周 洋 藍國兵佘小漫于 琳周冬梅金寶紅 何自福③

(1東方市農(nóng)業(yè)服務(wù)中心 海南東方572600;2廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所 廣東廣州510640;3江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所 江蘇南京210014)

苦瓜（Momordica charantiaL.）又名涼瓜，為葫蘆科（Cucurbitaceae）苦瓜屬（Momordica）一年生草本攀緣植物，因果實含有一種特殊苦味的糖苷，故名苦瓜。苦瓜起源于非洲，廣泛分布于熱帶、亞熱帶及溫帶，南宋時傳入我國，栽培歷史悠久［1-2］。苦瓜維生素C的含量居各種瓜類之首，并含有氨基酸及礦物質(zhì)，營養(yǎng)十分豐富?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，苦瓜中含有一些藥理活性成分可以抗菌、抗腫瘤，降低膽固醇，可以提高人體免疫力等［3-6］。

海南是我國重要的外運型冬季蔬菜生產(chǎn)基地之一，對保障全國菜籃子穩(wěn)定起到了不可替代的作用。苦瓜是海南省主要蔬菜作物品種之一，年種植面積約0.8萬hm2。由于長期連作栽培，品種單一，大量施用化肥，加上海南高溫高濕的氣候環(huán)境，極易造成苦瓜病蟲害的發(fā)生和蔓延［7］。

苦瓜白粉病是由瓜類單囊殼菌及二孢白粉菌侵染引起，在苗期、成株期均可發(fā)病，主要危害葉片、葉柄及莖。發(fā)病植株葉片初期著生白色粉層，后期逐漸褪綠、黃化，導(dǎo)致光合作用降低，影響果實發(fā)育，引起植株早衰，縮短采收期，一般減產(chǎn)20%～50%［8］。目前，生產(chǎn)上主要采用化學(xué)藥劑防控苦瓜白粉病，而長期大量施用農(nóng)藥不可避免地對品種質(zhì)量安全和生態(tài)環(huán)境安全構(gòu)成威脅，也極易導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性。培育和種植抗病品種是防治苦瓜白粉病最經(jīng)濟有效、最環(huán)保的措施［9-10］。為此，本文收集了在海南生產(chǎn)上推廣種植的16個苦瓜品種，采用溫室內(nèi)苗期人工噴霧接種法，鑒定了這些品種對白粉病的抗性水平，以期為海南苦瓜品種的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，也為苦瓜抗病育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 苦瓜品種

供 試 苦 瓜 共16個 品 種，‘熱 研1號’、‘Z1745’、‘熱研3號’、‘Z1721’、‘Z1801’由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所提供；‘1號苦瓜’、‘海豐’、‘福田’、‘豐田6號’、‘順溜’、‘海研2號’、‘石頭’種子由海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所提供；‘石頭一號’、‘綠秀’、‘萬綠’、‘東綠99’種子由三亞豐茂同和農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司提供。這些品種在海南生產(chǎn)均有較大面積的推廣應(yīng)用。

1.1.2 白粉病菌

從海南省屯昌縣楓木鎮(zhèn)苦瓜種植基地采集感染白粉病菌的新鮮苦瓜病葉，接種于感病苦瓜品系幼苗植株上，溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)、擴繁，用于苦瓜白粉病抗性接種，培養(yǎng)室溫18～23℃，濕度70%～80%。從接種發(fā)病的苦瓜植株上采集病葉，用毛筆刷取葉片上的孢子于無菌水的燒杯中，攪拌均勻，配制孢子懸浮液，接種孢子懸浮液分生孢子濃度：103個/mL。

1.2 方法

1.2.1 苦瓜苗的準備

先將苦瓜種子用55℃溫水浸種15 min，用自來水洗凈，30℃恒溫催芽，待胚根露白時直播于盛滅菌營養(yǎng)基質(zhì)（廣州億超公司）的育苗盤（4×8格）中，1穴1粒。每品系設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)種植32株，在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所大豐基地溫室內(nèi)自然光照下培養(yǎng)。每天早晚各淋水一次，以基質(zhì)濕潤為宜。當苦瓜苗培養(yǎng)至2葉1心時，用于人工接種。

1.2.2 人工接種

手持式小型噴霧壺，將接種孢子懸浮液均勻噴灑至苦瓜的2片真葉上，以無液珠下滴為宜。接種后，各處理苦瓜植株置于相對濕度70%～80%，溫度22～25℃，光線充足的溫室內(nèi)，接種后各處理的水肥按常規(guī)管理。

1.2.3 調(diào)查方法

接種后，每5 d調(diào)查一次，逐株調(diào)查其病級，計算各處理的病情指數(shù)；病情等級的劃分參照Sakata等［11］和栗建文等［12］的方法。

