淺談法醫物證DNA自動化檢驗技術的有效運用

張二偉 何 軍 桑志明 李曼曼

1.周口三川司法鑒定所，河南 周口 466000；

2.洛陽市公安局，河南 洛陽 471000

公安局可以快速破案離不開物證的支持，在到達案發現場后，首先技術人員會采集有效物證，并對物證進行DNA檢測，通過檢測結果可以為偵破案件提供方向，更可以快速鎖定嫌疑人。基于此，檢測DNA物證時，選擇高科技檢驗技術可有效提高結果可信度，為破案提供便利。在本次研究中對收集到的生物檢材進行不同技術法（工作站-chelex法、手工-chelex法）檢驗，并對不同技術法檢驗結果進行對比分析，以下為詳情資料。

一、材料與方法

（一）檢測材料

隨機取2018年10月至2019年10月在各案件中收集的600份證物作為本次主要檢驗對象，生物檢材包括血跡、毛發、組織、骨、煙蒂、指甲拭子、精斑，分別為230份、104份、62份、46份、76份、44份、38份。

（二）檢測方法

將精斑置入96個孔的U型板，當精斑中混有女性上皮細胞時，應先將其裂解，徹底去除女性上皮細胞，然后實施離心處理，取上清備用。血跡標本：3-5根長3mm紗線，毛發：需帶有毛囊且長為3mm；軟骨樣本：1-2片厚為1mm肋軟骨切面；煙蒂：煙蒂需含三分之一圈口端煙紙；指甲拭子：3-5根長3mm紗線；精斑：3-5根長3mm紗線。

1.提取DNA

按照chelex流程提取DNA，將“DNA-chelex”自動提取程序裝載到freedom EVO 100-4工作站內，嚴格按照流程使用工作站法、手工法提取受檢材料DNA。

2.PCR擴增

按照PCR操作流程進行，將“PCR-Chelex”自動程序裝載到freedom EVO 75-2工作站內，構建PCR反應體系，擴增使用儀器型號為AB-9700。

3.毛細管電泳檢測

按照STR操作流程進行，將“STR-Chelex”自動上樣程序裝載到freedom EVO 75-2工作站內，構建PCR擴增產物DNA變性、STR檢測體系，使用儀器為型號為AB3130。

（三）觀察指標

①對比兩種檢測技術檢測結果。②當樣品數為96、192時，檢驗材料予以同板STR檢測，對比兩種檢測技術檢測時間。③取96份沒有關系的個體血斑樣本，以交叉形式放入96個孔的U型板中，余下96個空白孔，提取DNA后檢測STR，連續做五次，對交叉污染狀況進行分析。

（四）統計學處理

研究取得資料經統計學軟件SPSS19.0進行對比，檢測結果數據采用檢驗模式為卡方，檢測時間數據采用檢驗模式為t計算器，P值結果＞0.05表示無差異，P值＜0.05表示有差異。

二、結果

（一）不同檢驗技術檢測結果比較

手工-chelex法與工作站-chelex法檢測成功率比較并無差異，P＞0.05。具體數據，見表1。

表1 不同檢測技術檢測結果比較（%/份）

（二）不同檢驗技術檢測時間比較

與手工-chelex法檢測時間比較，工作站-chelex法檢測時間較短，數據差異顯著P＜0.05，見表2。

表2 不同檢驗技術檢測時間比較（±s，min）

表2 不同檢驗技術檢測時間比較（±s，min）

樣本數量 工作站法 手工法 t P 48 3.4±0.8 5.2±1.2 5.581 ＜0.05 96 4.0±0.9 9.1±1.7 11.857 ＜0.05

（三）交叉污染狀況

本次研究中共連續做了五次交叉污染實驗，在試劑空白孔內并沒有檢測到臨近樣本STR分型，自動化工作在提取DNA時不會發生孔間交叉感染現象。

三、討論

DNA存儲著遺傳信息，在破案過程中DNA是重要證據，將在現場獲取重要證物交到法醫手中，法醫通過相關技術在證物中提取DNA，為案件破獲提供證據。想要保證DNA檢驗準確性，最關鍵的是提取DNA，DNA自動化檢驗技術體統可以提取不同載體上DNA，在載體上提取DNA后進行檢驗，可為破案提供有效證據。

機體細胞較為穩定，也就是說一個人機體血液、毛發等產生DNA圖形是一致的，這也為法醫檢測提供了便利，即使是最細微的肌肉、骨片等，利用先進技術均可以提取到DNA，并與犯罪嫌疑人DNA進行比對，不僅為破案提供了證據，更可以快速定罪。科學技術的提升，使得DNA分析技術也越來越完善，目前法醫使用的DNA分析技術甚至可以從多年前保存樣本中將DNA提取出來，現有DNA分析檢測技術多種多樣，可以分析不同時期細胞殘留。

在此研究中，對600份檢材分別使用工作站-chelex與手工-chelex方法，通過比較得知：雖然工作站-chelex法檢驗成功率略高于手工-chelex法，但是并不具有統計學意義；與手工-chelex法比較，工作站-chelex法檢驗花費時間較短，且具有統計學意義；進行交叉污染實驗證實，DNA自動化檢驗技術并不會產生孔間交叉污染。

雖然通過DNA自動化檢驗技術系統可以提取DNA并進行檢測，但是在實際中也會受到一些因素影響，一旦有異常勢必會影響檢測結果，一些證物收集極為不易、證物數量少等，一旦被損害，就失去了價值，為破案增加了難度，甚至使犯罪嫌疑人逃脫法律制裁。由此可見法醫在提取DNA時，應嚴格按照DNA自動化檢驗鑒定標準進行操作、控制物證保管等，更要強化對法醫培訓、建立完善檢測制度、證物管理等制度，保證法醫物證DNA自動化檢驗結果、保障檢驗結果科學性、權威性。

總而言之，在檢驗物證時，法醫可使用DNA自動化檢驗技術系統，可及時為破案提供有效證據，利于案件破獲。