慢性化膿性中耳炎病原菌分布及耐藥性研究

陳虹 高單 劉軍

【摘要】目的 探究慢性化膿性中耳炎病原菌分布情況及耐藥性。方法 480例慢性化膿性中耳炎患者， 采集患者膿性分泌物， 給予細菌培養， 對病原菌進行分離。統計分析病原菌分布、革蘭陰性桿菌耐藥、革蘭陽性球菌耐藥情況。結果 480例患者共分離出455株病原菌， 包括革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌、酵母菌、曲霉菌。其中以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌50株， 占比為10.99%。革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌對替卡西林/克拉維酸耐藥率最高， 達到40.8%， 其次為氨曲南， 耐藥率為39.2%;肺炎克雷伯菌對復方新諾明耐藥率為27.1%。革蘭陽性球菌中肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥率最高， 為82.0%， 其次為克林霉素， 為52.0%;金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%。結論 慢性化膿性中耳炎病原菌以銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌以及金黃色葡萄球菌等為主， 在臨床用藥時應結合藥物敏感試驗， 合理應用抗生素， 減少耐藥菌株的發生， 提升臨床治療效果。

【關鍵詞】 慢性化膿性中耳炎;病原菌;耐藥性;銅綠假單胞菌;肺炎鏈球菌;金黃色葡萄球菌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.24.090

作為臨床上常見的耳鼻喉科疾病， 慢性化膿性中耳炎主要指的是發生于中耳黏膜、骨膜或骨質深處的化膿性炎癥， 在嬰幼兒中有著較高的發病率， 成人發病率僅為2%～5%[1]， 患者表現為， 該疾病會破壞患者中耳生理學功能及解剖結構， 對患者聽力功能、交流功能產生一定的影響， 病程長、易反復感染， 存在顱內外并發癥風險[2]， 為臨床治療增加的一定的難度。隨著現代醫療衛生技術的不斷發展， 抗菌藥物在慢性化膿性中耳炎治療中得以應用， 慢性化膿性中耳炎發病率有所下降， 然而基于致病菌的復雜性與多變性， 再加上臨床抗菌藥物的濫用， 耐藥菌株不斷增多[3]， 這也在一定程度上降低了臨床治療效果， 因此加強細菌培養及藥敏試驗尤為重要。此次研究收集慢性化膿性中耳炎病例480例， 均為2018年12月～2019年12月本院收治患者， 對分泌物病原菌分布情況進行分析， 并進行耐藥性試驗， 旨在為臨床抗菌藥物的合理應用提供參考， 現對研究結果報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2018年12月～2019年12月本院收治的480例慢性化膿性中耳炎患者進行分析， 其中男266例， 女214例;年齡19～67歲， 平均年齡（36.38±10.21）歲;病程1～14年， 平均病程（7.48±2.18）年。

1. 2 納入及排除標準 納入標準：①所有患者經診斷及檢查均確診為慢性化膿性中耳炎[4];②患者臨床資料及病史、檢查記錄等資料完善， 檢查前均告知患者， 患者已了解且同意加入研究， 簽訂知情同意書， 符合醫學倫理學要求。排除標準：①經診斷合并心肝腎疾病或嚴重器質性病變患者;②神志不清或精神障礙患者;③合并其他類型耳科疾病患者;④近期接受過影響觀察指標的相關治療;⑤合并結核性中耳炎、急性化膿性中耳炎以及耳道膽脂瘤患者;⑥存在其他免疫性疾病患者;⑦合并其他急性、慢性感染性疾病患者;⑧妊娠期及哺乳期婦女[5-7]。

1. 3 方法

1. 3. 1 試劑與儀器 檢測耳道分泌物病原菌類型：耳道分泌物接種血平板、麥康凱平板、沙氏平板、巧克力平板， 24 h恒溫培養。檢測儀器：梅里埃VITEK-2[梅里埃診斷產品（上海）有限公司]。所用板卡類型：革蘭陰性桿菌鑒定板卡GN、腸桿菌科藥敏板卡GN334、非發酵菌板卡GN335、陽性球菌鑒定板卡GP、陽性球菌中葡萄球菌藥敏板卡GP639、酵母菌檢測板卡YST， 藥敏紙片購自法國生物梅里埃股份有限公司：如美羅培南紙片、環丙沙星紙片、紅霉素紙片等。