瓜類白粉病個體病株病情分級標準：

0級，整株葉片無病癥；

1級，病斑面積占整株葉面積的5%以下；

3級：病斑面積占整株葉面積的6%～10%；

5級：病斑面積占整株葉面積的11%～20%；

7級：病斑面積占整株葉面積的21%～40%；

9級：病斑面積占整株葉面積的41%以上。

病情指數(shù)＝∑［（各級病株數(shù)×相對級數(shù)）/調(diào)查總株數(shù)×最高級數(shù)值］×100

苦瓜品種對白粉病抗性水平評價標準：

高抗（HR）0＜病情指數(shù)＜25；

抗病（R）25≤病情指數(shù)＜45；

中抗（MR）45≤病情指數(shù)＜65；

感?。⊿）65≤病情指數(shù)＜80；

高感（HS）80≤病情指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

室內(nèi)苗期人工接種結(jié)果表明，在接種15 d后，所有苦瓜品種均發(fā)病且病情穩(wěn)定，但品種的病情指數(shù)存在明顯差異，其中‘Z1801’苦瓜的病情指數(shù)最低，平均病情指數(shù)為53.12；‘石頭’苦瓜的病情指數(shù)最高，平均病情指數(shù)為93.63（表1）。方差分析結(jié)果表明，‘Z1801’品種與其他15個品種的病情指數(shù)差異達到顯著水平；‘海研2號’、‘熱研1號’、‘1號苦瓜’與‘豐田6號’等11個品種的病情指數(shù)差異達到顯著水平，與‘順溜’苦瓜間差異不顯著；‘順溜’與‘東綠99’等8個品種的病情指數(shù)差異達到顯著水平，與‘豐田6號’、‘綠秀’、‘萬綠’之間差異不顯著；‘豐田6號’、‘綠秀’與‘福田’等6個品種病情指數(shù)差異達到顯著水平，與‘萬綠’、‘東綠99’、‘Z1721’之間差異不顯著；‘萬綠’、‘東綠99’、‘Z1721’、‘福田’、‘海豐’、‘Z1745’與‘石頭一號’、‘石頭’的病情指數(shù)差異達到顯著水平，與‘熱研3號’的差異不顯著；‘熱研3號’與‘石頭一號’、‘石頭’的病情指數(shù)差異達到顯著水平；‘石頭一號’與‘石頭’之間的病情指數(shù)差異達到顯著水平。

根據(jù)苦瓜品種對白粉病抗性水平評價標準，供試的16個苦瓜品種中，‘Z1801’、‘海研2號’、‘熱研1號’、‘1號苦瓜’這4個品種對白粉病表現(xiàn)中抗；‘順溜’、‘豐田6號’、‘綠秀’、‘萬綠’、‘東綠99’、‘Z1721’、‘福田’、‘海豐’、‘Z1745’、‘熱研3號’10個品種表現(xiàn)感病；‘石頭’與‘石頭一號’2個品種表現(xiàn)高感。

表1 16個苦瓜品種對白粉病抗性人工接種鑒定結(jié)果

3 討論與結(jié)論

通過溫室內(nèi)人工噴霧接種方法，就來自海南生產(chǎn)上的16個苦瓜品種對白粉病的抗性進行鑒定，‘Z1801’、‘海研2號’、‘熱研1號’和‘1號苦瓜’4個品種表現(xiàn)中抗，占供試品種25.00%；‘順溜’等10個品種表現(xiàn)為感病，占供試品種62.50%；而‘石頭’與‘石頭一號’2個品種表現(xiàn)為高感，占供試品種12.5%。因此，海南生產(chǎn)上推廣種植的苦瓜品種對白粉病的抗性存在明顯差異。

瓜類白粉病抗性鑒定方法，目前主要有田間自然發(fā)病鑒定和室內(nèi)人工接種鑒定。田間環(huán)境條件復(fù)雜且不可控，高溫天氣不利于白粉病菌孢子的萌發(fā)，干旱不適宜白粉病菌的傳播擴散，雨水過多易將白粉病菌分生孢子沖刷掉落等，這些環(huán)境不可控因子均直接影響瓜類白粉病的發(fā)生與否以及發(fā)病輕重。相比于田間自然發(fā)病鑒定，室內(nèi)人工噴霧接種，溫度和濕度可人為控制在一定范圍，創(chuàng)造適宜白粉病發(fā)生的條件，而且接種用白粉病菌濃度均勻一致，因此鑒定結(jié)果準確、可靠，且可重復(fù)［13］。

瓜類白粉病室內(nèi)人工接種方法有噴霧法、刷葉法及摩擦法等。張若緯等［14］研究發(fā)現(xiàn)，噴霧接種法不僅操作方便，而且甜瓜白粉病的發(fā)病率高，是最適宜的接種方法。目前，噴霧接種法已廣泛應(yīng)用于瓜類苗期白粉病接種鑒定［15-17］。

作物品種在田間的抗病性表現(xiàn)，不僅與品種本身是否含抗病基因直接相關(guān)，而且還受溫濕度等氣象因子、田間病原菌的致病力、栽培管理水平和生產(chǎn)者用藥水平等諸多因素影響［18-19］。因此，生產(chǎn)中在選用抗病品種的同時，還應(yīng)加強田間栽培管理，創(chuàng)造一個利于苦瓜植株生長、不利于白粉病菌生長繁殖的條件，實現(xiàn)對苦瓜白粉病的綜合防控。