機體DNA 中，通過無限復制導致細胞癌變[8]。而HPV 多重感染可能意味著患者HPV 感染時間更長，細胞癌變時間史長有關。 有學者[9]報道年齡在50 歲以上、分期為III-IV 期、鱗癌、淋巴結轉移的患者HPV 多重感染率更高。 與我們的研究結果有所不同，推測我們研究的是早期宮頸癌，可能宮頸癌至中晚期后體內原有的免疫力低下導致潛伏期病毒復活有關。

綜上所述， 我們認為 HPV 多重感染及HPV16、18 型感染與宮頸癌患者病理分級有關，與年齡、脈管見癌栓、肌層浸潤、臨床分期、病理類型和淋巴結轉移上無差異,推測可能是獨立的致癌因子。后續將擴大樣本數，前瞻性研究來證實。另外，繼續跟蹤研究， 探討HPV 型別與治療療效是否有關； 同時從分子水平進一步探討HPV 病毒感染后如何導致細胞癌變。當HPV16、18 型感染或合并多重HPV 感染時需提高警惕。