1. 3. 2 標本采集 患者確診后24 h， 將消毒棉拭子浸潤無菌生理鹽水， 在患者鼓室內或患側外耳道深部采集膿性分泌物， 放置于無菌試管中， 盡快送檢。

1. 3. 3 菌株鑒定與藥敏試驗 首先對患者外耳道皮膚予以75%酒精消毒處理， 然后嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》采用無菌試管內卷棉子對分泌物進行采集， 將采集標本接種于血平板、麥康凱平板、沙氏平板、巧克力平板。血平板、麥康凱平板培養溫度為35℃， 培養時間為18～24 h。沙氏平板培養溫度為28℃， 培養時間為24～48 h。巧克力平板培養溫度為35℃， 培養時間為18～24 h， 培養環境需要5%～10% CO2。根據培養情況對菌種進行分離鑒定及藥敏試驗。采用全自動細菌及藥敏鑒定儀VITEK-2對菌種進行鑒定及藥敏試驗， 部分抗生素敏感試驗采用的是K-B紙片法。連續3 d采集入選患者耳道膿性分泌物標本， 2 h內實施細菌培養， 并對培養結果進行篩選。結果判定依據的是美國臨床實驗室標準化委員會制定的判定標準。

1. 4 觀察指標 統計分析病原菌分布、革蘭陰性桿菌耐藥、革蘭陽性球菌耐藥情況[8-10]。

2 結果

2. 1 患者病原菌分布情況分析 480例患者共分離出455株病原菌， 包括革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌、酵母菌、曲霉菌。其中以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌50株， 占比為10.99%。見表1。

2. 2 革蘭陰性桿菌耐藥情況分析 革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌對替卡西林/克拉維酸耐藥率最高， 達到40.8%， 其次為氨曲南， 耐藥率為39.2%;肺炎克雷伯菌對復方新諾明耐藥率為27.1%。見表2。

2. 3 革蘭陽性球菌耐藥情況分析? 肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥率最高， 為82.0%， 其次為克林霉素， 為52.0%;金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%。見表3。

3 討論

慢性化膿性中耳炎是耳科常見的感染性疾病， 病程長、易反復感染， 隨著近年來抗生素的廣泛應用， 慢性化膿性中耳炎發病率有所下降， 但耐藥菌株卻呈現增加趨勢， 患者易出現菌群失調， 因此對分泌物給予細菌學培養尤為重要[11]。

以往學者在研究中對慢性化膿性中耳炎患者致病菌進行分析， 結果顯示銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌是最為常見的兩種致病菌[12]。此次研究480例患者共分離出病原菌455株， 其中主要以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌為96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌為68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌為50株， 占比為10.99%。與以往學者研究結果一致。文獻報道， 近年來慢性化膿性中耳炎致病菌呈現出2種不同發展趨勢：①耳真菌檢出率增加;②強致病菌檢出率下降[13]。有學者認為慢性化膿性中耳炎患者鼓室腔及外耳道深部溫度適宜， 為真菌生長創造了條件[14]。受時期、地區等因素的影響， 不同耐藥菌其對抗菌藥物耐藥性也有所不同， 但整體上呈現出增長趨勢， 這也在一定程度上對臨床抗菌藥物應用提出了更嚴峻的挑戰。世界衛生組織發布報告指出， 抗菌藥物的耐藥性已對人類健康造成嚴重威脅。目前， 防止抗菌藥濫用， 減少細菌耐藥的產生， 幫助公眾樹立科學用藥、合理用藥觀念非常必要[15]。我國針對抗菌藥物的臨床應用有著明確的規定， 針對普通藥物能夠治療的疾病不得擅自使用抗菌藥物。若隨意使用抗生素不僅會導致耐藥性的發生， 而且會產生嚴重不良反應、中毒等。隨著抗生素藥物在臨床的廣泛應用， 抗生素不合理應用現象泛濫， 不僅會引起病原菌譜變化， 而且會增加臨床耐藥性。金黃色葡萄球菌耐藥性考慮與基因mecA編碼的青霉素蛋白結合產生有關， 另外質粒介導的β-內酰胺酶與靶位青霉素結合產生蛋白變化也是金黃色葡萄球菌耐藥的主要機制。研究結果中金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%， 提示應結合患者病原菌類型給予相應抗菌藥物治療。

綜上所述， 慢性化膿性中耳炎病原菌類型主要包括銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌以及金黃色葡萄球菌等， 應加強對病原菌檢測及耐藥性試驗， 以為臨床抗菌藥物選擇提供可靠的參考依據， 發揮藥物作用， 減少耐藥的發生。

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[收稿日期：2020-03-30]